血清视黄醇结合蛋白联合脂联素对妊娠期糖尿病的早期预测价值

目的：探讨妊娠妇女血清视黄醇结合蛋白（RB P ）、脂联素以及两者比值早期预测妊娠期糖尿病的价值。方法采用病例对照研究，检测并比较88例妊娠期糖尿病及88例正常妊娠妇女孕16～20周血清RBP和脂联素浓度水平。结果妊娠期糖尿病组，血清RBP浓度以及其与脂联素的比值显著高于对照组（ P＜0．01），血清脂联素浓度显著低于对照组（ P＜0．01）。RBP≥30．45 mg／L时，预测妊娠期糖尿病的敏感性为63．6％，特异性为75．0％；脂联素≤9．93 mg／L时，预测妊娠期糖尿病的敏感性为80．7％，特异性为65．1％；RBP与脂联素的比值大于或等于3．18时，预测妊娠期糖尿病的敏感性为81．8％，特异性为76．7％。结论孕16～20周孕妇RBP和脂联素的联合运用对于妊娠期糖尿病的预测价值高于单独使用。

亚洲璃眼蜱不同发育阶段及其组织中microRNA-10表达分析

【目的】MicroRNA(miRNA)是一类长度为20—22个核苷酸(nt)且高度保守的非编码小RNA。迄今为止,在病毒、动物、植物中都有发现,如在Mareks病毒、果蝇、斑马鱼、人类以及拟南芥等多种生物中都有存在。其通过与靶基因特异性的碱基互补配对使靶基因降解或者受到抑制,在转录后水平调控靶基因的表达水平。miRNAs参与多种生物的细胞增殖、分化、代谢与死亡等多种生物学过程。为了解microRNA-10在亚洲璃眼蜱中的潜在生物学功能,试验获得亚洲璃眼蜱miR-10的前体、成熟体序列;分析亚洲璃眼蜱不同发育阶段及组织miR-10的表达水平,及亚洲璃眼蜱miR-10的生物学意义;为进一步研究miR-10与亚洲璃眼蜱生长发育间的关系奠定基础。【方法】用Trizol Reagent分别提取不同发育阶段及组织的总RNA,用SYBR?Prime Script TMmiRNA RT-PCR Kit(TaKaRa Code:RR716)制备cDNA。参考miRBase数据库中isc-miR-10(登录号:MI0012262)序列,设计特异性引物,通过PCR的方法从亚洲璃眼蜱中扩增获得miR-10前体序列,通过MEGA4软件将此前体序列与已知物种的miR-10前体序列进行比对分析;利用qPCR技术分析亚洲璃眼蜱不同发育阶段及组织miR-10的表达情况;推测miR-10在亚洲璃眼蜱中的生物学功能。【结果】获得亚洲璃眼蜱miR-10的前体序列CUACAUCUACCCUGUAGAUCCGAAUUUGUUUGCCACUAGACUACAAAUUCGGUUCUAGAGAGGCUUUGUGUGG,大小为73bp;亚洲璃眼蜱的miR-10前体序列与肩突硬蜱的相似性最高,是95.9%,且与其他节肢动物相似性在88.9%—91.7%之间;miR-10在不同物种间高度保守。miR-10的成熟体序列为UACCCUGUAGAUCCGAAUUUGU,种子序列为ACCCUGU。在亚洲璃眼蜱的不同发育阶段中,饥饿若蜱的miR-10的表达水平最高,是卵的48.3倍;饥饿成蜱是卵的7.78倍;饥饿幼蜱是卵的2.78倍。在饥饿雌性成蜱吸血过程中,吸血3d的成蜱是饥饿成蜱的约4.28倍,吸血5d的成蜱是饥饿成蜱的约0.31倍,饱血自然脱落的成蜱是饥饿成蜱的约0.087倍。吸血初期miR-10的表达量上调,随着吸血时间的延长其表达量逐渐下调;在唾液腺、气管、卵巢、表皮、中肠中miR-10的表达情况有明显不同,其中唾液腺的表达量最高,是表皮的13.2倍;卵巢的表达量是表皮的2.98倍,气管的表达量是表皮的6.46倍。【结论】从亚洲璃眼蜱中克隆miR-10序列,序列分析显示此序列在节肢动物中相对保守。miR-10在亚洲璃眼蜱不同发育阶段及不同组织的表达明显不同,表明其表达具有选择性;依据miR-10表达的差异性及已报道miR涉及的生物学功能,推测miR-10在亚洲璃眼蜱的细胞增殖、发育及吸血方面有潜在的重要作用。本研究为寄生虫miRNAs功能的研究提供一定的依据,并有可能为防控寄生虫疾病开辟新的途径。

增强型绿色荧光蛋白基因在日本血吸虫成虫体内的瞬时表达

目的探讨异源性增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因在日本血吸虫成虫体内表达的可能性。方法运用电穿孔技术将质粒pEGFP-C1导入日本血吸虫成虫体内,提取分离体外培养48小时成虫的基因组DNA、总RNA和全虫蛋白,分别用PCR、RT-PCR和Western blot验证转基因在成虫体内的存在、转录和翻译。同时,使用激光共聚焦扫描显微镜对EGFP在成虫体内进行定位。结果PCR和RT-PCR分别成功的扩增出760bp和276bp的预期大小的片断,Western-blot证实了EGFP基因在成虫体内的表达;激光共聚焦显微镜观察到,EGFP主要定位在成虫的皮层,口吸盘和尾部尤为明显。结论电穿孔技术成功地将异源基因引入日本血吸虫成虫体内并获得表达,为转基因血吸虫和基因功能的研究打下基础。

用电穿孔法将绿色荧光蛋白基因导入日本血吸虫童虫并表达

目的探讨增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因在日本血吸虫童虫体内异源表达,以及电穿孔技术在血吸虫基因转化中应用的可能性。方法应用电穿孔技术将质粒pEGFP-C1导入机械转化的日本血吸虫童虫体内,提取分离体外培养48 h童虫的基因组DNA、总RNA和全虫蛋白,分别用PCR、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)验证转基因在童虫体内的存在、转录和翻译。同时,使用激光共聚焦扫描显微镜对EGFP在童虫体内进行定位。结果PCR和RT-PCR分别成功扩增出760 bp和276 bp的预期大小的片段,Western blotting证实了EGFP基因在童虫体内的表达;激光共聚焦显微镜观察表明EGFP主要定位在童虫的皮层和副皮层,虫体前端尤为明显。结论电穿孔技术成功地将异源基因引入日本血吸虫童虫体内并获得表达。

略论《红楼梦》人物的“魏晋风度”——以林黛玉形象为例

古琴是中国独有的文化元素,嵇康作为中国魏晋时期精于古琴的名士代表,展现了当时高标于世的"魏晋风度",对后世文学创作产生了深刻影响。《红楼梦》在对林黛玉形象的塑造过程中,对嵇康的名士形象进行了艺术的临摹,通过对林黛玉有关古琴研习与品论的生动描写,展现了林黛玉"玄心、洞见、妙赏、深情"的"名士风流"之美,也巧妙地勾连了嵇康与林黛玉的人生命运,进而从一个侧面呈现了《红楼梦》深厚而高雅的艺术底蕴。

转基因血吸虫的研究进展

近年来 ,伴随着基因转移等分子生物学技术的突飞猛进 ,转基因血吸虫的研究取得了一定突破 ,该文以血吸虫的生活史、转染方法、绿色荧光蛋白等方面为切入点 。

中国儒家“仁、礼”思想与霍布斯的自然法观

"仁、礼"思想是中国儒学的主要思想,霍布斯在其自然法的理论成果中,多处透露出与中国儒家所倡导的"仁礼"观点的相似性。通过对中国儒家"仁、礼"思想与霍布斯自然观之比较,认为霍布斯在语言表述和思想内容中,所表现出的"仁礼"思想较之中国儒家思想而更具有理性成分和进步因子。

富含辩证法光辉的人民战争理论——浅析毛泽东《论持久战》中的战争观

《论持久战》是毛泽东同志写于抗战时期的一篇军事著作,毛泽东同志以一名军事家的战略眼光和哲学家的思维技巧,将辩证法的精髓深入贯彻到了文章之中。《论持久战》所阐述的人民战争理论,充分展现了全面、联系、发展、矛盾同一等辩证法的哲学蕴涵。

略论“竹林玄谈”的社会本位品格与时代价值

以嵇康、阮籍思想为代表的“竹林玄谈”，上承“正始玄风”，下启“中朝清谈”，开创了一条颇富特色的儒道互补之路。处于魏晋交替时代白色恐怖中生息的竹林玄谈，特异的政治历史背景赋予了其突出的社会本位品格。竹林玄谈在表面旷达风流的同时流露了其独特的社会忧患意识和社会批判精神，它塑造了众多高洁俊烈、风神独秀的一代名士。同时也在“越名教而任自然”的呼声中展现出了其独特的时代价值并千古流传。

“竹林玄学”的文化价值重构与当代大学生人格塑造之关系研究

魏晋交替时期的"竹林玄学",因为其"越名教而任自然"的玄学气象、珠联璧合的形象之美与精神之美、旷达风流背后的社会忧患意识与凄风苦雨中的社会批判精神等独特的文化特质而具有丰富的文化价值,我们可以通过挖掘和重构竹林玄学的文化价值助力大学生人格塑造。

“四渡赤水”之文化涵蕴及其时代价值研究

"四渡赤水"之战不仅包容了丰富的军事文化思想,更体现了一种灵活机动的文化作风、知难而进的文化理念和乐观向上的文化情怀,其"文化涵蕴"对于发展老区经济具有重大的时代价值。

人类学语境中黔北嗜酒习俗的文化解构

黔北嗜酒习俗具有悠久的历史渊源,是自然生态和人文生态结合的产物。其本质上展现为酿酒习俗、贮酒习俗、饮酒习俗的三者一体。作为一种文化符号,它是黔北民众夸耀式生活方式的标志,具有划分地域族群的文化意义,也成为了黔北族群情感认同的重要载体。

地方“非遗”的生态价值——以黔北赤水河流域“酿酒三祭”为例

以贵州茅台镇为代表的黔北赤水河流域,在酿酒文化的复苏与兴盛过程中,恢复并隆重举行了以祭水、祭麦、祭酒(统称为“酿酒三祭”)为代表的展现“人—自然—技艺”和谐关系的祭祀活动,其文化事象呈现了庄严的仪式感,强化了当地民众对生态的敬畏意识,激发了当地民众的生态自觉,凝聚了当地民众的生态保护共识,呈现出丰富的生态价值。

关于高校党建与大学生政治参与之关系的几点思考

加强高校党建与发展大学生政治参与在着力点上具有契合性。高校应该在创新党的理论建设、强化党的组织建设、丰富党建工作的文化蕴涵等方面切实培养大学生政治参与能力。

略论马克思主义中国化与中国民族文化的相融性

马克思主义中国化包含着马克思主义的精神实质和中国民族文化的融合，中国文化发展的历史进程天然地表现出马克思主义中国化具备中国民族文化基础的必然性，马克思主义也和中国民族文化具有先在的本质联系。在注意保持中国民族文化的文化气节和文化品性的同时，中因共产党代表先进文化的前进方向必然要求马克思主义中国化，这也为马克思主义中国化和中国民族文化的相融和契合提供了现实基础和政治基础。

黄芪总苷对血吸虫卵抗原活化的肝星状细胞增殖与胶原合成的影响

目的观察黄芪总苷对血吸虫卵抗原活化的肝星状细胞增殖与胶原合成的影响。方法小鼠腹腔注射日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Solub le egg antigen,SEA),制备SEA活化的腹腔巨噬细胞条件培养基(Solub le egg antigen inducedm acrophage cond itioned m ed ium,SEA-MCM)。采用肝星状细胞株HSC-T6细胞,以细胞增殖抑制率为指标,用噻唑蓝(MTT)测定黄芪总苷对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞增殖的影响;通过3H-脯氨酸参入法测定黄芪总苷对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞胶原合成的影响。结果SEA-MCM能明显促进HSC-T6细胞的增殖和胶原合成。黄芪总苷(32.5、65和130 mg.L-1)对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞增殖及胶原合成有明显的抑制作用,且呈药物浓度依赖性关系。结论黄芪总苷对SEA-MCM诱导的肝星状细胞增殖及胶原合成有明显的抑制作用。

重组日本血吸虫26ku谷胱甘肽-硫-转移酶的表达、纯化及其免疫特性分析用于急性血吸虫病免疫诊断

目的将日本血吸虫(中国大陆株)26ku谷胱甘肽硫转移酶(26kuSjGST)基因克隆入pET28a(+)并诱导表达26kurSjGST蛋白,纯化并用于急性血吸虫病免疫诊断。方法构建重组质粒pET28aSjGST,转化到E.coliBL21,经IPTG诱导表达并进行SDS变性蛋白质电泳,以小鼠抗GST单克隆抗体为一抗,进行Westernblot分析。用His·BandPurificationKit亲和层析纯化重组蛋白,以此重组蛋白作为抗原,用ELISA法检测急性血吸虫患者血清和非流行区正常人血清。结果成功地构建了重组质粒pET28aSjGST,SDS变性蛋白质电泳显示可见一与预期分子量大小相符的特异蛋白条带的表达。Westernblot分析表明,该重组蛋白能被小鼠抗GST单克隆抗体识别。ELISA结果表明,rSjGST用于急性血吸虫患者血清中抗体检测的阳性率为92.3%。结论rSjGST得到表达和纯化,该重组蛋白用于急性血吸虫患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,为进一步探讨其在血吸虫病诊断中的应用奠定了基础。

环形泰勒虫裂殖体表面蛋白基因PCR诊断方法的建立

为寻求一种快速灵敏的环形泰勒虫病PCR检测方法,基于环形泰勒虫裂殖体表面蛋白(Theirelia annulata surface protein,TaSP)基因序列保守区设计特异性引物,通过PCR技术扩增出该基因长为393bp的高免疫原性区片段。用该引物对环形泰勒虫、中华泰勒虫、瑟式泰勒虫、尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫、绵羊泰勒虫、马泰勒虫、驽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫基因组模板进行特异性试验,对环形泰勒虫基因组模板进行梯度稀释后扩增,以确定试验的敏感性,同时用本试验建立的方法与常规显微镜镜检方法对150份血清样品进行检测。特异性试验结果显示,在被检测的9个样本中,只有环形泰勒虫基因组模板中扩增出了符合大小的特异核苷酸片段;敏感性试验结果表明,PCR对环形泰勒虫的扩增效率可达到10-10;通过对150份血清样品的检测,并与血涂片方法进行比较,结果显示PCR方法具有特异性强、敏感度高等特点,适用于牛环形泰勒虫病的检测。

重组Sj14-3-3,SjGST及mIL-12/聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)缓释微球对小鼠免疫保护性的研究

目的研究聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球给药系统在血吸虫病分子疫苗中的应用,并探讨rSj14-3-3,rSjGST及mIL-12作为疫苗的协同作用,及mIL-12刺激机体产生CTL和辅助性T细胞(Th)在抗血吸虫病中的作用。方法从pET28a/Sj14-3-3和GST重组质粒中诱导表达rSj14-3-3及rSjGST,过柱纯化。构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)mIL-12,并共同包入PLGA缓释微球。对制备的微球进行体外释放,观察其释放速度。分组免疫BALB/c小鼠,进行尾蚴攻击感染实验。在攻击感染6w后,剖杀小鼠,计算各组的减虫率。结果各组的减虫率:单独rSj14-3-3组为27.6%,rSj14-3-3+PcDNA3.1(+)mIL-12组34.9%,rSj14-3-3+PcDNA3.1(+)mIL-12PLGA微球组37.5%,rSj14-3-3与rSjGST混合后+PcDNA3.1(+)mIL-12PLGA微球组38.8%;各组减卵率分别为(按以上组序)35.3%,49.1%,50.5%,和43.1%。结论PLGA微球给药系统可诱导并调节体液与细胞免疫从而增强了疫苗的抗感染,抗生殖作用。但rSj14-3-3和rSjGST抗原之间未表现出协同作用。mIL-12刺激机体产生CTL和辅助性T细胞(Th),在BALB/c鼠抗血吸虫攻击感染发挥作用,增强了疫苗保护作用。

胎盘生长因子及可溶性血管内皮生长因子受体1的水平变化与子痫前期发病的关系

目的:检测正常妊娠与子痫前期患者不同孕周的血清胎盘生长因子(placenta growth factor,PLGF)以及可溶性血管内皮生长因子受体1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)的水平,探讨二者在子痫前期发病中的作用。方法:检测并比较31例轻度子痫前期患者、26例重度子痫前期患者及200例正常妊娠妇女血清PLGF和sFlt-1水平。结果:在孕12～16周、孕20～24周、孕28～32周、孕37～41周,轻度与重度组PLGF水平均显著低于正常妊娠组水平(P<0.01);除孕12～16周,各组sFlt-1水平差异无显著性意义(P>0.05),其余各期轻度与重度组均高于正常妊娠组水平(P<0.01);轻、重度子痫前期组,各阶段sFlt-1/PLGF的比值均显著高于正常妊娠组(P<0.01)。结论:孕妇血清中PLGF和sFlt-1水平变化与子痫前期发病及病情发展有关。