利用SEM图和XRD指纹图谱鉴别矿物类中药生石膏与玄精石

目的:采用性状鉴别、理化鉴别等传统方法结合扫描电子显微镜(SEM)及粉晶X-射线衍射(XRD)等现代分析技术,对矿物类中药生石膏和玄精石进行系统鉴别。方法:采集生石膏和玄精石样品,记录原药材及其粉末性状特点,进行理化鉴别,确定样品真伪及品种。在上述基础上,采集各药材样品SEM显微图,对比生石膏与玄精石各显微图之间的差异,总结两者SEM鉴别特征;同时采集各样品粉末的XRD图谱,分别计算并绘制生石膏与玄精石的XRD平均图谱,确定共有指纹峰,并对共有指纹峰相对强度数据分别进行相似度评价、聚类分析和主成分分析(PCA),验证生石膏与玄精石的XRD共有指纹峰用于两者鉴别的可行性。结果:生石膏和玄精石碎屑的SEM特征具有差异,玄精石均呈疏松层片状堆叠,细小碎屑均成沙粒状;而生石膏呈紧密聚合的长纤维状,且细小碎屑或粉末具碎裂状纤维特征。生石膏和玄精石粉末的XRD图谱峰位相似,但玄精石各峰相对生石膏各峰略左移,相同峰位衍射峰的相对强度存在差异。相似度评价显示生石膏与玄精石明显分离,聚类分析及主成分分析均可将两者准确区分。结论:SEM和XRD技术均可准确鉴别生石膏和玄精石及其粉末,传统鉴别方法结合SEM和XRD分析技术能够为生石膏和玄精石及其粉末的快速鉴别和质量控制提供快速准确的新方法。

基于定向进化的雷公藤三萜C-29位羧化酶催化机制研究

雷公藤红素和雷公藤内酯甲是中药雷公藤的主要三萜活性成分,具有抗肿瘤、抗炎及免疫抑制等药理活性,是雷公藤相关中药制剂发挥临床疗效的物质基础。通过解析活性成分生源途径,优化基因元件并利用“细胞工厂”异源获取将是未来“低成本、高效率”获得雷公藤中三萜活性成分的有效途径。CYP712Ks是参与雷公藤木栓烷型和齐墩果烷型三萜骨架修饰的第一个细胞色素P450酶,发挥C-29位羧基化功能,可催化木栓酮生成美登木酸,催化β-香树素生成3-表卡通酸。本研究以四条多功能TwCYP712K1/2/3/5为研究对象,利用酿酒酵母体内功能表征,明确其催化功能及底物选择偏好性;通过同源建模和分子对接,明确蛋白与底物结合空间结构,进而对蛋白活性口袋内差异氨基酸进行互相突变,阐明决定催化功能和底物结构选择的关键氨基酸。本研究共构建了63个突变体元件,解析了影响TwCYP712Ks羧基化功能的氨基酸位点,特别是揭示了影响TwCYP712K2对齐墩果烷型和木栓烷型三萜底物选择性的关键氨基酸,TwCYP712K2F127I与TwCYP712K2A227T突变体将导致产物比例发生逆转。本研究以同源蛋白比对及相互突变的方式对TwCYP712Ks四条蛋白进行半理性设计,阐明多个决定蛋白催化功能的氨基酸位点,获得系列活性提升或改变的突变体,为雷公藤三萜活性成分的生物合成提供丰富的催化元件,并初步解析了C-29位羧基化机制。

常见矿物类中药粉末的微性状鉴别

目的研究常见矿物类中药粉末的微性状鉴别法。方法将36种矿物类中药粉末按白色、黄色、灰褐色或黑褐色、红色或紫色分为4类,利用体视显微镜的立体图像处理方法,分别对这几类矿物中药粉末进行微性状观察,比较和总结其鉴别特征,并制作矿物药粉末微性状鉴别检索表。结果大多数矿物类中药粉末能通过体视显微镜观察到较明显的微性状特征。结论该方法为矿物类中药粉末的鉴别提供了直观的微性状特征,可作为矿物药的鉴别参考依据。

地龙蛋白两种提取方法的活性比较

目的比较两种不同提取方法对地龙可溶性蛋白提取率及活性的影响。方法分别采用BCA法测定蛋白含量,羟胺法测定T-SOD活性,APTT、PT试剂盒测定抗凝血活性,琼脂糖-纤维蛋白平板法测定纤溶酶活性,MTT法检测PIG1细胞的存活率。结果水提醇沉法和盐析法的提取率分别为(11.12±0.16)%、(4.96±0.19)%,纯度分别为(24.37±1.68)%、(42.49±1.9)%。水提醇沉法提取的地龙蛋白T-SOD和纤溶活性都明显高于盐析法,抗凝血活性略低于盐析法。两种蛋白均能显著提高PIG1细胞的存活率,并对H_(2)O_(2)诱导的PIG1细胞具有保护作用,但蛋白浓度不同时保护作用有所差异,0.1~0.2 mg·mL^(-1)的水提醇沉蛋白保护作用更强,0.4~0.8 mg·mL^(-1)的盐析蛋白的作用更显著。结论水提醇沉法提取的地龙蛋白的提取率、抗氧化和纤溶活性明显强于盐析法,其抗凝血活性和对皮肤细胞的保护作用与盐析法相似。

淬炼党性挑重任 践行誓言显担当

在全国人民抗击新冠肺炎疫情斗争中,中共河南省委外事工作委员会办公室(以下简称省委外办)党员干部尽锐出战、全力以赴,充分展现出党员干部的使命与担当,为坚决打贏疫情防控阻击战提供了有力保障。闻令即行听令便动提高政治站位,扛牢政治责任。新冠肺炎疫情发生以来,省委外办主任付静带领班子成员及时跟进学习习近平总书记关于疫情防控工作的重要讲话和指示批示精神,将其汇编成册组织全办同志学习研讨,进一步统一思想、深化认识。