四膜虫rDNA表达载体的改造及用于异源基因的高效表达

基于四膜虫小核rDNA改造得到的pD5H8载体，在转染进接合生殖时期的四膜虫后能发育成9000～10000拷贝的大核rDNA，因此pD5H8载体是四膜虫异源基因表达的研究热点；但其载体上匮乏合适的克隆位点和无启动子结构阻碍了该载体的进一步发展。本研究在四膜虫启动子HSP70—2和终止子HSP70-I之间，通过稀有酶切位点I-SceI导入细菌绿色荧光蛋白NGFP）这一筛选标记，由此组成的DNA片段（HSP70-25’UTR．I-SceI—HGFP．I—SeeI—HSP70-13’UTR）整合进pD5H8，将之改造成pD5H8-HGFP表达载体。来自真核生物的绿色荧光蛋白（GFP）藉由l-SceI酶切位点一步导入pD5H8一HGFP表达载体后，在四膜虫中大量表达且具有生物学活性。因此，改造后的pD5H8一HGFP表达载体拥有一步法引入异源基因，几乎无酶切位点的限制，有效的筛选标记，高效的异源基因表达能力，以及环境友好、便捷可控等诸多优点，这对于深入开展四膜虫基因功能的过表达研究和开发异源基因在四膜虫这一真核表达系统中的应用奠定了技术基础。

嗜热四膜虫五个hsp70基因的表达分析

鉴定得到嗜热四膜虫13个含有完整保守结构域的hsp70基因,对其中5个高度相似且无内含子的hsp70基因进行表达分析。在37、39和41℃热激条件下,实时荧光定量PCR结果表明,hsp70-2基因对热激响应最敏感。在四膜虫生长、饥饿和接合生殖这3种生理或发育状态下,Microarray结果显示,hsp70-4基因恒定且高表达;在热激条件下,hsp70-4基因的表达水平随着温度的升高而略微增加,证实hsp70-4基因为热休克相关蛋白hsc70基因;克隆的hsp70-4基因全长2208bp,开放阅读框长1959bp,编码653个氨基酸。Microarray结果提示,hsp70-3可能参与四膜虫饥饿早期(0～12h)的耐受和接合生殖后期(6～10h)的新大小核形成,老大核凋亡等事件;hsp70-5可能参与四膜虫饥饿晚期(12～15h)的耐受和接合生殖早期(0～6h)的小核减数分裂、小核交换和原核(pronuclear)融合事件。Blast2GO分析表明,与hsp70-3和hsp70-5共表达的基因分别参与不同的生物学过程,进一步反映了hsp70-3和hsp70-5这两个基因在功能上是存在差异的。

电视媒体:如何面对新媒体

2009年，被业界定义为网络视频年。根据mashable．com网站预测，在这一年里，网络视频将呈现两大趋势，一是网络视频内容观看量创下新记录。超高速宽带连接的普及和更多的高清视频内容，将促使更多的人观看更多的网络视频，观看量将继续以惊人的速度增长。二是手机视频观看量爆增。过去数年来业界多次做出的“手机视频将成为主流应用”的预言，将会变成现实，苹果3G版iPhone及其克隆物的火爆推动了手机视频观看量的增长。

肾移植手术的护理配合与体会

同种异体肾移植手术是目前治疗肾功能衰竭有效的方法之一。我院自１９９４年５月～１９９８年１２月共开展了肾移植手术１０８例，取得了满意的效果，现将肾移植手术过程中手术室护理配合体会报告如下：１临床资料本组１０８例，男性８６例（占７９７％），女性２２例（...

ZnCl_2水溶液制备纤维素膜的研究

以针叶浆为原料,ZnCl2水溶液为溶解溶剂,制备再生纤维素膜。利用单因数实验分析了纤维素膜制备过程中浆浓、反应温度、溶解时间对纤维素膜强度的影响,确定了最佳工艺条件为浆浓3%、反应温度90℃、溶解时间为2 h。并通过X-射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)分析,比较经ZnCl2水溶液处理前后纤维的结构和性能变化,发现ZnCl2水溶液是纤维素的非衍生化溶剂,经ZnCl2水溶液处理后的纤维素已由纤维素Ⅰ转换为纤维素Ⅱ,制备的再生纤维素膜具有一定的强度,且具有多孔性的特征。

城市台发展的蓝海战略

随着媒体竞争的白热化,传统媒体已进入零和竞争,而新媒体不断壮大,对传统媒体悄然形成合围之势。这就要求我们采取灵活的竞争策略,努力寻求竞争淡化、上升空间较大的"蓝海地带"。

嗜热四膜虫腺苷三磷酸结合盒转运蛋白ABCC10基因的可变剪切分析

哺乳动物中腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter,ABCT)可通过可变剪切产生多种转录本,其中含有提前终止密码子(premature terminal codon,PTC)的转录本还可与无义介导的mRNA降解通路(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)作用来调节蛋白的相关功能,但这些现象尚未在低等生物的ABCT研究中发现。该文以单细胞原生动物——嗜热四膜虫为对象,利用转录组数据发现ABCC10基因存在可变剪切,并产生两条转录本(SV1和SV2),其中SV2在第五个内含子处发生内含子保留事件,这段长49 bp的序列使SV2发生移码并产生PTC。在构建NMD通路中关键因子UPF1基因的嗜热四膜虫敲降株的基础上,利用实时荧光定量PCR方法检测SV2的转录情况。结果显示:含有PTC的转录本SV2在UPF1敲降株中的转录水平相对于野生型显著增加,说明SV2可被NMD通路降解。这与高等动物中某些ABCC蛋白通过可变剪切引入含PTC转录本,并能被NMD降解的方式一致,推测该方式在真核生物中十分保守,并在真核生物的共同祖先(the last eukaryotic commonancestor)中就已形成。

嗜热四膜虫功能基因组数据库

嗜热四膜虫是一种单细胞真核生物,因其可在实验室纯培养、具有成熟的分子操作技术和清晰的遗传背景,而成为一种广泛研究的模式生物。高通量技术的发展和生物信息分析方法的建立,使得四膜虫功能基因组的研究取得了较大进展。在此背景之下,基于四膜虫3个主要生理和发育时期(生长、饥饿及接合生殖)的基因芯片和转录组测序(RNA-seq)数据及基因网络的分析结果,构建了嗜热四膜虫功能基因组数据库,为四膜虫研究提供了重要资源。

三种四膜虫全基因组N^(6)-甲基腺嘌呤比较研究

为了揭示N^(6)-甲基腺嘌呤(6mA)在近缘物种间的分布规律和物种进化过程中的变化,研究在分离2种四膜虫(Tetrahymena malaccensis和Tetrahymena pyriformi)大核的基础上,利用三代测序技术绘制了其全基因组单碱基分辨率6mA图谱,结合公共数据库中已有的模式种Tetrahymena thermophila数据,开展了3种四膜虫比较6mA甲基化组分析,发现:(1)3种四膜虫6mA甲基化位点分布特征类似,包括呈约200 bp周期性分布和具有保守AT基序;(2)6mA主要分布于基因的5′端,在种间直系同源基因上的分布模式具有区域近似性,但在单碱基水平不完全保守;(3)在种内近期复制的并系同源基因中,6mA分布在单碱基水平具有较高的保守性;(4)结合3种四膜虫的分化时间,估算出了四膜虫中6mA动态变化过程,6mA位点建立的速度大约为每Mb每百万年69.9—226个位点。

综合康复护理在社区老年性膝关节骨关节炎患者护理中的应用效果

目的探究综合康复护理在社区老年性膝关节骨关节炎患者护理中的应用效果。方法 50例社区老年性膝关节骨关节炎患者,随机分为常规康复组和综合康复组,各25例。常规康复组采用常规护理,综合康复组在常规护理基础上采用综合康复护理。比较两组患者治疗效果。结果综合康复组患者总有效率为96.00%,明显优于常规康复组的76.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。干预后,综合康复组膝关节骨关节视觉模拟评分法(VAS)评分、关节活动度、患者生活质量评分均优于常规康复组,差异具有统计学意义(P<0.05)。综合康复组护理满意度明显高于常规康复组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论综合康复护理在社区老年性膝关节骨关节炎患者护理中的应用效果确切,可有效改善关节功能,减轻疼痛,提高患者生活质量,值得推广。

糖尿病专科护理门诊分阶段随访管理在提高糖尿病患者自我管理行为中的作用

目的探讨糖尿病专科护理门诊分阶段随访管理在糖尿病患者自我管理行为中的作用。方法 240例2型糖尿病患者,随机分为对照组和研究组,各120例。对照组实施常规随访,研究组应用分阶段随访管理。观察比较两组基线、治疗1年后的自我管理行为各项评分。结果基线时,两组患者的各项自我管理行为评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗1年时,两组患者各项评分均较基线时升高,且对照组的运动管理(4.47±2.25)分、饮食管理(3.76±1.42)、用药管理(4.86±2.42)分、足部护理(3.28±2.02)分、血糖监测(3.66±1.31)分均低于研究组的(5.36±2.20)、(4.43±1.63)、(5.52±2.31)、(3.85±2.20)、(4.53±1.65)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论给予糖尿病患者进行分阶段随访管理,可有效改善患者的自我管理能力,可在基层医院推广。

综合康复护理在社区老年性膝关节骨关节炎患者护理中的应用效果

目的:探究综合康复护理在社区老年性膝关节骨关节炎患者护理中的应用效果。方法:选取某院2015年4月~2016年10月社区老年性膝关节骨关节炎患者50例随机分组,常规康复组采用常规护理干预,综合康复组实施综合康复护理。比较两组患者老年性膝关节骨关节炎康复治疗效果;护理前后膝关节骨关节VAS评分、关节活动度、患者生活质量水平;护理满意度。结果:综合康复组患者老年性膝关节骨关节炎康复治疗效果比常规康复组高,P<0.05;护理前两组在膝关节骨关节VAS评分、关节活动度、患者生活质量水平方面无显著差异,P>0.05;护理后综合康复组膝关节骨关节VAS评分、关节活动度、患者生活质量水平比常规康复组好,P<0.05;综合康复组护理满意度比常规康复组高,P<0.05。结论:综合康复护理在社区老年性膝关节骨关节炎患者护理中的应用效果确切,可有效改善关节功能,减轻疼痛,提高患者生活质量,值得推广。

Orem自理模式护理和常规护理在老年高血压患者护理中应用对比

目的:探讨Orem自理模式护理和常规护理在老年高血压患者护理中的临床效果。方法:将在某院接受治疗的80例老年高血压患者按照随机分为两组,40例患者采用常规护理干预(对照组),40例采用Orem自理模式护理干预(研究组),将两组患者抑郁焦虑情况、日常生活能力进行比较。结果:干预后研究组ADL评分显著高于对照组,焦虑、抑郁评分显著低于对照组(P<0.05)。结论:在老年高血压患者护理中选择Orem自理模式护理可显著改善患者情绪,提高日常生活能力。

“一剧两星”下城市电视台的电视剧“突围”之道——以济南电视台为例

在视频网站井喷发展、"一剧两星"政策施行的大环境下,央视和省级卫视对电视剧投入不断加大,城市电视台在电视剧市场的话语权被进一步挤压。本文重点从电视剧的引进、编排、宣传等环节入手,分析城市台如何在艰难的市场环境中扬长避短,因地制宜,提升电视剧的竞争力,在卫视与新媒体的围剿下实现"突围"。

城市电视台“价值创新”的新思考——以济南电视台系列春晚实践为例

在媒体转型和媒体融合的大潮中,对体量庞大的城市台的关注却远远不够。对城市台而言,如何应对新媒体的冲击,是否只有转型才能生存?本文以济南电视台的系列本土春晚为例,对其在价值创新方面的有益尝试进行了分析。

家庭医生服务模式在社区抑郁症防治中的应用效果

目的探讨家庭医生服务模式在社区抑郁症防治中的应用效果,以总结抑郁症有效的社区防治措施。方法选择2015年1月至2016年8月期间深圳市龙华区中心医院黎光社区健康服务中心管理的68例社区抑郁症患者为研究对象,根据随机数表法将其分为观察组和对照组,每组34例,对照组患者予以常规宣教及医院随访,观察组患者应用家庭医生服务模式,干预时间为6个月。比较两组患者干预前后的汉密顿抑郁量表(HAMD)及世界卫生组织生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)评分的变化。结果干预后,观察组患者的HAMD评分为(11.29±2.08)分,明显低于对照组的(13.56±3.62)分,差异具有统计学意义(P<0.05);干预后,观察组患者WHOQOLBREF量表中的生理、心理、社会关系领域评分分别为(18.58±3.19)分、(16.64±3.39)分、(15.74±3.05)分,明显高于对照组的(15.28±2.64)分、(14.09±2.83)分、(13.25±2.47)分,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑郁症患者在社区管理中应用家庭医生服务模式,可以有效提高患者的临床疗效,改善患者的生活质量。

美丽约定

“老师,我报名参加了服装制版师培训……”“老师,我涨工资了,现在除了给堂弟的学费,每月还能余下500元钱呢……”“老师,婵对我不像以前那么苛刻了,我相信日子会一天天好起来……”小黄又给我来信了。她是我2016级的学生,中途学了,但她始终遵守我们之间的约定,无论在哪,无论多忙,都会以书信的方式和我保持联系。思绪回到了七年前……

四膜虫基因表达数据库:四膜虫全基因组基因表达芯片和协同表达分析的数据资源

嗜热四膜虫是一种优良的真核模式生物,对其功能基因组学的分析将为研究细胞和分子生物学的基础性重大问题提供新的机遇.四膜虫基因表达数据库(TGED)是原生动物纤毛虫中第一个基因表达数据库,整个数据库包括了四膜虫3个重要的生理和发育阶段20个时间点的全基因组基因表达数据,提供了友好的网页界面(http://tged.ihb.ac.cn)供用户获取这些数据.通过基因的标识号或描述信息,用户可以获取基因表达谱信息和协同表达基因.此外,TGED同时提供了制备四膜虫基因表达芯片的样品制备方法.欢迎研究者上传和分享其所有的基因芯片数据,以期为四膜虫或纤毛虫研究提供重要的功能基因组学资源.