猪旋毛虫的检验与防控

猪旋毛虫病的病原为旋毛虫,其成虫在生猪的肠道内寄生,幼虫则寄生于生猪的肌肉组织中,患病猪的生长发育和免疫功能都会受到一定程度的抑制,但临床表现轻微,人类食用含有旋毛虫的猪肉后会严重威胁健康,甚至危及生命。综述猪旋毛虫的生活史、流行病学、临床症状、检验和防控技术,旨在降低旋毛虫的发生风险,提高食品安全水平。

弧菌外膜蛋白OmpK免疫交叉反应性的分析

本研究旨在研究弧菌外膜蛋白（oute rmembrane protein，OMP）OmpK免疫交叉反应的特征，探讨OmpK免疫交叉反应性的分子机制．利用克隆得到5株弧菌的ompK基因，通过比对10种（22株）弧菌的OmpK基因序列发现，ompK基因在弧菌中高度保守，其核苷酸序列的相似性达77％～93％．对副溶血弧菌（V．parahaemolyticus）VPL4—90的ompK基因进行原核表达，利用纯化的OmpK重组蛋白，制备了兔抗OmpK血清．通过westernblot分析发现，OmpK抗血清能够与16种不同的弧菌发生交叉识别反应，其中V．proteolyticus、y．furnissii、V．damsela和V．metschnikovii这4种弧菌OmpK的免疫交叉反应为首次报道，并且证实弧菌OmpK的免疫交叉反应具有种属特异性．通过抗原表位预测和比对发现，弧菌的OmpK具有8个保守的抗原表位，包括7个T细胞表位以及1个T细胞和B细胞的共同表位．流式细胞术分析显示，OmpK抗体能够识别这些相同或相似的抗原表位，提示这些抗原表位可能位于细菌表面．结果表明，这些保守的且位于细胞表面的OmpK抗原表位可能是弧菌OmpK具有免疫交叉反应性的分子基础．

脑膜炎奈瑟氏菌NspA基因的克隆及序列分析

为了获得脑膜炎奈瑟氏菌(Nesseria meningitidis,Nm)表面蛋白A(NspA)基因,从脑膜炎患者的血液中分离出脑膜炎奈瑟氏菌并对其进行鉴定,然后根据NspA基因的核苷酸序列,设计合成一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)技术体外扩增得到NspA基因,进行克隆、测序及序列分析。结果显示,其核苷酸序列同源性与Genbank报道的标准菌株相比同源性为100%。克隆获得的基因保持了脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白NspA基因的完整性,保留了其抗原性,为以后进一步开发脑膜炎基因工程疫苗奠定了实验基础。

Illumina MiSeq对热带环境血蜱属成蜱内共生真菌多样性分析

目的探讨海南热带环境血蜱属成蜱内共生真菌的群落组成及多样性分析。方法对成蜱样本进行形态学分类,扩增线粒体COI基因进行分子鉴定;应用Illumina MiSeq平台对血蜱属内共生真菌ITS1基因进行高通量测序,以OTU聚类分析、Alpha多样性分析阐明内共生真菌群落组成及多样性。结果热带环境游离血蜱属内共生真菌聚类为245个OTU;群落组成分布于子囊菌门(Ascomycota)占80.56%、担子菌门(Basidiomycota)占15.43%及接合菌门(Zygomycota)占0.37%;优势菌种为Zasmidium citrigriseum,占7.72%。Alpha多样性分析表明,血蜱属内共生真菌具有十分丰富的生物多样性。结论热带环境血蜱属成蜱内共生真菌多样性的研究,可为揭示蜱与内共生真菌复杂的互作关系提供依据,为进一步阐明热带蜱的行为特征并探索有效的生物学防控策略提供新思路。

感染严重发热伴血小板减少综合征病毒半饱血长角血蜱中肠微生物多样性分析

目的探讨携带严重发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)半饱血长角血蜱中肠微生物群落组成及多样性。方法提取3组携带SFTSV半饱血长角血蜱中肠DNA,应用HiSeq平台对样品16S rDNA基因进行高通量测序,以操作分类单元(operational taxonomic units,OTU)聚类分析、Alpha多样性分析阐明内共生微生物群落组成及多样性。结果3组携带SFTSV半饱血长角血蜱中肠微生物聚类分别为143、113、163个OTU,绘制稀疏性曲线和丰度等级曲线,表明数据具有足够的测序深度,感染SFTSV半饱血长角血蜱中肠微生物组成丰富,但物种分布不均匀;微生物群落组成分析显示,在门水平上,变形杆菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)为主要优势菌门。在纲水平上,γ-变形杆菌纲(Gammaproteobacteria)、杆菌纲(Bacilli)、β-变形杆菌纲(Betaproteobacteria)、放线菌纲(Actinomycetia)为主要优势菌纲。在目水平上,军团菌目(Legionellales)、芽孢杆菌目(Bacillales)、伯克氏菌目(Burkholderiales)、放线菌目(Actinomycetales)为主要优势菌目。在科水平上,柯氏体科(Coxiellaceae)、杆菌科(Bacillaceae)、莫拉菌科(Moraxellaceae)、红藻科(Rhodocyclaceae)为主要优势菌科。在属水平上,以柯氏体属(Coxiella)相对丰度最高,其次主要为苍白空气芽孢杆菌属(Aeribacillus)、Azonexus;Alpha多样性分析结果显示,Shannon指数平均值为139.67,Simpson指数平均值为0.48,Chao指数平均值为145.06,ACE指数平均值为147.11。结论感染SFTSV半饱血长角血蜱中肠微生物物种多样性丰富。研究结果为进一步探讨长角血蜱肠道微生物与SFTSV互作关系以及开发对蜱虫与蜱传疾病防治的新思路提供了依据。