百脉根高频再生体系建立和猪瘟病毒E2基因的遗传转化

在建立百脉根(Lotus corniculatus L.)高频再生体系的基础上,通过农杆菌介导,将猪瘟病毒(CSFV)表面抗原E2基因转化进入百脉根,获得转基因阳性株系5个。并对遗传转化体系中关键性因素进行优化,结果表明,最优化体系为子叶预培养3 d后,用OD600nm为0.5±0.05的菌液侵染30 min,共培养3 d并添加AS(乙酰丁香酮),选择培养基中卡那霉素浓度为50 mg/L,可获得理想的转化效率。为抗猪瘟可食性疫苗的研制奠定基础。

Ajuba与Twist相互作用调控N-cadherin表达对结直肠癌细胞迁移的影响

目的探索结直肠癌细胞中Ajuba与Twist之间的相互作用,及该作用对于结直肠癌迁移所产生的影响。方法运用免疫共沉淀方法验证外源性Ajuba与Twist蛋白之间是否存在相互作用;荧光素酶活性检测Ajuba对于Twist下游靶基因N-cadherin启动子的转录活性;构建结直肠癌SW1116-sh Ajuba稳转细胞株,并进行Transwell侵袭实验,观察细胞迁移能力变化。结果 Ajuba与Twsit之间存在相互作用,并且Ajuba能通过Twist促进N-cadherin的表达调控。在结直肠癌细胞SW1116-sh Ajuba稳转细胞中可发现,Ajuba基因表达水平降低,蛋白表达下降,能抑制细胞迁移能力。结论 Ajuba是转录因子Twist的共活化因子,能够促进N-cadherin表达,增强结直肠癌细胞的迁移能力。