GPI-PLD调节CEA的释放对白血病HL-60细胞的增殖和凋亡的影响

糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(glycosyl phosphatidyl inositol specific phospholipase D,GPI-PLD)是人体内唯一可水解细胞膜表面GPI结构、调节GPI锚定蛋白释放的酶.将GPI-PLD转染入急性粒细胞白血病(AGL)的HL-60细胞株,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法确定转染后HL-60细胞内GPI-PLD的表达水平;并检测GPI-PLD活性;噻唑蓝(MTT)检测HL-60细胞的增殖;流式细胞仪检测HL-60细胞的凋亡.ELISA检测GPI锚定癌胚抗原(CEA)的表达和释放情况.转染GPI-PLD后,HL-60细胞株中GPI-PLD表达量与活性增加;MTT检测显示,GPI-PLD过表达后HL-60细胞株增殖生长受到抑制;流式检测证实HL-60细胞凋亡增加;且GPI锚定的蛋白质CEA释放增加.该结果提示GPI-PLD基因有抗肿瘤的作用,过表达GPI-PLD后能抑制HL-60细胞增殖且促进其凋亡,所涉机制可能与GPI-PLD释放GPI锚定蛋白,增强白血病细胞对补体杀伤的敏感性有关.

GPI-PLD过表达对肝癌细胞株HepG2生物学特征的影响

目的:研究GPI-PLD基因转染并过度表达对HepG2细胞的影响。方法:用脂质体转染法将本室已经构建的GPI-PLD真核表达载体pcDNA3.1(+)/GPI-PLD转入HepG2细胞,以未转染的HepG2细胞及转染空载体pcDNA3.1(+)的细胞为对照,G418筛选出阳性细胞克隆。用自制具完整GPI结构的胎盘碱性磷酸酶为底物,定量检测GPI-PLD活性,RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平。细胞计数绘制生长曲线,荧光染色观察HepG2细胞形态学改变,流式细胞术检测凋亡,台盼蓝排斥法观察补体介导的细胞毒(CDC)杀伤率,ELISA检测癌胚抗原(CEA)的表达情况。结果:阳性细胞克隆GPI-PLD酶活性水平比对照组升高约2倍,GPI-PLD mRNA表达水平约增加5倍;GPI-PLD基因过度表达可促进GPI锚定的蛋白质如CEA和PLAP等被大量水解释放入培养基,导致细胞增殖能力减弱,对补体杀伤的敏感性增强,细胞呈现典型的凋亡形态特征,流式细胞术检测到凋亡峰,细胞凋亡率明显增加。结论:成功将GPI-PLD基因转染入HepG2细胞,并在细胞中稳定表达。GPI-PLD过表达能抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,增强肿瘤细胞对补体杀伤的敏感性。

解剖学测量在颈椎前路减压手术中的应用

目的：探讨颈椎解剖学测量在颈椎前路减压手术中的应用价值。方法120例脊髓颈椎病患者，按随机数字表法分为研究组和对照组，每组60例。术前测量18具成年人颈椎标本C3～C7相关数据：横突孔间距离、钩突尖间距、双侧钩突后缘间距离、双侧钩突前缘间距、钩突前后径、椎管横径、椎体矢状径。研究组根据上述解剖学测量结果施行椎体前路减压手术，对照组按常规方法施行椎体前路减压手术。比较两组的手术疗效、手术时间及术中出血量。结果 C3～C7椎体钩突后缘间距离比较，差异无统计学意义（P＞0．05）；C3～C7双侧钩突前缘间距离、颈椎管最大横径比较，差异有统计学意义（P＜0．05），呈逐渐增大趋势。两组患者均顺利完成椎体前路减压手术，两组手术时间、出血量比较，差异无统计学意义（P＞0．05）；术后6个月，研究组JOA评分明显高于对照组（P＜0．05）。结论使用颈椎解剖学测量数据施行颈椎前路减压手术效果更好。

生物化学实验教学中增加综合性实验探讨

生物化学实验中,增设设计性、综合性实验,培养学生的观察能力、动手能力、独立思考能力、团队合作意识和创新能力,提高医学生的综合素质。

临床医学专业神经解剖学线上线下混合式教学实践研究

《国家中长期教育改革和发展规划纲要(2010-2020年)》中明确提出,应“把教育信息化纳入国家信息化发展整体战略”“加强网络教学资源体系建设,开发网络学习课程”等要求。本文以临床医学专业神经解剖学课程为例,针对线上线下混合式教学模式的课程目标、教学方法等课程建构思路进行大体分析,围绕课前教学准备、教学内容设计、线上教学管理、线下教学管理与课程考核评价五个层面,探讨了混合式教学模式在神经解剖学课程教学中的实践应用,并结合问题给出相关建议,以期为课程改革的具体实施提供参考价值。

数字化三维重建技术在组织瓣临床解剖教学中的应用效果观察

研究利用三维重建技术开展组织瓣解剖及相关教学活动的方法。首先,确定常用方法,分别对尸体、健康志愿者的髂骨瓣、背阔肌皮瓣与腓肠肌皮瓣进行建模;其次,对比不同图像及模型所传递信息,明确三维图像可使组织瓣结构得到清晰展现,其中以动脉分支最为典型;最后,借助软件自带模板对Movie文件进行创建,通过将其制作成视频的方式,为日后所开展教学活动提供便利。事实证明,该法可被用来对组织瓣形态进行多角度观察,在确保外科手术具备所需数据的基础上,使人体解剖结构满足可视化要求。

人体不同解剖部位表皮基底层中CD34蛋白表达及意义

目的探讨人体不同解剖部位表皮基底层中CD34蛋白表达及意义。方法采用组织学观察法、双免疫标记法、流式细胞术检测人包皮、头皮和躯干皮肤来源的组织标本中CD34蛋白表达。结果 CD34蛋白在人包皮和头皮的表皮基底层细胞中有表达,而在人躯干皮肤的表皮中无表达。Ⅰ型表位CD34蛋白的分布比Ⅱ、Ⅲ型表位CD34蛋白更加广泛。CD34阳性的基底层细胞同时也有β1整合素或p63的表达,并随着细胞传代而减少。不同年龄CD34I型表位的阳性表达率均明显高于Ⅱ型和Ⅲ型(P<0.05),而不同年龄组的CD34阳性率各表位比较无显著性差异(P>0.05)。结论 CD34蛋白主要分布于包皮和头皮的表皮基底层细胞中,可用于包皮和头皮的表皮基底层细胞的分选。

“两学一做”在新建本科院校“三风”建设中的应用研究

本文针对新建本科院校在管理干部作风、教风、学风等"三风"建设上存在的问题,结合目前正在进行地"两学一做"学习教育的实践活动,引领"三风"建设,争做合格的管理者、教师和学生,提出了相应地组织实施方案,以便进一步提高教育教学质量。

浅谈新时代民办高校教师队伍建设的矛盾

新时代,加强教师队伍建设是加快建设教育强国的基础工作。面对目前社会主要矛盾的变化和人民对优质教育的需求,民办高等教育的教师队伍建设面临巨大的挑战。只有正确处理教师队伍建设中教师资源流动、教师发展、教师与学校等的矛盾,建立健全长效的教师发展机制,民办高校才能在日益激烈的人才竞争中处于不败之地。

新建本科院校形成性考核成绩的组成及基本考核模式

形成性考核教学是新建本科院校应当重视的一种教育教学模式。新建本科院校实施形成性考核教学是贯彻落实党中央教育政策的必要措施,也是保障学生学习真正有所得,真正实现基本受教育权利的必要手段。强化形成性考核可以提高新建本科院校教育的水平和质量,促进其学校既有教育的发展。目前来说,新建本科院校的形成性考核教学存在一系列问题。该文认为,要想推进新建形成性考核的水平和层次,就必须不断加强教师队伍建设,同时不断提高教育投入,不断强化各级对于形成性考核的重视程度。

导入小麦DNA的水稻变异系抗逆生理研究

导入小麦 DNA的水稻品种洛伊的三个 F4 代变异系 MD1 1 - 2、MD2 0 - 4和 MD1 8- 4,其寒、旱抗性的相关生理性状有明显差异 ,且与 DNA供体和受体 (亲本 )的明显不同 .在 4℃低温时 ,MD1 1 - 2和 MD1 8- 4和亲本细胞膜透性没明显变化 ,MD2 0 - 4的细胞膜透性则增大 ;在脱水过程中 ,三个变异系的电导率曲线的转折变化与洛伊相似 ,但其值均比它高 .在低温下 ,MD2 0 - 4和 MD1 8- 4的游离氨基酸和可溶性糖含量的变化模式基本相似 ,而与 MD1 1 - 2的变化有些不同 ;但在脱水条件下 ,三者的游离氨基酸含量变化均有差别 ;MD2 0 - 4和 MD1 8- 4的可溶性糖含量变化相似 ,且均比 MD1 1 - 2的高 .在低温下 ,三个变异系的脯氨酸含量的升降变化差别较大 ;在脱水条件下的差别较小 .结果表明 ,用导入外源 DNA改良水稻的抗寒性和抗旱性有一定效果 ,但要注意变异系之间的差异 .

基于GEO数据库的血管性痴呆疾病相关基因的生物信息学分析

基于生物信息学分析血管性痴呆发生发展过程中的关键基因及重要通路,为其发病机制的解析和治疗提供新的候选靶点和理论依据。方法 从基因表达数据库(GEO)下载GSE122063数据集,分为前额叶皮质(Frontal Cortex,VaD F)组和其对照(Control F)组,颞叶皮质(Temporal Cortex,VaD T)组和其对照(Control T)组。筛选组间差异表达基因(DEGs),通过对DEGs进行GO功能注释和KEGG通路分析、利用STRING获得蛋白相互作用数据、使用Cytoscape软件对互作数据进行分析,最终得到关键基因。结果 组间样本数据比较共有355个显著差异表达基因(|log2FC|≥1,P <0.05),其中上调基因107个、下调基因248个。共筛选出C1QA、CCL2、CCR5、CD33、CRH、GNG1等6个潜在的关键基因。通路分析显示差异表达基因主要富集于补体激活(病毒)、补体激活凝集素通路、钙信号通路等7条通路。结论 本研究为进一步研究血管性痴呆的发病机制提供了新的思路和理论依据。

基于网络药理学探究苍术抗血管性痴呆的作用机制

基于网络药理学研究苍术抗血管性痴呆的作用机制。方法 通过TCMSP数据库和Uniprot数据库筛选苍术的活性成分及作用靶点,通过OMIM数据库和Gene cards数据库筛选VaD作用靶点,用jvenn工具软件获取苍术和VaD的交集靶点,利用STRING构建中药-疾病靶点蛋白相互作用网络与筛选核心基因;结合两者的数据用Cytoscape 3.9.1建立与血管性痴呆相关的苍术对活性成分—潜在靶点网络,利用DAVID平台对网络进行GO富集分析、KEGG通路注释分析,研究苍术抗血管性痴呆的作用机制。经过研究,苍术中发现了9种有效的化学成分,而且这些成分对血管性痴呆的治疗有着重要的作用,共计发现了49个潜在靶点,其中包括AKT1、TNF、IL6、CASP3和TP53等核心基因。经GO功能富集分析,共收录了419个条目,包括314个生物过程、40个分子功能和65个细胞成分。经KEGG通路注释分析,共检索到44条通道,包括有癌症信号通路、糖尿病并发症的AGE-RAGEA信号通路等。结论 初步验证和预测苍术主要通过抑制炎症的途径抗血管性痴呆,为研发治疗血管性痴呆的药物提供一定的理论数据和开发方向。

全反式维甲酸对白血病HL-60细胞株GPI-PLD基因表达的影响

目的研究用分化诱导剂全反式维甲酸(ATRA)培养HL-60细胞株后GPI-PLD的表达变化,以初步探讨该酶在全反式维甲酸(ATRA)作用下的变化及其与白血病细胞生长增殖的关系。方法用ATRA处理HL-60细胞后,以胎盘碱性磷酸酶为底物,定量检测GPI-PLD活性;RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平;MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期。结果加入全反式维甲酸培养后,HL-60细胞株中GPI-PLD表达量和活性增加。流式细胞仪检测显示细胞阻滞在G2/M期;MTT实验检测显示ATRA处理后HL-60细胞株增殖生长受到抑制。结论加ATRA处理后HL-60细胞株增殖生长受到抑制,可能与GPI-PLD表达量显著增加有关。

人体不同解剖部位表皮基底层中CD34蛋白表达及意义

目的:探讨人体不同解剖部位表皮基底层中CD34蛋白表达及意义。方法:采用组织学观察法、双免疫标记法、流式细胞术检测人包皮、头皮和躯干皮肤来源的组织标本中CD34蛋白表达。结果:CD34蛋白在人包皮和头皮的表皮基底层细胞中有表达,而在人躯干皮肤的表皮中无表达。Ⅰ型表位CD34蛋白的分布比Ⅱ、Ⅲ型表位CD34蛋白更加广泛。CD34阳性的基底层细胞同时也有B1整合素或p63的表达,并随着细胞传代而减少。不同年龄CD34Ⅰ型表位的阳性表达率均明显高于Ⅱ型和Ⅲ型(P<0.05),而不同年龄组的CD34阳性率各表位比较无显著性差异(P>0.05)。结论:CD34蛋白主要分布于包皮和头皮的表皮基底层细胞中,可用于包皮和头皮的表皮基底层细胞的分选。

基于生物信息学的神经胶质瘤差异基因表达与功能预测研究

基于生物信息学技术筛选神经胶质瘤发生发 展过程中的关键基因,为神经胶质瘤的发病机制和治疗提供新的候选靶点和理论依据。方法 从基因表达数据库(GEO)下载GSE4290基因芯片数据集,将其分为癫痫病对照组和神经胶质瘤实验组,获取组间差异表达基因(DEGs),对DEGs进行GO功能注释、KEGG信号通路注释,利用STRING数据库获取差异表达基因蛋白的互作信息,同时运用Cytoscape软件进行可视化处理筛选出潜在关键基因。结果 基于组间数据比较筛选出180个显著差异表达基因,其中低表达基因138个,高表达基因42个。GO功能注释分析表明,差异基因主要涉及化学突触传递、运输、神经系统发育、氯化物跨膜转运等功能簇。KEGG通路分析结果显示,差异表达基因主要富集于钙信号通路调控作用、神经活性配体-受体相互作用、尼古丁成瘾等5条通路。蛋白质相互作用网络分析共筛选出10个潜在的核心基因(CDK1、EZH2、HMMR、TOP2A、BUB1、BIRC5、ASPM、CCNB2、FOXM1和PBK)。结论 筛选得到的关键基因(CDK1、EZH2、HMMR、TOP2A、BUB1、BIRC5、ASPM、CCNB2、FOXM1和PBK)可能是神经胶质瘤发生发展的关键基因,这对揭示神经胶质瘤发生的分子机制提供了新的可能,同时对临床治疗开辟了新的方向。