养阴活血方干预ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠DNA甲基化酶的研究

目的从DNA甲基化角度观察养阴活血方及其功效单元干预动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)进程。方法ApoE-/-小鼠随机分为对照组、模型组、辛伐他汀组、养阴活血方组、养阴组、清热组和活血组。对照组小鼠给予普通饲料喂养,其余组小鼠均给予高脂饲料喂养。分别于第10、12、14、16、18周,对照组小鼠注射等体积无菌PBS,其余组腹腔注射10μg的LPS。灌胃给药与高脂饲料喂养同时进行,第20周检测。油红O染色观测小鼠主动脉斑块面积;生化试剂盒检测小鼠TC、TG、LDL-C、HDL-C、non-HDL-C水平;HE冠脉染色观测小鼠冠脉管腔狭窄情况和管腔面积;qPCR检测小鼠脾脏/主动脉DNA甲基化酶Tet1、Tet2、Tet3、Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b mRNA表达;Western blot检测小鼠脾脏/主动脉DNA甲基化酶Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白表达;ELISA检测细胞因子IL-6、IL-2、TGF-β1的变化。结果与模型组相比,养阴活血方组能显著减少斑块面积并抑制冠脉狭窄(P<0.01),降低TG、LDL-C水平(P<0.01),升高HDL-C水平(P<0.05),降低脾脏Dnmt1和Dnmt3a蛋白表达(P<0.05),降低主动脉Dnmt1 mRNA、Dnmt3b mRNA(P<0.05,P<0.001)和主动脉Dnmt1、Dnmt3b蛋白表达(P<0.05),下调血清IL-6水平(P<0.05),上调TGF-β1水平(P<0.05)。与模型组比较,各功效单元组均不同程度减少斑块面积、调节血脂水平;养阴组降低脾脏Dnmt3b mRNA表达(P<0.05),降低主动脉Dnmt3b mRNA(P<0.001)和Dnmt3a蛋白(P<0.05)表达,升高TGF-β1水平(P<0.05);清热组降低脾脏Dnmt1蛋白表达(P<0.05),主动脉Dnmt1和Dnmt3b mRNA(P<0.05)和Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白表达(P<0.05),降低IL-6水平(P<0.05),增加TGF-β1水平(P<0.05);活血组降低主动脉Dnmt3a和Dnmt3b蛋白表达(P<0.05),降低IL-6水平(P<0.05)。结论养阴活血方通过调节血脂,降低DNA甲基化酶Dnmts的表达,改善炎症水平,从而有效减少高脂联合LPS注射诱发的ApoE-/-小鼠AS斑块的形成。

银杏叶片对血管性痴呆大鼠的MDA、SOD及AchE的影响

目的 研究银杏叶片对大鼠学习记忆功能及其脑内MDA、SOD和AchE的影响。方法 利用多发性脑梗死致血管性痴呆模型 ,以水迷宫为学习记忆评价指标 ,测定脑海马匀浆中AchE、SOD、MDA活力。结果 银杏叶片对多发性脑梗死致血管性痴呆大鼠的学习记忆功能有不同程度的提高 ,并显著提高大鼠海马内SOD活性 ,抑制AchE的活力 ,显著降低MDA含量。结论 银杏叶片能增强血管性痴呆模型动物学习记忆功能 ,其作用机制可能与其抑制AchE活力 ,降低MDA含量 ,提高SOD活性有关。

舒络粉针对脑缺血大鼠氨基酸及其受体mRNA表达的影响

目的研究舒络粉针对脑缺血大鼠海马区氨基酸含量和兴奋性氨基酸受体mRNA表达的影响。方法采用线栓法制成脑缺血模型,按其神经行为学进行分组。应用高效液相检测海马区脑匀浆谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)含量;应用RT-PCR法研究舒络粉针对Glu受体-NMDAR1 mRNA表达的影响。结果舒络粉针能降低Glu含量、升高GABA含量,下调NMDAR mRNA的表达。结论舒络粉针可以抑制兴奋性氨基酸(EAA)的过量堆积、增加抑制性氨基酸(IAA)的含量而发挥抗神经元损伤的作用,其部分机理是与下调NMDAR的mRNA的表达有关。

环维黄杨星D对PC12谷氨酸损伤的保护作用的实验研究

目的 :探讨环维黄杨星D(CBV -D)对PC12细胞谷氨酸 (Glu)损伤模型的影响。方法 :用Glu复制PC12细胞兴奋性氨基酸损伤模型 ,通过MTT染色和乳酸脱氢酶 (LDH)活性的测定来研究CBV -D对PC12细胞的保护作用。结果 :CBV -D抑制Glu造成的损伤 ,降低LDH的漏出。结论 :CBV -D对兴奋性氨基酸引起PC12细胞损伤具有保护作用。

舒络粉针剂对PC12细胞缺氧、缺糖损伤的保护作用

目的探讨舒络粉针剂对PC12细胞缺糖、缺氧损伤模型的影响。方法用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)、无糖Earle's液复制PC12细胞缺氧、缺糖模型,通过MTT染色和乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定研究舒络粉针剂对PC12细胞的保护作用。结果含舒络血清不同程度的抑制Na2S2O4、无糖Earle's液造成的缺氧、缺糖样损伤,降低LDH的漏出。结论舒络粉针剂对缺氧、缺糖引起PC12细胞损伤具有保护作用。

舒络对LPC致基底动脉环收缩反应的影响

目的 :研究溶血磷脂酰胆碱 (LPC)对狗脑基底动脉环收缩的影响及舒络的保护作用。方法 :通过描记犬基底动脉环的张力变化 ,测定LPC对基底动脉环收缩的影响。结果 :LPC能剂量依赖性 ( 1× 10 9～ 1× 10 3 mol/L)促进基底动脉环收缩 ,在 1×10 5mol/L时收缩达最大 ,为 ( 13 3 .0± 11) %。舒络能剂量依赖性地减弱LPC诱导的狗脑基底动脉环收缩。结论 :舒络能拮抗LPC诱导的狗脑基底动脉环收缩。

中药学专业的药理学个性化激励教学设计与实践

在药理学专业课教学中,对大学生进行课堂激励是课堂教学有效开展的关键。为了更好地进行中药学专业大学生的课堂激励,应坚持"基于大学生个体特征"的理念,以专业发展需求为本,同时充分理解大学生个体特征,分析大学生个体变量,运用各种激励手段,以达到更好的教学效果。

荆防泡腾片抗病毒的作用实验研究

目的考察荆防泡腾片抗病毒作用。方法采用甲型、乙型流感病毒感染小鼠模型考察荆防泡腾片的体内抗病毒作用。结果荆防泡腾片可明显延长甲型、乙型流感病毒感染小鼠存活天数并可减少感染小鼠死亡率,中、大剂量组能明显降低甲型、乙型流感病毒感染小鼠的肺指数值;病理组织学检查:荆防泡腾片具有抗甲型、乙型流感病毒所致肺部感染疾病的作用;与病毒对照组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论荆防泡腾片对甲型、乙型流感病毒感染小鼠具有一定的保护作用,明显减轻甲型流感病毒所致肺部感染疾病的作用。

环维黄杨星D对Na_2S_2O_4诱导EVC304细胞损伤的保护作用

目的:研究环维黄杨星D(CVB-D)对Na2S2O4诱导EVC304细胞损伤的保护作用。方法:采用体外培养人脐静脉内皮细胞EVC304,Na2S2O4作为耗氧剂建立细胞缺氧损伤模型。用MTT法测定细胞存活率与细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)活力反映细胞损伤的程度,培养液一氧化氮合酶(NOS)活力与内皮素(ET)含量分析EVC304细胞的功能。结果:CVB-D能显著抑制Na2S2O4诱导EVC304细胞OD570的降低和细胞培养液中LDH活力的增加,提高培养液中NOS活性,降低ET的含量(与模型组比较,P<0.05或P<0.01)。结论:CVB-D对Na2S2O4诱导EVC304细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与改善NOS和ET失调有关。

丹酚酸B对血管内皮细胞迁移及管腔形成的影响

目的探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的作用,了解其对血管新生的影响和作用机制。方法采用3H参入法检测Sal B对HUVECS增殖作用;Transwell观察Sal B对HUVECS迁移的影响;用体外毛细血管管腔结构形成试验检测Sal B对HUVECS管腔形成的影响;分别采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和Westen blot法检测Sal B处理后HUVECS分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平和VEGF表达的变化。结果3H参入法,结果显示Sal B对HUVECS增殖具有促进作用;Transwell试验显示,Sal B可以促进HUVECS迁移;管腔形成实验显示,与空白组比较,Sal B可以使HUVECS管腔形成数增多,管腔长度增长。经Sal B处理后,与空白组比较,HUVECS上清中VEGF含量增加,VEGF表达上调。结论Sal B对HUVECS增殖,迁移和管腔形成有促进作用,其作用机制可能是通过上调HUVECS中VEGF的表达,从而促进血管新生。

芡实提取物对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的观察芡实不同提取物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的影响及其作用机制。方法将昆明种小鼠随机分为8组,即对照组、模型组、芡实乙醇提取物高低剂量组、芡实乙酸乙酯提取物高低剂量组、芡实正丁醇提取物高低剂量组。分别采用旷场装置和Morris水迷宫装置测试各组小鼠的自主活动状况及学习记忆能力,同时测定各组小鼠脑组织一氧化氮合成酶(NOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果芡实乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物均能浓度依赖性地改善亚急性衰老小鼠的学习记忆能力,提高脑组织NOS、GSH-Px活力,降低AChE活力。结论芡实乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物具有改善小鼠衰老状态的作用,其机制可能与其能促进机体清除脂类过氧化物,增强脑组织抗氧化能力,改善胆碱能系统在学习和记忆中的作用有关。芡实正丁醇提取物的作用优于乙醇提取物,乙醇提取物的作用优于乙酸乙酯提取物。

探针药物法评价半夏生姜配伍对细胞色素P_(450)酶的影响

目的运用探针药物法分析半夏生姜配伍对大鼠细胞色素P450(CYP)酶的影响,为揭示相畏相杀配伍的科学内涵提供依据。方法将SD雄性大鼠随机分为四组,分别给予半夏、生姜的水提物及半夏-生姜合煎剂,以0.9%氯化钠溶液作为空白对照组,尾静脉注射丙米嗪探针药物,于给药后10,20,30,40,50和60min,眼眶取静脉血0.5mL,经提取、处理后,通过高效液相色谱(HPLC)法检测探针药物丙米嗪的药物浓度。结果半夏组、生姜组及配伍组丙米嗪浓度均低于对照组,各组CYP水平均明显升高;配伍组在10min处丙米嗪浓度低于半夏组,即配伍后CYP水平高于半夏组。结论半夏、生姜及半夏-生姜配伍均可诱导CYP酶;同时半夏-生姜配伍运用较之半夏单用,配伍运用对CYP酶具有诱导作用,可抵消半夏单用对CYP酶的抑制作用。

丹酚酸B对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制研究

目的探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的保护作用机制。方法大鼠心肌缺血60min后再灌注60min造成大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,测定给药后心肌组织匀浆、血浆中内皮素(ET)、血清中一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的变化,并通过病理组织学检查,观察SalB对MIRI模型的治疗作用。结果SalB中、高剂量组均能减少心肌组织和血浆中ET的含量,提高NOS的活性,增加NO的释放(P<0.05或P<0.01)。结论SalB减轻MIRI可能是通过调节ET/NO系统的平衡,维持冠脉血管张力,改善心肌能量代谢障碍而实现的。

马兜铃酸I和马兜铃内酰胺I对大鼠肾小管损伤机制及其对肾脏水通道蛋白1表达的影响

目的研究马兜铃酸I(AA-I)和马兜铃内酰胺I(AL-I)在亚急性毒性条件下对大鼠肾小管损伤的毒性机制及其对肾脏水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法 AA-I及AL-I以高、中、低剂量(9.0,4.5,2.25 mg/kg)连续腹腔注射给药7 d,在给药第5天后,收集24 h尿液,对各组总尿量进行比较,并用ELISA方法检测尿液中β2-微球蛋白(β2-MG)含量。给药7 d后,取全血检测血生化,并用HE法染色观察肾脏病理组织学变化;用ELISA和免疫组织化学方法分析AA-I及AL-I在高、中、低剂量时肾脏组织AQP1的表达变化。结果 AA-I及AL-I在给药第5天即出现β2-MG排泄量增加,血生化中血浆离子浓度出现异常。AA-I及AL-I在9.0、4.5、2.25 mg/kg的剂量下均能明显抑制AQP1的表达,且存在一定的剂量依赖关系。结论 AA-I及AL-I均能导致肾脏毒性,且AL-I的肾毒性作用强于AA-I。AA-I及AL-I在肾小管损伤早期均可抑制AQP1表达,这与其早期导致大鼠尿量增加的利尿作用有关。

芡实提取物对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用及体外抗氧化活性研究

目的观察芡实80%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物对过氧化氢(H2O2)诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用及其体外抗氧化活性。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒法检测以上不同浓度芡实提取物对H2O2诱导损伤的SH-SY5Y神经细胞活力的影响,计算抑制率。用体外抗氧化实验方法检测芡实3种提取物清除DPPH、ABTS自由基及还原铁的能力。结果芡实80%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物在含生药量10～30mg/mL浓度范围内,均表现出明显的抑制H2O2对SH-SY5Y神经细胞氧化损伤的作用(P<0.05,P<0.01),且对DPPH、ABTS自由基及三价铁离子有很好的清除作用及还原能力,其中芡实正丁醇提取物的作用最强。结论芡实具有保护SH-SY5Y神经细胞免受H2O2氧化损伤的作用,有着很好的抗氧化活性,其中正丁醇提取物的抗氧化活性最强。

秦艽提取物抗病毒的药效学实验研究

目的研究中药秦艽在体内对流感病毒的防治作用。方法复制乙型流感病毒感染小鼠肺部感染性疾病动物模型,以利巴韦林为阳性对照,观察秦艽对乙型流感病毒感染小鼠的保护作用。结果秦艽提取物可明显延长乙型流感病毒感染小鼠存活天数和存活率;对乙型流感病毒感染小鼠肺指数、肺组织形态学都有保护作用,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论秦艽具有较好的抗乙型流感病毒感染的作用。

柴胡疏肝散对大鼠免疫性肝损伤的防治作用

目的观察柴胡疏肝散对免疫性肝损伤大鼠的肝功能、免疫功能的影响。方法采用猪血清腹腔给药方法,造成免疫性肝损伤模型,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA),光镜观察大鼠肝脏的病理组织学改变。结果该方可明显降低猪血清所致免疫性肝损伤大鼠的血清AST、ALT含量,升高SOD水平,降低MDA的含量,减轻肝脏损伤。结论柴胡疏肝散对免疫性大鼠肝损伤模型具有一定保护作用,其作用机制可能与降低、抑制脂质过氧化反应以及抗自由基损伤,调节免疫系统功能有关。

春柴胡及北柴胡对二甲基亚硝胺所致大鼠肝纤维化的保护作用比较

目的:比较春柴胡与北柴胡皂苷对慢性肝纤维化作用的差异。方法:采用二甲基亚硝胺(DMN)致大鼠慢性肝纤维化,从血液生化学、肝组织胶原蛋白含量、肝细胞凋亡比较春柴胡及北柴胡的保肝作用。结果:春柴胡和北柴胡各剂量组均能不同程度地降低慢性肝纤维化模型动物的死亡率;给予春柴胡和北柴胡后动物的肝功能指标均有不同程度的改善,各剂量组对ALT、AST、ALP的升高和TP、ALB的降低有明显抑制作用;春柴胡和北柴胡给药4周后,肝组织胶原蛋白含量、HA、LN的含量均明显降低;北柴胡大、小剂量组和春柴胡大剂量组均有良好的抗肝细胞凋亡的作用。结论:春柴胡和北柴胡均具有一定的抗大鼠肝纤维化的保护作用,北柴胡保肝疗效优于春柴胡。其抗肝纤维化的作用机制和抗肝细胞凋亡相关。

北柴胡及春柴胡挥发油的解热作用比较

目的:通过解热作用比较北柴胡及春柴胡挥发油的差异。方法:采用干酵母所致大鼠发热模型及内毒素所致家兔发热模型,观察北柴胡及春柴胡的解热作用。结果:北柴胡及春柴胡均可降低干酵母所致大鼠体温升高和降低内毒素所致家兔体温升高,与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:北柴胡及春柴胡均具有良好的解热作用,提示春柴胡在临床上可以替换北柴胡。