老年骨科大手术后谵妄的危险因素分析及预测模型的构建

目的目前国内关于骨科大手术后谵妄(POD)风险预测模型的相关研究鲜有报道。文中主要通过评估老年骨科大手术患者POD的危险因素,构建风险评分预测模型并进行验证。方法收集2022年1月至2022年8月在宁波市第六医院接受骨科大手术的802例患者临床资料。其中分析队列561例,预测队列241例。根据分析队列术后根据意识模糊评估法分为谵妄组(n=102)和非谵妄组(n=459)。在分析队列中先进行单因素分析筛选相关的风险因素,然后采用逐步Logistic回归分析筛选出独立风险因素并根据优势比(OR)的大小进行赋值,建立风险评分预测模型。根据预测模型对分析队列和预测队列分别进行评分,对该模型的有效性进行验证。结果年龄≥73岁、心脏疾病、糖尿病、睡眠紊乱、皮质醇≥411 nmol/L、CRP≥14 mg/L为老年骨科大手术患者POD的危险因素(P<0.05)。上述6个危险因素组成老年骨科大手术患者POD实用预测模型。在分析队列中,该模型受试者工作特征曲线(ROC)下面积AUC为0.863,灵敏度为78.43%,特异度为78.87%,准确率为78.79%;在预测队列中,AUC为0.941,灵敏度为95.24%,特异度为89.45%,准确率为90.46%。结论由年龄≥73岁、心脏疾病、糖尿病、睡眠紊乱、CRP≥14 mg/L、皮质醇≥411 nmol/L构建的风险评分预测模型对于老年骨科大手术患者具有一定的的预测效能。

轮状病毒VP7基因在大肠杆菌中的表达及其免疫原性

轮状病毒是世界范围内引起婴幼儿病毒性腹泻的主要病原体。VP7是轮状病毒的主要外壳蛋白和中和抗原 ,是发展基因工程疫苗的首选。把包含全部 3个主要抗原性区域的轮状病毒SA11VP7基因片段以谷胱甘肽S 转移酶融合蛋白的形式在大肠杆菌中进行表达 ,表达产物占菌体总蛋白的 30 %左右。经一步GlutathioneSepharose4B亲和纯化 ,重组蛋白纯度超过 90 %。Westernblot实验表明 ,重组蛋白可被抗SA11的多抗特异地识别。动物实验表明 ,重组抗原可在小鼠和家兔体内诱导VP7特异的抗体和一定水平的SA11中和抗体。

重组人纽兰格林生物学活性检测方法及质控标准

目的 研究重组人纽兰格林生物学活性检测方法 ,并制定其质量控制标准。方法 采用激酶受体活化的酶联免疫吸附试验 (KIRA ELISA) ,通过优化细胞浓度、样品稀释梯度、药物刺激时间及细胞裂解方法等建立定量测定重组人纽兰格林体外生物学活性的方法 ,同时建立了一套完整可行的质量控制标准。结果 重组人纽兰格林刺激MCF 7细胞表面ErbB2 ErbB3分子磷酸化的反应存在量 效关系 ,相关系数大于 0 98,原液的平均比活性为 85 10U mg± 115 0U mg。并对原液设立肽图、纯度等检测项目 ,对成品设立热原质试验、鉴别试验等检测项目。结论 KIRA ELISA可用于定量检测重组人纽兰格林的体外生物学活性 ,结果准确可靠 ,重复性好 ;建立的方法和标准可以有效控制重组人纽兰格林制品的质量。

人血纤维蛋白溶酶原K5环的基因合成、表达、纯化与活性鉴定

根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性 ,人工合成人血纤维蛋白溶酶原 K5全基因 ,并在原核系统中以硫氧还蛋白融合蛋白的形式实现了高效表达 .重组蛋白通过 Ni2 +金属螯合层析得到初步纯化 ,通过肠激酶切割去除了融合标签 .应用鸡胚尿囊膜实验检测切割后的 rh K5的生物学活性 ,发现与对照组相比 ,rh K5能明显地降低血管管径、血管总面积以及血管总面积与视野面积的比值 ,表明切割后的产物具有显著抑制新生血管生成的生物学活性 .为进一步研究和开发抗血管生成药物奠定了基础 .

人纤溶酶原K5基因在毕赤酵母中的表达及其抗肿瘤活性

目的在毕赤酵母中表达人纤溶酶原K5基因,并检测hK5蛋白的抗肿瘤活性。方法根据酵母遗传密码的偏爱性优化设计hK5基因,构建重组表达质粒p819-8α-hK5,经G418加压筛选和甲醇诱导表达,并对摇瓶发酵条件进行优化。表达的hK5蛋白经纯化后,通过荷H22肿瘤昆明小鼠模型检测其抗肿瘤活性。结果筛选到2株高表达hK5蛋白的转化子,摇瓶表达量超过150mg/L,纯化后的蛋白纯度大于95.0%,并能够显著抑制昆明小鼠H22肿瘤的生长。结论hK5基因能够在毕赤酵母中高效分泌表达,且表达的hK5蛋白具有良好的抗肿瘤活性。

认知功能障碍发病机制研究进展

随着年龄增大,人脑的功能势必会逐渐退化,以阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)为代表的人脑退行性疾病的发病率逐年升高,给患者、家庭和社会带来了沉重的负担,也引起了广大医务工作者的密切关注。本文介绍了目前在认知功能障碍发病机制研究领域方面的若干最新进展。

盐酸戊乙奎醚注射液临床应用进展

盐酸戊乙奎醚注射液（penehyclidine hydrochloride，商品名为长托宁）是我国研制的具有自主知识产权的新药．具有选择性胆碱受体拮抗作用，可有效避免阿托品（atropine）产生的心动过速等不良反应，且药效长而不良反应较少。该药目前已在麻醉前用药、有机磷农药中毒抢救、休克、呼吸系统疾病及戒毒治疗等临床领域中开始应用。本文对其作一综述。

跳台实验训练后小鼠自然遗忘时间的观察

目的对小鼠经跳台实验训练后自然遗忘的时间进行测定。方法70只昆明小鼠随机分层区组设计,按测验时间分为T1、T2、T3、T4、T5、T6和T7组,每组10只。分别于训练后24、48、72、96、120、148和172 h对小鼠进行测验,比较各组间小鼠的潜伏期和错误次数。结果各组小鼠训练时跳上时间和基础错误次数相似(P>0.05),表明各组小鼠基础智力水平相同。训练后T1、T2和T3组之间的错误次数和潜伏期相似(P>0.05);T1、T2和T3组与T4组相比,潜伏期延长、错误次数减少(P<0.05),表明小鼠在训练后第96 h记忆成绩下降;T5、T6和T7组与T4组相比,潜伏期略有缩短、错误次数增多,但差异无显著性(P>0.05)。T5、T6和T7组之间的错误次数和潜伏期相似(P>0.05)。结论小鼠于跳台实验训练后第4天开始出现遗忘。

GM-CSF/IL-3融合蛋白质量标准的研究和建立

目的:建立重组 GM-CSF/IL-3融合蛋白的质控标准和检测方法,以用于该产品的常规质量控制。方法:用 TF-1/MTT 细胞增殖试验定量测定 GM-CSF/IL-3融合蛋白体外生物学活性;用抗 GM-CSF 和 IL-3的抗体分别进行 WesternBlot 进行鉴别试验;用 C_8-HPLC 和 SDS～PAGE 测定蛋白纯度;用胰蛋白酶消化/C_(18)-HPLC 进行肽图分析;用顶空进样气相色谱法检测甲醇残留量;还原型 SDS-PAGE 测定融合蛋白相对分子质量;其他原液和成品检测项目参照2005年版中国药典三部的方法进行。结果:GM-CSF/IL-3融合蛋白的原液及成品与 TF-1细胞的反应呈典型的 S 型曲线,符合四参数方程 y=(A-D)/[1+(x/C)(?)B)]+D,相关系数大于0.99,成品和原液的回收率均大于94%,RSD 均小于20%;与 GM-CSF 和 IL-3抗体进行的 Western Blot 均为阳性;原液纯度大于95.0%;甲醇残留量小于0.005%,其他项目均符合2005年版中国药典三部要求。结论:建立的重组 GM-CSF/IL-3融合蛋白质控标准和检测方法可以有效控制该制品的质量,并确保制品的安全与有效,已用于该制品的常规检定。

沐舒坦对全麻插管后婴幼儿呼吸道的保护作用

目的评价围术期应用沐舒坦对全麻插管后婴幼儿呼吸道的保护作用。方法选择ASAⅠ级全麻插管机械通气下行外科手术患儿40例,随机分为沐舒坦组和对照组。沐舒坦组以0.3mg·kg-1沐舒坦加入生理盐水10ml缓慢静脉注射,2次/日,对照组以生理盐水10ml缓慢静脉注射,2次/日。两组均从术前2d开始至术后3d结束,共6d。所有患儿均使用同一种抗生素,剂量按公斤体重给予,给予相同的护理措施。观察记录患儿拔管时气道分泌物情况及手术当天至手术后3d内呼吸道分泌物情况。结果两组患儿手术后当天及第1天,沐舒坦组在咳嗽、痰量、咳痰容易程度方面同对照组相比,差异有统计学意义。结论围手术期应用沐舒坦能显著改善全麻气管插管后婴幼儿呼吸道痰液的粘稠度,增加气道分泌物的排出,术后呼吸道的不良反应较轻。

咪达唑仑不同剂量和时机给药的遗忘程度

目的探讨咪达唑仑遗忘作用的合适给药时机和剂量。方法以240例ASAⅠ级病人对椎管内麻醉穿刺操作的遗忘程度为评价指标,分为椎管内麻醉穿刺操作前(A)组和后(B)组,每组120例;每大组又随机分为4小组,分别给予不同剂量的咪达唑仑,分为0.01mg/kg(M1组)、0.03mg/kg(M2组)、0.1mg/kg(M3组)和生理盐水(NS)组,每组30例。记录用药后的警觉-镇静(OAA/S)评分和手术后1h的遗忘评分(amnesiascore,AS)。结果OAA/S评分:A组和B组中,不同剂量M组与NS组之间,不同OAA/S评分所占人数比例有明显差异;B组中M2与A组中M2相比,OAA/S评分秩次有显著差异,B组中M3组与A组中M3组相比,秩次有显著差异;AS评分:A组中,各剂量M组均有不同程度的遗忘;M2、M3组与M1组间相比,遗忘程度增加,P<0.05;而M2、M3组之间P>0.05;B组中,M1、M2组与NS组遗忘程度相似(P>0.05),而M3组与其余三组相比,遗忘程度明显增加,但其与A组中M3组相比,遗忘程度明显不如后者。结论咪达唑仑的镇静作用同其剂量成正相关;咪达唑仑具有明确的顺行性遗忘作用,并同镇静程度相关,但有封顶效应(ceilingeffect);在较大剂量情况下,亦能产生逆行性遗忘作用,但是效力不及同等剂量下预先给药;这提示咪达唑仑应以适当剂量、在有创操作前给药,可以产生满意的遗忘作用,剂量过大并不能够产生更强的遗忘作用。

小鼠神经生长因子基因治疗型DNA质粒的质量控制

目的对小鼠神经生长因子(NGF)基因治疗型DNA质粒进行质量控制。方法用酶切鉴定法和PCR法进行DNA质粒的结构确认,鸡胚背根神经节法和免疫印迹测定DNA质粒表达产物的生物学活性,分光光度法测定浓度,琼脂糖凝胶电泳法和DNA-NPR-HPLC法测定纯度,气相色谱法测定乙醇和异丙醇残留量,琼脂糖凝胶电泳法测定RNA残留量,其余检测项目按《中国药典》三部(2005版)规定进行。结果用上述方法对原液和成品进行了检定,各项指标均符合《预防用DNA疫苗临床前研究技术指导原则》和《中国药典》三部(2005版)的要求。结论所采用的质控方法和质量标准能够保证该DNA质粒的安全、有效,可用于治疗型DNA质粒的质控。

联合入路臂丛神经阻滞用于小儿上肢骨折闭合穿针术

目的探讨C臂机下小儿骨折闭合复位、经皮克氏针穿刺固定术的合适麻醉方法。方法选择近年来ASAⅠ级行肱骨髁上骨折C臂机下闭合复位、经皮克氏针穿刺固定术患儿60例,随机分为A、B、C3组,A组采用肌间沟入路法臂丛神经阻滞术,B组采用腋路法臂丛神经阻滞术,C组采用腋路联合肌间沟入路法臂丛神经阻滞术。每组20例。肌间沟入路法和腋路法均应用0.3%罗哌卡因3mg·Kg-1;联合入路法用相同总剂量、相同容积、减半浓度的罗哌卡因。比较3组的麻醉效果。结果联合入路臂丛神经阻滞术麻醉优良率为90%,同单独应用肌间沟法或腋路法相比较,差异有统计学意义。结论对于小儿骨折闭合复位、经皮克氏针穿刺固定术等需要尺侧和桡侧神经阻滞完善的手术而言,在没有精确的定位方法帮助下,联合入路法臂丛神经阻滞术是一种比较合适的麻醉方法。

咪达唑仑与盐酸戊乙奎醚对小鼠学习记忆获得和巩固及再现的影响

目的探讨咪达唑仑(Mid)、盐酸戊乙奎醚(Pen)对小鼠学习记忆的获得、巩固和再现的影响。方法120只昆明种小鼠分成4组,每组30只。分别为M组:给予Mid 1 mg.kg-1;P组:给予Pen 0.2 mg.kg-1;M+P组:给予Mid 1 mg.kg-1+Pen 0.2 mg.kg-1;NS组:给予等量0.9%氯化钠溶液。上述各组再随机分成3个亚组,均为10只,分别参加记忆的获得、巩固和再现实验。另取30只小鼠作阳性对照,每组10只。分别为S组:给予阳性对照药物东莨菪碱2mg.kg-1;SN组:给予亚硝酸钠125 mg.kg-1;A组:给予30%乙醇。所有药物注射容积均为0.1 mL.(10 g)-1。用避暗实验的错误次数和潜伏期作为评估小鼠学习记忆的指标。训练前给药测定药物对小鼠记忆获得的影响:训练前30 min,各组分别腹腔注射Mid、Pen、Mid+Pen或0.9%氯化钠溶液;训练前15 min,S组腹腔注射阳性对照药东莨菪碱。训练后立即给药测定药物对小鼠记忆巩固的影响:各组训练后立即腹腔注射Mid、Pen、Mid+Pen或0.9%氯化钠溶液;SN组训练后立即皮下注射阳性对照药亚硝酸钠。测验前给药测定药物对记忆再现的影响:测验前30 min分别腹腔注射Mid、阳性对照药30%乙醇灌胃;测验前15 min分别腹腔注射Pen或0.9%氯化钠溶液。结果单用Mid或合用Pen对记忆的获得和巩固均有抑制作用,而对记忆的再现无抑制作用;Mid合用Pen与单用Mid比较,虽不加重记忆获得的抑制,却明显抑制记忆的巩固;单用Pen不抑制记忆的获得、巩固和再现。结论Mid和Pen对记忆的抑制作用有利于防止术中知晓。

咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚对小鼠学习记忆的影响

目的观察咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚单用、合用对小鼠学习记忆的影响。方法80只昆明(KM)小鼠分层随机区组设计,分为咪达唑仑(1mg.kg-1,midazolan,Mid)组、盐酸戊乙奎醚(0.2mg.kg-1,penehyclidine hydrochloride,Pen)组、咪达唑仑+盐酸戊乙奎醚(1mg.kg-1Mid+0.2mg.kg-1Pen,Mid+Pen)组及生理盐水(10ml.kg-1,NS)组,每组20只;每组再随机分为测试记忆获得组和巩固组,每组10只。采用避暗实验,以训练前/后给药分别评估药物对小鼠记忆获得或巩固的影响。比较各组避暗实验训练后d1、2、3、4、5、6和7测验所得的潜伏期和错误次数。结果①Mid单用或与Pen合用对记忆的获得和巩固均有抑制作用;②Mid合用Pen与Mid单用相比,不加重对记忆获得的抑制,而明显加重对记忆巩固的抑制,且合用比单用抑制记忆时间长。结论Mid和Pen联合使用,对小鼠学习记忆产生明显影响。

多次使用咪达唑仑对小鼠记忆获得的影响

目的:观察多次使用不同剂量的咪达唑仑对小鼠记忆获得的影响。方法:实验采用避暗法和跳台法。120只昆明种小鼠分成随机区组设计,分为咪达唑仑0.5mg·kg-1(M1)组、1mg·kg-1(M2)组、2mg·kg-1(M3)组、4mg·kg-1(M4)组、阳性对照药东莨菪碱(S)组、阴性对照药生理盐水(NS)组,每组20只;各组再随机选取10只,参加跳台实验或避暗实验。M1组、M2组、M3组和M4组分别以咪达唑仑0.5,1,2,4mg·kg-1、S组以2mg·kg-1东莨菪碱、NS组以10mL·kg-1生理盐水,tid、连续腹腔注射10d后进行训练,24h后进行记忆测验,以潜伏期和错误次数作为记忆获得成绩的指标。比较不同组间的记忆成绩差异。结果:不同剂量M组与NS组相比,潜伏期缩短、错误次数增多(P<0.05);S组与NS组相比、S组与M1组相比、S组与M2组相比,均表现为潜伏期缩短、错误次数增多(P<0.05)。而M3组、M4组与S组相比,潜伏期和错误次数相似(P>0.05);M2、M3和M4组与M1组相比、M3和M4组与M2组相比,潜伏期缩短、错误次数增多(P<0.05),但M3组与M4组相比,潜伏期和错误次数相似(P>0.05)。咪达唑仑对小鼠记忆获得的抑制呈剂量依赖性。避暗实验和跳台实验结果相似。结论:咪达唑仑多次使用后可呈剂量依赖性地抑制小鼠记忆的获得。

AIDS疫苗在灵长类动物模型中的发展

AIDS病是HIV感染引起的一种世界性的严重病毒病。发展一个安全、高效的疫苗将是最终控制HIV蔓延的方法。目前对AIDS疫苗的研究主要集中在全病毒灭活疫苗、病毒样颗粒疫苗、亚单位疫苗和多肽疫苗、减毒活疫苗、活载体疫苗和核酸疫苗等。在检验新型AIDS疫苗策略方面 ,非人灵长类动物模型能较好地反映HIV感染人体过程 ,有很重要的价值。现在主要有三种非人灵长类模型 :HIV 1感染的大猩猩、HIV 2感染的恒河猴 ;SIV感染的恒河猴及SHIV感染的恒河猴。本文就AIDS疫苗在灵长类动物模型中的最新发展作一综述。

多次使用咪达唑仑对小鼠学习记忆、海马CA_1区长时程增强诱发和钙/钙调素依赖性蛋白激酶-Ⅱ的影响

目的观察多次使用咪达唑仑(Mid)后对小鼠学习记忆的影响,并探讨其机制。方法60只KM小鼠按分层随机区组设计分成M1、M2、M3、M4和NS组,每组12只。分别腹腔注射0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、4mg/kgMid或生理盐水。每天3次,连续10天。第10天给药后30min,进行避暗实验训练,24h后测验。避暗实验测验后各组随机取6只小鼠,取海马分别检测LTP和CaMKⅡ含量(western-blot法)。比较各组小鼠测验时的潜伏期和错误次数、HFS前、60min后PS变化幅度和CaMKII含量。结果各剂量Mid组分别与NS组相比,潜伏期缩短、错误次数增多;在HFS后60min时,M1、M2、M3、M4组和NS组PS幅度分别为刺激前的208.60±8.82%、173.81±10.73%、138.41±8.50%、126.27±10.52%和260.60±48.62%,各剂量Mid组PS变化幅度分别与NS组相比,幅度明显降低(P<0.05);M2、M3和M4组与M1组相比、M3和M4组与M2组相比,潜伏期缩短、错误次数增多;PS变化幅度降低和CaMKⅡ含量减少(P<0.05),似呈剂量依赖性;但M3组与M4组相比,潜伏期和错误次数、PS变化幅度、CaMKⅡ含量均相似(P>0.05)。结论行为学、电生理和生化检测结果相一致,多次使用Mid后可以抑制小鼠的学习记忆,并呈一定的剂量依赖性,但该作用有封顶效应。Mid可能通过抑制CaMKⅡ对学习记忆产生影响。

咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚对小鼠学习记忆长时间的影响

目的观察咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚单用或合用对小鼠学习记忆长时间的影响。方法80只KM小鼠分层随机区组设计,分为咪达唑仑(1mg/kg,midazolan,Mid)组、盐酸戊乙奎醚(0.2mg/kg,penehyclidine,Pen)组、咪达唑仑+盐酸戊乙奎醚(1mg/kgMid+0.2mg/kgPen,Mid+Pen)组及生理盐水(10ml/kg,NS)组,每组20只;每组再随机分为测试记忆获得组和巩固组,每组10只。行为学检测采用避暗实验,以训练前/后给药分别评估药物对小鼠记忆获得或巩固的影响。比较各组避暗实验训练后d1、d2、d3、d4、d5、d6和d7测验所得的潜伏期和错误次数。结果①Mid单用或与Pen合用对记忆的获得和巩固均有抑制作用并维持较长一段时间;②Mid合用Pen与Mid单用相比,不加重记忆获得的抑制,而明显加重记忆的巩固,且合用比单用对记忆抑制时间长。结论Mid和Pen在麻醉前使用,对防止术中知晓有利,但可能是POCD的一个因素。

静脉应用不同剂量氯胺酮超前镇痛对妇科腹腔镜手术后疼痛的影响

目的 探讨小剂量氯胺酮对妇科腹腔镜手术患者的超前镇痛作用。 方法 80例ASAⅠ级择期行妇科腹腔镜下输卵管切除或卵巢囊肿剥出术的患者随机分为 4组 ,每组 2 0例。分别于手术切皮前静脉注入 0 .0 75、0 .15、0 .3mg/kg氯胺酮和生理盐水 2ml,进行术后疼痛评分和镇静评分比较。 结果 0 .15mg/kg氯胺酮组和 0 .3mg/kg氯胺酮组与 0 .0 75mg/kg氯胺酮组和生理盐水组相比 ,手术VAS评分差异有显著意义。 结论 0 .15mg/kg和 0 .3mg/kg氯胺酮术前静脉应用有一定的超前镇痛作用 ,不良反应少见 。