临床三种常规大便隐血检测方法的评价及其应用

目的时转铁蛋白（Tf）／血红蛋白（Hb）联合免疫法（联合免疫法）、血红蛋白单克隆抗体法（单克隆抗体法）和匹拉米洞法进行方法学比较并探讨三种大便隐血试验的临床应用价值。方法通过灵敏度与干扰性试验对三种大便常规检测实验方法学进行比较．并用三种试验方法同时对186例大便标本进行检测。结果联合免疫法、单克隆抗体法和匹拉米洞法血红蛋白（Hb）最低检出浓度分别为0．2，0．2和2bμg／ml，联合免疫法转铁蛋白最低检测浓度为0．04／μg／ml。匹拉米洞法能与人以及其他动物Hb反应，而单克隆抗体法和联合免疫法只能与人的Hb反应。一定浓度的vitC可遣成匹拉米洞法假阴性结果，而时另外两种试验方法的检测结果无影响。上消化道出血组三种方法检测阳性率分别为90．2％，74．5％和94．1％；下消化遗出血组三种方法检测阳性率分别为100．0％，96．3％和74．1％；正常对照组三种方法检测阳性率分别为6．5％，2．8％和10．2％。匹拉米洞法检测上消化道出血和下消化道出血组的阳性率分别为94．1％和74．1％。结论联合免疫法、单克隆抗体法与匹拉米洞法相互补充。相互结合对消化道出血性疾病检测有更高的临床诊断价值。

十堰地区健康人群骨代谢标志物参考范围的建立

目的建立十堰地区健康人群骨代谢相关标志物β-胶原特殊序列(β-crossLaps)、总Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(total procollagen type1 amino-terminal propeptide,tP1NP)和人N端中段骨钙素(N-MID Osteocalcin,N-MID-OT)参考区间。方法选择2010年3月至2010年10月来我院体检的年龄范围在30～79岁的健康体检人员215名,按性别、年龄进行分组,所有人员均经骨密度仪测量,按诊断标准排除骨质疏松症等相关疾病。采集清晨空腹血清,使用罗氏电化学全自动免疫分析仪检测tP1NP、β-crossLaps、N-MID-OT水平。结果 tP1NP有随年龄增高而浓度递增的变化趋势,特别是女性在50～59岁组明显增高,与30～39及40～49岁组比较,P<0.01。从年龄因素上分析,这可能与女性的绝经期有关。而β-crossLaps在男、女血清中的含量也是随年龄增大而逐渐升高,只是与最低年龄组比较,男性血清浓度的升高趋于平缓,而女性在50～59岁组开始增幅明显,P<0.05;N-MID-OT在男女组中有明显随年龄增长而逐渐下降的变化规律,这与性激素的减少有着直接的影响。因此我们按性别将年龄进行分组,设立了相应的参考区间。结论本实验室建立的3项血清骨转换标志物的参考区间与试剂厂家提供的有差异,建议各实验室建立各自的参考区间。

瑞舒伐他汀协同治疗对急性冠脉综合征患者血清炎性因子水平的影响

目的:观察急性冠脉综合征(ACS)患者应用瑞舒伐他汀协同治疗前后血清超敏C反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-18(IL-18)水平变化。方法:住院ACS患者140例,分为不稳定型心绞痛组(UAP组,n=62)、急性非ST段抬高型心肌梗死组(NSTEMI组,n=35)及急性ST段抬高型心肌梗死组(STEMI组,n=43);选择同期体检健康者作为对照组(健康对照组,n=50)。所有ACS患者从入院当日开始行常规治疗联合瑞舒伐他汀治疗2周。分别采用免疫比浊法和酶联免疫吸附法检测各组ACS治疗前后血清hs-CRP、TNF-α及IL-18水平,比较各组各指标水平差异及治疗前后变化。结果:治疗前ACS各组血清hs-CRP、TNF-α及IL-18水平均高于健康对照组(P<0.01);治疗2周后,ACS各组三项指标均较治疗前明显降低(P均<0.01),且与健康对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:瑞舒伐他汀可能通过明显降低血清炎性因子治疗ACS。

性激素与结核病关系的探讨

性激素水平对机体病变作用广泛而复杂。结核病的发病率在性别和年龄上的差异性,至少提示性激素与结核病的发生有一定关系。研究认为性激素对结核病的影响主要通过下调结核病患者免疫功能,因而调节性激素水平或可为临床结核病防治提供新策略。

IL-6基因-174C/G多态性与结核病易感性关系的Meta分析

目的：探讨 IL-6基因 SNP-174 C/G 位点多态性与结核病易感性的关系。方法利用计算机检索PubMed、Medline、EMbase、CNKI、CBM、VIP和万方数据库等搜集相关病例对照研究。文献经筛选和方法学质量评价后，采用Stata12．0软件进行Meta分析，计算合并OR值及其95％CI，最后进行敏感性分析及发表偏倚评估。结果共7篇文献纳入研究，其中病例组（结核病患者）1138例，对照组（健康体检者）1311例。 Meta分析结果显示，野生型G等位基因者结核病发病率高于突变型C等位基因者（ OR＝0．77，95％CI：0．64～0．91，P＜0．05）；野生型纯合子基因型（GG）者结核病发病率高于杂合子基因型（CG）者（OR＝0．72，95％CI：0．57～0．90，P＜0．05）；在显性遗传模式中CC＋CG基因型者结核病发病率低于GG基因型者（OR＝0．71，95％CI：0．57～0．88，P＜0．05）。对纳入研究以种族为分层因素进行分析，亚洲人群G等位基因者、野生纯合子基因型（ GG）者及显性遗传模式GG基因型者结核病发病率高于C等位基因者、杂合子基因型（ CG）者及CC＋CG基因型者。经Begg′s与Egger′s检验，纳入的所有研究未见明显发表偏倚。结论 IL-6基因-174C/G多态性中的等位基因G可能与结核病易感性风险增高相关，这种情况可能只存在于亚洲人群中。

丙型肝炎病毒基因型与慢性丙型肝炎患者病情严重程度之间关系的研究

目的分析丙型肝炎病毒(HCV)基因型与慢性丙型肝炎患者病情严重程度之间关系,为慢性丙型肝炎患者的临床诊断和治疗提供依据。方法采用直接测序法对HCV进行基因分型,并测量患者未治疗前HCVRNA水平、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、清蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)水平。结果共对321株HCV进行基因分型,其中1a型占1.2%,1b型占78.5%,2a型占8.7%,3a型占2.2%,3b型占4.7%,6a型占2.8%,6b型占1.9%。HCV1型患者ALT、HCV-RNA、AST/PLT比值指数(APRI)水平明显高于非1型患者,差异有统计学意义(P值分别为0.009,<0.01,0.036);而AST、ALB、Hb、PLT、AST/ALT水平两者并无明显差异。结论 HCV1型患者HCV-RNA水平高于非1型患者,肝脏功能损害较非1型患者严重。

丙型肝炎病毒基因分型与治疗效果关系的研究

目的分析丙型肝炎病毒(HCV)基因型与利巴韦林联合聚乙二醇干扰素α-2a治疗效果的关系,为临床抗HCV治疗提供依据。方法选择179例慢性丙型肝炎初治患者进行利巴韦林联合聚乙二醇干扰素α-2a的标准方案进行治疗,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)进行HCV-RNA定量检测,采用基因测序检测进行HCV基因分型。治疗后评价持续病毒学应答(SVR)。结果 179例丙型肝炎患者中,HCV 1b型占79.3%,HCV 2a型占8.4%,HCV 3b型占5.0%,HCV 6a型占2.2%,HCV 1b、2a混合型占1.1%,其他型占4.0%。HCV 2a型患者获得SVR率明显高于HCV 1b型,差异有统计学意义(χ2=4.956,P=0.026)。结论该院HCV基因型主要为HCV 1b和HCV 2a型,HCV 1b型患者对标准治疗方案的疗效较2a型差。

湖北地区宫颈疾病患者HPV基因型及其年龄分布

目的:分析湖北地区宫颈疾病患者人乳头状瘤病毒(HPV)感染的基因型分布及与年龄的关系。方法:4 314例宫颈疾病患者,年龄21-86岁,按5岁一组分为10组,收集各组宫颈脱落细胞样本,应用PCR-基因芯片技术进行HPV分型检测,统计分析各组HPV总感染率和各亚型感染率及其年龄分布特点。结果:HPV总感染率为28.86%(1 245/4 314)。以单纯高危型HPV(hrHPV)为主,感染率为23.78%(1 026/4 314),单纯低危型HPV(lrHPV)感染率只占2.30%(99/4 314),余为混合感染。高危型中又以HPV16型最多,感染率为9.23%(398/4 314),其次为HPV52和58型,感染率为5.42%(234/4 314)和4.75%(205/4 314)。HPV总感染率以21-25岁组(29.97%)和51-55岁组(31.75%)最高,最低为31-35岁组(25.19%)和>65岁组(25.42%),但各组间差异无显著性(P>0.05)。单一感染率明显较多重感染率高(20.91%vs 7.95%,P<0.01)。结论:加强湖北地区宫颈疾病患者HPV感染的筛查和监测,有利于该地区女性人群生殖器疣和宫颈癌防治以及流行病学研究。

体检人群中慢性丙型肝炎患者临床特征研究

【目的】分析体检人群中慢性丙型肝炎（CHC）患者的临床特征，为CHC患者的早期诊断与治疗提供依据。【方法】回顾性分析体检人群中CHC患者的临床资料，并记录患者初次治疗时的 HCV‐RNA含量、丙肝病毒基因型及谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、血红蛋白（Hb）、血小板的（PLT）的水平。【结果】体检人群中共发现CHC患者58例，其中1b型占63．79％，2a型占17．24％，其他基因型占19．97％。体检人群CHC患者（HE组）与非体检发现的CHC患者（NHE组）相比，在HCV感染的危险因素、基因型分布、肝脏炎症相关指标方面均存在显著性差异（ P ＜0．05）。【结论】体检人群中CHC患者HCV基因型以1b、2a型为主，ALT、AST、HCV‐RNA水平低于非体检发现的CHC患者。

2009～2011年武汉大学人民医院感染肺炎链球菌的耐药性分析

目的监测武汉大学人民医院肺炎链球菌的耐药趋势,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用K-B法和E-test法对137株肺炎链球菌进行药敏试验,用K-B法测定耐红霉素菌株的耐药表型,并分析药敏结果。结果 137株肺炎链球菌对红霉素、复方磺胺甲口恶唑的耐药率较高,分别为94.2%(129/137)和74.5%(102/137),且有逐年升高的趋势。129株红霉素耐药株中,内在型耐药(cMLSB)占70.5%,诱导型耐药(iMLSB)占19.4%,M型耐药占10.1%。红霉素耐药株对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑共同耐药率及多重耐药率分别为66.7%、74.4%、60.5%,显著高于红霉素敏感组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 2009～2011年武汉大学人民医院分离的肺炎链球菌对红霉素耐药率较高,对克林霉素及复方磺胺甲口恶唑的耐药率呈逐年上升趋势,尤其是儿童对这两种抗菌药物的耐药性明显高于成人,耐药表型以cMLSB为主,且多重耐药现象严重。

临床三种常规粪便隐血实验的方法学评估

目的对匹拉米洞法、血红蛋白单克隆抗体法(单克隆抗体法)和转铁蛋白(Tf)/血红蛋白(Hb)联合免疫法(联合免疫法)进行性能评估。方法通过300例临床样本和不同的动物血红蛋白(Hb)、维生素C(Vit C)进行检测,从灵敏度、干扰性实验、反应时间等检测指标来反映三种方法的检验效能。结果匹拉米洞法、单克隆抗体法和联合免疫法检测Hb最低浓度分别为2.5μg/ml、0.1μg/ml、0.1μg/ml,联合免疫法检测Tf的最低浓度为0.05μg/ml。匹拉米洞法可以和人以及不同动物的血红蛋白反应,单克隆抗体法和联合免疫法只对人的血红蛋白反应;Vit C不会对单克隆抗体法和联合免疫法产生影响,一定的Vit C会使匹拉米洞法产生假阴性结果。三种方法的反应时间分别为17 s、26 s、24 s。匹拉米洞法检测上消化道隐血组、下消化道隐血组和对照组的阳性率分别为95.1%、73.7%、10.8%;单克隆抗体法分别为74.4%、94.7%、2.5%;联合免疫法分别为90.2%、100%、6.7%。结论匹拉米洞法、单克隆抗体法、联合免疫法对不同部位的消化道隐血的检测相辅相成,各具特点。三种方法联合检测对消化道疾病的辅助诊断具有重要的意义。

老年下呼吸道感染患者的病原菌分布及耐药特点分析

目的探讨老年下呼吸道感染患者病原菌分布及耐药特点情况。方法收集2012年7月至2014年7月武汉大学人民医院老年下呼吸道感染患者的痰标本,接种于血琼脂平皿及巧克力平皿上并挑取可疑菌落采用BD PhoenixTM100全自动细菌鉴定药敏系统进行检测。结果检出的病原微生物以革兰阴性杆菌(75.8%)为主,其中主要为肺炎克雷伯杆菌(25.2%)、铜绿假单胞菌(14.2%)、大肠埃希菌(13.4%)、鲍曼不动杆菌(7.8%);肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素最敏感,耐药率小于2%,铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率最低为17%,鲍曼不动杆菌的耐药率均高于53%。革兰阳性球菌检出率(18.0%)次之,其中以金黄色葡萄球菌(10.3%)、表皮葡萄球菌(3.7%)最常见,它们对青霉素耐药率均在70%以上,但它们没有出现对万古霉素和替考拉宁耐药。有部分真菌检出(6.3%),主要以白色念珠菌(3.7%)为主。结论加强老年下呼吸道感染患者的病原微生物的检测,对指导临床合理使用抗生素以及耐药菌株的预防与管控具有重要意义。

不饱和铁结合力测定试剂对同型半胱氨酸检测结果干扰的探讨

目的 探讨不饱和铁结合力(unsaturated iron binding capacity, UIBC)测定试剂携带污染对同型半胱氨酸(homocysteine, HCY)检测结果的影响。方法 选择南方科技大学医院10份临床生化标本,去除黄疸、溶血和肉眼可见脂血等不合格标本,制备高低两个水平混合血清,每份标本设置如下3步进行检测:只检测HCY;同时检测UIBC和HCY;设置防交叉污染后检测HCY。同时,以不饱和铁结合力试剂中七水合硫酸亚铁作为干扰物,进行HCY检测的干扰试验。结果 UIBC检测试剂盒对两个水平HCY携带污染率均超过60%。0.086 nmol/L以上浓度的七水合硫酸亚铁对HCY检测结果的干扰率均超过10%,且干扰率会随干扰物浓度的增高而增加。同时,七水合硫酸亚铁对两个水平HCY(40.24μmol/L和20.09μmol/L)干扰率与临床样本原始HCY浓度呈负相关(r~2=0.829,P<0.001)。结论 在检测血清中HCY结果时应考虑UIBC试剂或硫酸亚铁对检测结果的影响。

OCCLUDIN对非小细胞肺癌SPC-A1细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的探讨OCCLUDIN对非小细胞肺癌细胞SPC-A1增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法培养非小细胞肺癌细胞SPC-A1,通过siRNA转染干扰OCCLUDIN表达,实验中分为空白对照组(control组)、空转组(siCtrl组)和siRNA转染组(siOCLN组)。采用CCK-8、流式细胞术和Westernblot检测OCCLUDIN对SPC-A1细胞增殖和细胞凋亡的影响。结果siOCLN组细胞在24、48、72、96和120h的增殖能力较control组和siCtrl组均明显降低(P<0.05)。siOCLN组细胞凋亡率高于control组和siCtrl组(P<0.05);siOCLN组Bax、caspase-3、caspase-9、AIF和CytC等凋亡相关蛋白水平较control组和siCtrl组表达明显升高(P<0.05),而抗凋亡蛋白Bcl-2水平较control组和siCtrl组表达明显下降(P<0.05)。同时,siOCLN组AKT和PI3K蛋白磷酸化水平较control组和siCtrl组明显降低(P<0.05)。结论OCCLUDIN可能通过调控PI3K/AKT信号通路促进SPC-A1细胞的增殖和抑制凋亡。

中性粒细胞/淋巴细胞比值和D-二聚体/血小板比值预测新型冠状病毒肺炎患者死亡风险

目的:比较中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)和D-二聚体/血小板比值(DPR)在预测重症新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者死亡风险中的价值。方法:对2020-01-30—2020-02-15武汉大学人民医院收治确诊的264例重型及危重症COVID-19患者的临床资料进行回顾性分析。依据患者治疗后存活情况分为存活组(n=212)和死亡组(n=52)。收集各组患者入院时一般资料、合并症和临床表现,检测外周血中性粒细胞计数(NEU)、淋巴细胞计数(LYM)、血小板计数(PLT)和D-二聚体水平,并计算NLR和DPR。采用Cox回归分析筛选COVID-19患者死亡的高危因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC),评估NLR和DPR对COVID-19患者死亡风险的预测价值。采用Kaplan-Meier法分析不同NLR和DPR水平患者生存情况。结果:与存活组比较,死亡组患者年龄、高血压史、冠心病史、NEU、D-二聚体、NLR以及DPR水平均显著增高,LYM和PLT水平均明显下降。多因素Cox回归分析显示,年龄、冠心病、NLR和DPR是COVID-19患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,DPR预测死亡的ROC曲线下面积(AUC)略大于NLR;当NLR的最佳截断值为7.069时,敏感度为78.8%,特异度为75.9%。当DPR的最佳截断值为0.010时,敏感度为84.6%,特异度为75.5%。Kaplan-Meier生存分析结果显示,高水平NLR和DPR患者的生存率明显低于低水平NLR和DPR患者(P<0.01)。结论:高水平NLR和DPR均是COVID-19死亡的独立危险因素,DPR预测COVID-19患者死亡价值略高于NLR。

HMGB1基因多态性与肺结核易感性的关系

目的探讨湖北地区HMGB1基因多态性位点与肺结核易感性的关系。方法采用PCR产物直接测序法,对278例肺结核患者(结核病组)和225例健康对照者的HMGB1基因的3个SNP位点(rs1045411、rs2249825和rs1412125)多态性进行分析,并分析HMGB1各位点等位基因、基因型和单体型与肺结核易感性的相关性。结果HMGB1基因各位点等位基因与基因型在结核组和对照组中的分布差异均无统计学意义(均P>0.05),且各位点在超显性、显性、隐性3种遗传模式下与肺结核易感性相关性无统计学意义(均P>0.05)。HMGB1基因位点rs1045411-rs2249825-rs1412125单体型ACC与增加结核病风险存在强关联(OR=2.044,95%CI:1.220~3.425,P<0.01)。结论HMGB1基因ACC单体型可能与中国湖北地区汉族人群肺结核易感性显著相关。

睾酮对结核分枝杆菌感染的RAW264.7细胞自噬的影响

目的探讨睾酮对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染的鼠源巨噬细胞RAW264.7细胞自噬的影响及其分子机制。方法MTB感染RAW264.7细胞24h后,给予10-8mol/L睾酮处理24h;采用透射电镜观察细胞自噬情况,Westernblot法检测细胞自噬相关蛋白以及MAPKs信号通路蛋白。结果睾酮干预MTB感染的RAW264.7细胞后自噬体、自噬特异标志物LC3Ⅱ均明显增加(P<0.01),通路蛋白JNK磷酸化水平明显上调(P<0.001)。结论睾酮可能通过激活JNK信号通路诱导MTB感染的RAW264.7细胞自噬。

异甘草素对体外肺纤维化模型的作用及其机制

目的观察异甘草素(ISL)对转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))诱导人肺泡Ⅱ型上皮A549细胞所构建的体外肺纤维化模型的影响,探讨其作用机制。方法TGF-β_(1)刺激A549细胞发生上皮-间质转化(EMT)构建体外肺纤维化模型;加入ISL干预后,噻唑蓝(MTT)法检测TGF-β_(1)刺激A549细胞后,ISL对细胞增殖活性的影响;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测EMT相关E-cadherin、Vimentin、α-SMA、FN及其相关转录因子Snail、Slug、Twist、ZEB1、ZEB2 mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、α-SMA、FN及MAPK/Erk信号通路中Erk1/2磷酸化蛋白的表达水平。结果TGF-β_(1)可使A549细胞形态由上皮细胞向成纤维细胞转变,细胞增殖及迁移能力增强(P<0.05或P<0.01);上皮细胞标志物E-cadherin表达降低,间质细胞标志物N-cadherin、Vimentin、α-SMA、FN表达升高;EMT相关转录因子及磷酸化Erk1/2表达升高(P<0.05或P<0.01)。而经ISL处理后,ISL能有效抑制TGF-β_(1)诱导的A549细胞的增殖、迁移及细胞形态变化(P<0.05或P<0.01);提高E-cadherin,降低N-cadherin、Vimentin、α-SMA、FN、EMT相关转录因子及磷酸化Erk1/2的表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论ISL通过干预MAPK/Erk信号通路,抑制TGF-β_(1)诱导的A549细胞的EMT过程,维护细胞上皮样形态,减少肺成纤维细胞的产生,有望成为治疗肺纤维化的一种潜在药物。

依托泊苷致严重不良反应1例

1病例资料患者,女,61岁,身高152 cm,体质量50 kg,体表面积1.47 m2。2017年12月11日因诊断＂会厌神经内分泌癌3月余,术后放疗后1月＂入院。临床诊断：会厌神经内分泌癌术后放疗后、放射性皮炎。既往身体健康,无食物及药物过敏史,预防接种史随社会。入院体检：生命体征与体格检查均正常。辅助检查：凝血功能提示：凝血酶原时间10.6 s,凝血酶原时间活动度137.4%;.

老年呼吸机相关性肺炎患者病原菌分布及耐药情况研究

目的探讨医院呼吸机相关性肺炎(VAP)老年患者感染病原菌分布及耐药情况。方法收集2009年1月至2014年1月我院收治的598例进行机械通气老年患者的临床资料进行回顾性调查,从资料中筛选出VAP老年患者并对VAP老年患者下呼吸道分泌物培养及病原菌耐药结果进行统计分析。结果 598例进行机械通气患者中共有221例患者并发有VAP(发生率为36.9%),下呼吸道痰液共分离出251株致病菌,其中有30例发生2种病原菌感染;其中革兰阴性菌分离率最高,占71.3%,其次为革兰阳性菌(占17.9%)、真菌(占10.8%);革兰阴性菌中前3位病原菌依次为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌,分别占24.3%、17.9%、9.2%;鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌泛耐药菌株的检出率分别为21.8%和22.2%,产ESBLs细菌检出率为53.6%。革兰阳性菌中,以金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)检出率分别为66.7%和64.7%。结论 VAP的病原菌以革兰阴性菌为主,相关菌株耐药性逐渐增高,及时监测相关病原菌耐药性对指导临床合理用药至关重要。