脐孢木霉菌中tri基因簇的克隆及tri基因在不同产素水平下的表达分析

木霉素(trichodermin)是单端孢霉烯类化合物的一种,其对多种植物病原真菌具有较强的抑制作用。为分析脐孢木霉菌Trichoderma brevicompactum tri基因簇中各基因与木霉素合成的关系,本研究首先克隆得到了脐孢木霉菌0248的tri基因簇,其全长24793 bp且含有7个开放阅读框。利用实时荧光定量PCR分析基因簇中各基因在产木霉素能力不同的培养基中表达,结果表明,高产素培养基中tri基因表达量在培养40 h时较高,随后的时间里表达量大幅降低。在低产或不产素培养基中,tri基因在培养40 h时表达量远低于其在高产素的培养基中基因表达量,在52 h时表达量有所提高,但在随后的时间里呈下降趋势,即tri基因簇表达量与木霉素的产量呈正相关。该研究为进一步阐明木霉素合成途径中相关基因的功能和提高脐孢木霉菌0248的生物防治效果奠定了基础。

淀粉酶产色链霉菌1628发酵培养基及发酵条件的优化

淀粉酶产色链霉菌1628(Streptomyces diastatochromogenes)是一株具有广阔应用前景的生防菌株,其合成的主要活性物质为核苷类抗生素——丰加霉素.为了提高淀粉酶产色链霉菌的发酵水平,本研究采用单因素和正交实验设计,对菌株1628的发酵培养基和发酵条件进行了优化,优化后的最佳培养基配方为:可溶性淀粉1.5%、黄豆粉5%、FeSO40.1%、CaCO30.5%、NH4NO3 0.3%、KH2PO4 0.3%,最适初始pH7.0.在供试的发酵条件内,装液量60mL/250mL,发酵温度28℃,摇床转速180r/min,发酵时间为92h.活性物质丰加霉素的产量最高156.17mg·L-1,比优化前提高了3.3倍.