人胰岛素原基因胰外表达重组体的构建及鉴定

目的 :构建胰外表达成熟胰岛素的重组体。方法 :将人胰岛素原基因进行二处突变 ,突变后的胰岛素原基因与逆转录病毒载体 pLXSN重组并转染肝癌细胞。提取肝癌细胞基因组DNA ,PCR方法鉴定人胰岛素原基因与载体重组结果及在肝癌细胞基因组中整合情况。同时测定成熟胰岛素的表达。结果 :胰岛素原基因已整合到肝癌细胞基因组。突变的胰岛素原可被广泛存在的furin酶识别 ,在培养基内检测到较高浓度的成熟胰岛素。结论 :成功构建胰外表达成熟胰岛素的突变人胰岛素原基因逆转录病毒重组体。

曲安西龙可促进桥本氏病伴甲减的甲状腺功能恢复

目的:研究曲安西龙对桥本氏病伴甲减的疗效。方法:桥本氏病伴甲减患者共60例,随机分为曲安西龙组和对照组。两组于治疗前及治疗后4个月时分别测定血清游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素、促甲状腺素(TSH)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、血浆皮质醇、促肾上腺皮质激素及血浆葡萄糖水平。结果:治疗后曲安西龙组TSH较对照组显著改善(P均<0.05),TgAb和TPOAb也明显下降(P均<0.05),且治疗所需左旋甲状腺素的平均剂量为39±20μg/d,明显低于对照组(P<0.05)。结论:曲安西龙能明显降低血清TgAb和TPOAb水平,增强左旋甲状腺素对桥本氏病伴甲减的疗效,更快恢复甲状腺功能。

辽河油田地区糖尿病流行病学调查研究

辽河油田地区糖尿病流行病学调查研究袁凤山，侯永生，齐今吾（中国医科大学第一临床学院内分泌科）许志辉，吴彩新，李忠敏，李立群，汤晓东（辽河油田第一职工医院）关键词糖尿病，糖耐量异常，患病率目前世界各国糖尿病（ＤＭ）患病率都在增加，在某些发展中国家的人民...

糖尿病患者心脏自主神经病变的电生理评估

目的观测心率变异性(heartratevariability,HRV)各频谱参数在糖尿病心脏自主神经病变(cardiovascularautonomicneuropathy,CAN)各阶段的改变,探索糖尿病CAN的早期诊断方法,为有效防止糖尿病CAN的发生、发展提供监测手段。方法根据传统心脏自主神经功能检查将104例糖尿病患者按CAN程度分为4组单纯糖尿病组10例(男8例,女2例),早期CAN组30例(男13例,女17例),肯定CAN组24例(男10例,女14例),严重CAN组40例(男13例,女27例)。每例均检测八项HRV频谱参数,同时检查眼底、尿蛋白、周围神经传导速度及心电图。分析HRV各频谱参数在糖尿病各组间的差异及与正常人群间的差异。结果心率变异性各频谱参数在糖尿病早期CAN组已显著下降,且早于视网膜病变及肌电图改变,与CAN严重程度的相关系数分别为高频-0.43,低频-0.40,总功率-0.38,R-R间隔的方差(varianceofR-Rinterval,Var)-0.35,极低频-0.34,低频百分率-0.32,P均<0.01。极低频、高频、总功率、Var与乏氏指数、深呼吸心率差、卧立位30/15比值显著相关(r=0.30～0.46,P<0.01),低频与乏氏指数、深呼吸心率差、卧立位30/15比值、卧立位血压差、握拳实验显著相关(r=0.20～0.44,P均<0.01)。低频百分率与乏氏指数、卧立位血压差、握拳实验相关(r=0.21～0.30,P<0.05)。

C肽与血糖比值对糖尿病分型及治疗的意义

目的 :探讨C肽与血糖比值 (C/GR)对糖尿病分型及治疗的意义。方法 :对 19例 1型糖尿病和 136例2型糖尿病患者进行空腹和糖负荷后 30 ,6 0 ,12 0 ,180min的血糖和血浆C肽测定 ,将 2型糖尿病患者分为两个亚组 (非胰岛素治疗组和胰岛素治疗组 )。动态观察各组糖尿病患者空腹和糖负荷后各时点的C/GR。结果 :1型糖尿病组空腹和糖负荷后各时点的C/GR均显著低于 2型糖尿病组 (P <0 .0 1) ,其比值的变化趋势不同于 2型糖尿病组。 2型糖尿病两亚组C/GR的变化趋势相同 ,但胰岛素治疗组各时点的比值均显著低于非胰岛素治疗组(P <0 .0 1)。结论 :C肽与血糖比值可作为评定胰岛功能指标 ,并且对糖尿病的分型及治疗有指导意义 ,对该值较低的

TRH试验在诊断原发性甲状腺机能减退症临床应用价值的探讨

应用促甲状腺激素释放激素(TRH)试验检查下丘脑-垂体-甲状腺轴功能已有10余年,但应用于诊断原发性甲状腺机能减退症(下称原发甲减)的情况尚未见有详细报道。

体内诱导骨髓干细胞治疗大鼠糖尿病的实验研究

[目的]探讨体内诱导大鼠骨髓干细胞分化为胰岛素分泌细胞及对糖尿病大鼠的治疗作用.[方法]50只雄性大鼠,10只为正常组,40只采用链脲霉素（STZ）制备糖尿病（DM）大鼠模型并均分4组：①动员组给予重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）;②诱导组给予尼克酰胺和促胰岛素分泌肽;③动员并诱导组给予rhG-CSF联合尼克酰胺及促胰岛素分泌肽;④糖尿病未治组.用ELISA法测血清胰岛素,免疫组织化学染色检测胰岛素阳性细胞的表达.[结果]动员并诱导组大鼠血糖（22.338±2.188 mmol/L）明显低于糖尿病未治疗组（28.186±1.221 mmol/L）（P〈0.05）;血清胰岛素明显高于糖尿病未治疗组（P〈0.05）;胰腺中胰岛素阳性细胞百分比（18.21±12.18）%明显高于糖尿病未治疗组（6.17±4.13）%（P〈0.01）、单纯动员组（P〈0.01）和单纯用药组（P〈0.01）;肝脏和脾脏中也有胰岛素染色阳性细胞的表达.[结论]尼克酰胺联合促胰岛素分泌肽可在体内将骨髓干细胞转分化为胰岛素分泌细胞,改善STZ大鼠的高血糖症.

人胰岛素原基因B10位定点突变对增强胰外表达效率的实验研究

目的构建在肝细胞内增强表达成熟人胰岛素的生理调控性人胰岛素原基因重组质粒。方法利用PCR定点突变技术在B-C及C-A连接处已两点突变的人胰岛素原基因上进行B10位突变,并在其上游连接肝细胞特异的3倍体葡萄糖反映元件(GLRE3)和胰岛素样生长因子结合蛋白-1启动子(IGFBP-1P)。经酶切后将含有调控元件的3点突变人胰岛素原基因(GLRE3-IGFBP-1P-3mINS)插入逆转录病毒载体(pLXSN),脂质体介导转染大鼠肝癌细胞CBRH7919后检测成熟胰岛素表达情况及与含有调控元件的2点突变人胰岛素原基因(GLRE3-IGFBP-1P-3mINS)表达体的表达差异。结果人胰岛素原基因的B10位组氨酸编码序列CAC突变为门冬氨酸编码序列GAC。构建了含调控元件的B10位门冬氨酸人胰岛素原基因逆转录病毒载体质粒(pLXSN-GLRE3-IGFBP-1P-3mINS),酶切、PCR及测序鉴定各段基因碱基序列及连接方向正确。pLXSN-GLRE3-IGFBP-1P-3mINS经脂质体包裹转染大鼠肝癌细胞,细胞外液含5.0、25.0mmol/L的葡萄糖浓度下胰岛素含量分别为5.03±0.72、43.90±2.30mU/L。未进行B10位突变的重组体转染组在同样葡萄糖浓度下胰岛素含量分别为<2.00、2.10±0.23mU/L。结论成功构建了含调控元件的B10位门冬氨酸人胰岛素原基因逆转录病毒载体重组质粒,该重组体已整合入鼠肝癌细胞基因组,其表达效率显著提高并受葡萄糖生理性调控。

中小学教师糖尿病患病率及相关因素的对照研究

The study about the prevalence rate (PR ) and the risk factors of diabetes mellitus (DM ) in 241 teachers at primary and secondary schools in comparison with 1257 workers showed that the PR of DM in the teachers was four times compared with that in the workers. The PR of DM in the old subjects (≥45 years old ) was 11.6 times more than that in the young subjeots (<45 years old ). These indicate that the risk of being DM in mental labors is bigger than that in physical labors and aging is the risk factor of DM. Results also showed the percentage of the teachers with obesity or hypertension was higher than that of ’the workers- The body mass index, triglyceride and mean blood pressure of the DM patients were significantly high. The findings suggest that the PR of DM increases with obesity, hypertension and hyperlipemia.

24小时动态心电图观察纳多洛尔（Nadolol）抗心律失常的疗效

２４小时动态心电图观察纳多洛尔（Ｎａｄｏｌｏｌ）抗心律失常的疗效山西医学院第二附属医院袁凤山山西省军区医务处焦义启Ｎａｄｏｌｏｌ是一种长效、无内源性和交感活性，无膜稳定作用，非选择性β受体阻滞剂。该药作用较强，对心功能影响较小，同时具有增加肾血浆流量...

胰岛素抵抗与肥胖在非胰岛素依赖型糖尿病发病中作用的探讨

本文分析了胰岛素抵抗、中心型肥胖、肥胖三种情况在ＮＩＤＤＭ与正常人两组间发生率的差异，ＮＩＤＤＭ组上述三种情况发生率均明显高于正常人组，差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。肥胖与胰岛素抵抗呈明显正相关，提示胰岛素抵抗是促发ＮＩＤＤＭ的重要因素。肥胖，特别是中心型肥胖是促发ＮＩＤＤＭ的另一重要因素。肥胖可加重ＮＩＤＤＭ病人的胰岛素抵抗。

2型糖尿病患者运动及感觉神经传导速度变化与C肽的关系

目的:探讨2型糖尿病患者运动神经传导速度(motornerveconductionvelocity,MNCV)和感觉神经传导速度(sensorynerveconductionvelocity,SNCV)的变化与C肽水平的关系,为防治糖尿病周围神经病变提供理论依据。方法:回顾性分析73例2型糖尿病患者的MNCV和SNCV与C肽释放试验中糖负荷前及糖负荷120minC肽水平的关联性。结果:2型糖尿病患者的MNCV及SNCV正常者和异常者的下降与糖负荷120minC肽水平下降有关(t=23.15～35.46,P<0.01),与糖负荷前C肽水平下降无关(t=0.47～1.63,P>0.05)。结论:C肽水平下降可能会加速神经传导速度的下降,提示保持血中C肽水平,有可能延缓周围神经病变的进展。

代谢综合征的预防和综合性治疗策略

代谢综合征主要表现为“六高一脂”，即高体重（肥胖）、高血压、高血脂（血脂异常）、高血糖（糖尿病）、高尿酸血症（痛风）、高胰岛素血症（胰岛素抵抗）和脂肪肝。控制代谢综合征的发生、发展重在预防。控制好了“六高一脂”中的一个，就能预防一系列的疾病。

重组人胰岛素原基因在培养的大鼠肝癌细胞中基因转移和表达

目的:探讨含有葡萄糖反应元件的重组人胰岛素原基因在培养的大鼠肝癌细胞中基因转移及表达情况。方法:将含有3点突变及2点突变的人胰岛素原基因转染至大鼠肝癌CBRH7919细胞,测定不同葡萄糖浓度下瞬时及用G418筛选稳定表达后胰岛素的分泌量,并检测基因整合情况。结果:①转染后38 h及1个月,不同葡萄糖浓度下,含有3点突变胰岛素原基因的肝癌细胞胰岛素分泌量不同;含有2点突变胰岛素原基因的肝癌细胞,只有在25 mmol/L的葡萄糖浓度培养液中,才能测出胰岛素分泌量;②阳性克隆细胞基因组扩增出特异目的电泳条带,未转染细胞无此条带。结论:①用逆转录病毒为载体能将重组人胰岛素原基因转染到肝癌细胞中,并使之稳定表达。②所构建的重组人胰岛素原基因能指导靶细胞随葡萄糖浓度的变化调节胰岛素分泌。

体内动员及诱导骨髓干细胞治疗大鼠糖尿病的疗效

目的联合应用表皮生长因子(EGF)与促肝细胞生长因子(pHGF)体内诱导动员后的自体骨髓干细胞,探讨能否使其转分化为胰岛素分泌细胞,观察该方法对链脲佐菌素(STZ)大鼠糖尿病的治疗作用。方法 40只SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、动员组及诱导组,每组10只,后3组均用STZ制做糖尿病大鼠模型,成模后动员组和诱导组皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子10μg.kg-.1d-1,连续15 d,对照组和糖尿病组注射生理盐水。诱导组于动员第2日腹腔注射EGF 1μg.kg-.1d-1、pHGF0.3 mg.kg-.1d-1,连续14 d;其他3组注射生理盐水对照。监测大鼠血糖、胰岛素水平,实验结束时免疫组化染色并计算胰腺中胰岛素阳性细胞百分比。结果治疗后诱导组大鼠血糖明显低于糖尿病组及动员组(P<0.05),血清胰岛素明显高于另外2组(P<0.05),胰腺中胰岛素阳性细胞百分比明显高于另外2组(P<0.01)。结论 EGF联合pHGF体内可诱导动员后自体骨髓干细胞转分化为胰岛素分泌细胞,可以增加血浆胰岛素水平,降低血糖,治疗大鼠糖尿病。

左旋甲状腺素联合曲安西龙治疗自身免疫性甲状腺疾病并发甲状腺功能减退30例

目的观察口服左旋甲状腺素(LT4)联合小剂量曲安西龙治疗自身免疫性甲状腺疾病(AITD)并发甲状腺功能减退(甲减)的疗效。方法将60例临床诊断为AITD并发甲减的患者随机分为LT4治疗组(A组)和LT4、曲安西龙联合治疗组(B组)各30例。两组于治疗前及治疗后4个月分别测定血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)及甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb);B组测定皮质醇、促肾上腺皮质激素(ACTH)、血浆葡萄糖水平。结果两组治疗后FT3、FT4、TSH较治疗前均有所改善,但B组FT4、TSH改善更明显,TGAb和TPOAb下降明显,且治疗4个月时所需LT4的平均剂量明显低于A组。结论口服LT4联合小剂量曲安西龙能明显降低血清TGAb和TPOAb水平,更快恢复甲状腺功能。

胰岛素、C肽RIA检测中的室内质量控制

本文介绍了胰岛素、Ｃ肽ＲＩＡ检测中的三种室内质控方法，即质控血清监测法，两样本Ｙｏｕｄｅｎ图监测法和标准曲线参数监测法，并对其结果做了初步分析。三种室内质控方法的应用，保证了每一批测定结果的准确可靠、提高了不同批实验结果的可比性。本文还对胰岛素、Ｃ肽ＲＩＡ检测中使用的试剂盒进行了方法学评价。胰岛素、Ｃ肽测定的批内ＣＶ分别为５．４８％和９．９８％；批间ＣＶ分别为１０．５４％和１４．５６％；平均回收率分别为１０２．６％和９８．７％；灵敏度分别为１．２５ｍＵ／Ｌ和０．０２ｎｍｏｌ／Ｌ。测定了１８４名正常人空腹血清胰岛素和Ｃ肽的含量，分别为８．３５±４．４７ｍＵ／Ｌ和０．２５～１．３２ｎｍｏｌ／Ｌ。与文献报告的正常值接近。