微小RNA-21抑制剂联合基于石墨烯量子点负载顺铂纳米药物系统对黑色素瘤细胞凋亡、迁移和侵袭的影响

目的探讨微小RNA(miRNA)-21抑制剂联合基于石墨烯量子点负载顺铂纳米药物系统(GPt)对黑色素瘤细胞凋亡、迁移和侵袭的影响及其机制。方法培养黑色素瘤B16F10细胞,分为对照组、纳米药24 h组、纳米药48 h组、纳米药72 h组,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)筛选出合适的给药剂量和用药时间;然后再分为miRNA-21抑制剂组、纳米药组、miRNA-21抑制剂+纳米药组。采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况,聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测miRNA-21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、p53和Bcl-2相关X蛋白(BAX)的表达情况。再通过皮下注射B16F10细胞制备裸鼠黑色素瘤模型,检测各组肿瘤重量。结果筛选出用药作用时间与剂量分别为72 h和5.0μl,miRNA-21抑制剂具有明显的干扰效果,可用于后期实验。与对照组相比,纳米药组和miRNA-21抑制剂组细胞的侵袭能力、迁移能力均下降,G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,凋亡增多,两者联用后效果更明显。miRNA-21抑制剂组和纳米药组的Bcl-2蛋白和mRNA相对表达量均下降,两者联用后下降更加明显,p53、BAX蛋白和mRNA相对表达量均升高,两者联用后升高更加明显。与对照组相比,其他各组小鼠肿瘤重量均下降,并且miRNA-21抑制剂+纳米药组下降最明显。对照组的肿瘤组织中血管分布丰富,肿瘤细胞排列紧密,肿瘤细胞生长活跃,大小相对一致,其他各组肿瘤细胞排列疏松,细胞生长不活跃。结论GPt联合miRNA-21抑制剂能够诱导黑色素瘤细胞发生凋亡,并能抑制细胞的迁移和侵袭能力。

下唇正中-颌下入路在上颌骨切除术中的运用

目的研究下唇正中-颌下手术入路在上颌骨切除术中的运用效果。方法12例患者采取下唇正中-颌下手术径路进行上颌骨切除手术,切口为下唇正中至颏下,再经颌下延及患侧乳突前下方。结果经过0.5~2年的术后随访观察,疗效满意。所有病例均无下睑水肿、睑外翻和泪溢,移植皮瓣全部成活,面部外形恢复良好。结论下唇正中-颌下入路用于上颌骨切除术,不仅可以充分暴露术区、完整切除上颌骨恶性肿瘤,还可以较满意地保持术后面部外形和功能,符合肿瘤外科、美容外科和功能外科原则。

速尿与硫酸卡那霉素联合用药对大鼠内耳毒性的实验观察

目的探讨速尿与硫酸卡那霉素联合用药对大鼠内耳的毒性作用,为大鼠药物性耳聋动物模型的制备和相关研究提供参考。方法大鼠静脉注射速尿后,立即肌肉注射硫酸卡那霉素,对照组不做处理。用药7天后行听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)阈值检测、耳蜗铺片免疫荧光染色和颞骨常规切片观察,并对耳蜗进行扫描电镜观察。结果联合注射速尿与硫酸卡那霉素后,大鼠ABR阈值明显提高;铺片和切片观察发现内、外毛细胞完全缺失的大鼠,耳蜗支持细胞大部分完整,前庭毛细胞未见损伤;电镜观察发现耳蜗毛细胞纤毛明显受损。结论速尿和硫酸卡那霉素联合用药可导致大鼠听力和耳蜗毛细胞严重受损,但对耳蜗支持细胞和前庭毛细胞损伤较轻,为耳蜗毛细胞损伤后再生等实验研究提供了一种简单、快速而有效的建立大鼠耳聋动物模型的方法。

颏下瓣修复口腔颌面部缺损临床应用研究

目的探讨颏下皮瓣修复口腔颌面部缺损的临床应用价值。方法采用颏下皮瓣及部分结合钛网修复口腔颌面部术后缺损9例,其中上颌窦癌2例,硬腭癌、颊粘膜癌及舌癌7例,均用颏下皮瓣修复口腔病灶术后缺损,上颌骨切除者加钛网修复上颌骨缺损。结果 9例皮瓣修复术后6例颜色红润,完全成活;2例部分成活,经多次换药及剪除表面部分坏死组织后延期愈合;1例坏死。术后随诊6-24个月,钛网成形后面部饱满,无不良反应。结论颏下皮瓣修复口腔颌面缺损操作便利,手术创伤小修复效果理想。

纳米碳示踪结合多功能保留颈清扫术治疗分化型甲状腺癌临床分析

目的探讨纳米碳淋巴示踪在甲状腺癌中央区清扫中的应用及多功能保留颈淋巴结清扫术中应用的可行性及意义。方法 18例甲状腺癌患者,其中CN0 8例,CN+10例,甲状腺癌患者术中先向癌灶周围注射纳米碳,再行清扫术。CN0 8例行中央区清扫,冰冻提示中央区阳性者加侧后多功能保留颈清扫;CN+10例行中央区加颈部多功能保留淋巴清扫术。术后病理检查黑染组织中有无甲状旁腺及病理淋巴结转移情况。术后感觉测定采用轻触和针刺与健侧比较。结果纳米碳使第Ⅵ区淋巴结黑染,而甲状旁腺不黑染,且清扫黑染组织均未发现甲状旁腺。术后患者颈部、耳廓感觉良好。结论纳米碳淋巴示踪及多功能保留手术疗效确切,在彻底清扫转移灶的同时使甲状旁腺及颈部感觉等多种功能得以保存,但部分患者术后疼痛明显。

环靶明对肝再生影响的蛋白组学研究

目的研究环靶明对肝再生的影响,并探讨其可能的分子作用机制。方法应用8标同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术,结合二维液相色谱串联质谱(two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry,2DLC-MS/MS)系统,以部分肝切除的大鼠为模型,全面分析了再生早期(12h)环靶明干预组,肝脏蛋白质的表达差异。结果共鉴定1625种蛋白质,其中肝再生组有367种蛋白质的表达量与对照组(手术切下的正常肝组织)有显著差异,差异蛋白通路分析基因本体(gene ontology,GO)显示hedgehog(HH)信号通路激活,在肝再生过程中作用显著,其中的SHH、Gli2蛋白可能通过影响细胞凋亡和能量供给等方式参与肝再生调控,而环靶明干预组中这一通路未被激化,关键蛋白SHH,Gli2蛋白表达量下调。结论环靶明通过抑制HH信号通路中关键蛋白的表达影响肝再生,HH信号通路在肝细胞再生过程中具有重要作用。

基于DIA/SWATH的质谱定量技术研究皮肤鳞状细胞癌患者的血清蛋白质组学

目的从分子水平研究皮肤鳞状细胞癌(CSCC)血清蛋白组学的变化,为该病的发生、发展机制研究及分子靶向药物的研发提供理论依据。方法基于高分辨质谱的全扫描数据非依赖采集(Data Independent Acquisition,DIA)定量蛋白质组学技术,比较CSCC患者与正常人血清中蛋白种类和浓度的差异。而后根据这些差异蛋白进行生物信息分析:GO功能及富集分析、Pathway代谢通路富集和蛋白-蛋白相互作用网络(PPI)分析。结果在待测血清样品中共检测到411个蛋白。通过对比6个CSCC和6个正常人血清样品的蛋白图谱特征,发现共有28个蛋白具有显著性差异。GO富集分析结果表明biological process(BP)、cellular component(CC)和molecular function(MF)三个本体中分别有533个、62个和57个显著性差异的条目(GO terms)。KEGG pathway分析提示这些差异蛋白显著地富集在pantothenate and coA biosynthesis、MAPK signaling pathway、propanoate metabolism、pyruvate metabolism和cysteine and methionine metabolism五条代谢通路上。进一步的PPI分析表明10条代谢通路和8个蛋白相互关联,具体包括癌症相关的代谢途径glycolysis/gluconeogenesis、MAPK signaling pathway等,以及与癌症发生密切关联的的蛋白CTSB、LDHB等。结论一些潜在的生物标志物可能用于早期诊断CSCC,同时MAPK信号通路在该病的发生发展过程中具有十分重要的作用。