醛酮还原酶及其在不对称合成手性醇中的应用

醛酮还原酶是氧化还原酶家族成员之一,能对很多羰基底物进行氧化还原。综述了醛酮还原酶家族的命名、结构、保守氨基酸序列、催化机制、结合辅酶方式和结合底物的特异性;阐述了醛酮还原酶生理作用的研究方法;介绍了醛酮还原酶在手性醇合成方面的应用。

一株嗜酸氧化亚铁硫杆菌的筛选及生长条件研究

从湖北某矿的酸性矿坑水中取样,在9K培养基中分离得到一株细菌C1,对该菌株进行了形态、生理生化特性及16S rRNA序列分析。结果显示该菌为革兰氏阴性菌,短杆状,经16S rRNA鉴定为嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidi-thiobacillus ferrooxidans);生理生化鉴定结果表明其可以利用单质硫和亚铁生长,不能利用硫代硫酸钠生长。以Fe2+的氧化率为指标,研究了初始pH值、温度、接种量对C1菌生长的影响。结果表明,其最适初始pH值为2.0、温度为30℃、接种量为10%。考察了不同浸矿方法对C1菌浸磷率的影响,结果显示,经过24 d的生物浸出,普通浸矿法的浸磷率达到58.87%,比批浸矿法高出9.6%。

微波辐射合成对吗啉硫代酰甲基联苯

研究了联苯乙酮、硫和吗啉在微波加热下合成对吗啉硫代酰甲基联苯。通过正交实验得到最佳反应条件如下:微波辐射功率950 W、微波辐射时间7 min、n(联苯乙酮)∶n(硫)∶n(吗啉)为1.0∶3.5∶1.5,在此条件下,对吗啉硫代酰甲基联苯的收率为66.20%。

二苯并噻吩降解菌的筛选鉴定及煤脱硫的研究

从某石油化工厂的气浮池附近的土壤中,分离得到1株能降解二苯并噻吩的菌株DBZT,经菌株的形态特征、生理生化指标和16S rDNA序列分析,鉴定属于苍白杆菌属(Ochrobactrum sp.)。GC-MS分析菌株的发酵液,表明该菌株能将二苯并噻吩还原生成联苯。应用正交实验的方法研究了苍白杆菌DBZT在煤炭脱硫过程中煤粒度、菌液接种量和浸滤时间3个因素的组合对其脱硫效果的影响,并筛选出各因素的最佳实验条件。实验结果表明,浸滤时间对煤脱硫效率的影响最为显著。在浸滤时间为24 h,煤粒度小于0.094 mm,接种的细菌数量为3×106cfu/g煤样的条件下,菌株DBZT脱去全硫的效果最佳,达到16.28%。

重组的葡萄糖脱氢酶催化辅酶的再生性质

为解决生物催化环己酮还原反应中的辅酶再生问题,扩增了枯草芽孢杆菌中的葡萄糖脱氢酶基因(gdh),构建了表达载体pET-gdh,转化到Escherichiacoli BL21(DE3)后,获得了重组菌株E.coliBL21(pET-gdh1).经IPTG诱导后,葡萄糖脱氢酶粗酶液的比酶活达18.4U/mg蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明重组蛋白表达量占全菌胞内可溶性蛋白质的54.1%.添加E.coliBL21(pET-gdh1)到以异源表达糖多孢红霉菌聚酮合成酶模块1的酮还原酶域基因的重组菌E.coliBL21(pET-eryKR2)为催化剂的环己酮还原体系中,利用气相色谱分析转化液,显示此条件下产物环己醇的得率为93.24%,是未添加E.coliBL21(pET-gdh1)转化反应产率的3.4倍,说明E.coliBL21(pET-gdh1)能为此环己酮还原系统完成还原态辅酶NADPH的再生.