b型流感嗜血杆菌结合疫苗的制备及免疫学特性

目的制备ｂ型流感嗜血杆菌结合疫苗，观察免疫学特性。方法通过已二酸二肼（ＡＤＨ），将纯 化的荚膜多糖抗原与破伤风类毒素（ＴＴ）蛋白共价结合，制备ｂ型流感嗜血杆菌结合物。以２．５μｇ多糖或含２．５μｇ 多糖结合物经皮下免疫ＮＩＨ雌性小鼠，用ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清ＰＲＰ抗体及Ｔ抗体水平。结果用本实验方法提 取的多糖、合成的多糖衍生物、多糖－蛋白结合物都具有ｂ型流感嗜血杆菌的抗原特异性，其化学组成及结构特性 与国外文献报道结果基本一致。单独用多糖免疫小鼠未能诱导高水平的血清ＰＲＰ抗体，而用结合物免疫小鼠却诱 导出高水平的血清ＰＲＰ抗体及ＴＴ抗体，并存在免疫记忆性。结论本实验为进一步临床评价结合物的体内保护 性效果提供了实验基础。

A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗免疫效果观察

目的 观察法国A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗对 7～ 14岁儿童接种后的安全性、免疫原性和免疫持久性。方法 观察组 6 0人 ,接种剂量为 10 0 μg/ 0 .5ml/人 ,对照组 30人接种维生素B1;免疫前、免疫后 1月、1年、2年和 3年分别收集血液标本 ,用ELISA方法进行抗体水平检测。结果 疫苗接种后人体反应轻微 ,6 0人中仅 2人(3.3% )出现中度发烧 ,有 3人 (5 % )出现局部红晕 ,48h后反应全部消失。免疫后 1个月 ,A群和C群抗体 4倍增长率分别为 94.4%和 96 .3% ;免疫后 1年、2年和 3年 ,A群和C群抗体 4倍增长率均为 10 0 %。结论 该疫苗较安全 ,免疫原性较强 ,且更具免疫持久性。

A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的研制

目的 制备安全有效的Ａ群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。方法 通过碳二亚胺（ＥＤＡＣ）将Ａ群脑膜 炎球菌多糖－ＡＨ衍生物与破伤风类毒素（ＴＴ）蛋白共价结合，制备Ａ群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。结果 所结合 成的多糖－蛋白结合物，具有Ａ群脑膜炎球菌多糖和破伤风类毒素抗原特异性。单独用多糖免疫小鼠未能诱导出 高水平的血清Ｐｓ抗体，而用结合物免疫小鼠却诱导出高水平的血清Ｐｓ抗体及ＴＴ抗体，并有免疫记忆性。结论 为进一步临床评价该疫苗的人群免疫效果提供了实验基础。

大鼠抗——HB_s的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立

用纯化的小鼠单克隆抗—HBs和纯化的大鼠多克隆抗—HBs免疫LOU/C大鼠,取免疫大鼠脾细胞与IR983F骨髓瘤细胞融合,获得两株(TD_1、TD_2)持续分泌抗—HBs的单克隆抗独特型抗体(抗—Id,Ab_2)杂交瘤细胞系。对TD_2进行了较全面的鉴定,TD_2的Ig类型为IgG,亚类为IgG_(2?),核型分析结果染色体数为65条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,TD_2所分泌的Ab_2既能被不同来源的抗—HBs所中和。又能被HBsAg.所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的TD_2IgG免疫同系大鼠,诱导出了具有抗—HBs活性的抗—抗—独特型抗体(Ab_3)。上述结果证实,TD_2所分泌的单克隆抗体(McAb)是带有HBsAg表位内影像,具有HBsAg免疫源性的抗—HBs的单克隆抗—Id。

应用细胞倍增时间测定新生牛血清的质量

应用细胞倍增时间测定24批新生牛血清的促细胞生长效应,从中优选出5批,在用于杂交瘤细胞的研究工作中均获得满意的结果。其操作方法简便,实验数据准确可靠。为新生牛血清的质量控制打下了基础。

鼠抗HCV单克隆抗体研制及初步应用探讨

交联HCV 合成多肽抗原,用鼠一鼠杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗HCV 的特异性单抗,分别命名为YLCV 系1—8。经初步研究结果表示,抗HCV 抗体阳性血清可抑制酶标YLCV-1和YLCY-5单抗与抗原的反应。抗原测定结果6份血清中有一份呈强阳性反应,由此提示单抗在HCV 抗体抗原检测系统中应用的可能性,同时为HCV 抗原成份的分析提供了必要的条件.

23价肺炎球菌多糖疫苗安全性及免疫原性现场考察

对 140名 5 5～ 70岁老人肌肉注射 2 3价肺炎球菌多糖疫苗 ,剂量为 5 75 μg 0 .5ml。于注射后观察反应 ,并于接种前及接种后 1个月分别采血 ,用ELISA改良法检测 2 3种抗体水平。疫苗接种后全身反应轻微 ,接种 6～ 8h和 2 4h内分别有 2 8人 (2 0 .0 0 % )和 38人 (2 7.14% )发生不同程度局部红肿 ,分别有 5 8人 (41.42 % )和 41人 (2 9.2 8% )局部疼痛。 48h后 ,上述局部反应明显减轻 ,72h后全部症状消失。检测 10 0名被接种者抗体滴度 ,均有良好的免疫应答 ,总抗体的几何平均滴度 (GMT)增加 2 .4倍 ,除 3型外 ,各型免前免后滴度差异均有非常显著意义 ,表明疫苗免疫原性较好。

肺炎链球菌血清学分型的研究

用荚膜肿胀试验方法,对我国分离的712株肺炎链球菌进行分型研究的结果表明:712株肺炎链球菌共分成42个型(群),未发现40、42、44和4 7.型(群)。在常见的血清型(群)中,以5型最多,其次是6、1、19、2、14、23和3型(群),以上8个型(群)共453株,占63.6%。另外还发现16A 和10C 型新型菌株。从脑脊髓液(CSF)分离出180株肺炎链球菌是2型最多,其次是5、6、1、27、23、14、12和7型(群),以上9个型共137株,占76.1%。从血液中分离出71株肺炎链球菌,以1型最常见,其次是5、6、14、19、7、8和35型(群),以上8个型(群)共52株,占72.6%。从中耳液中分离出253株肺炎链球菌,其中19群占首位,其次是6、5、23、14、3、1和15型(群),以上8个型(群)共183株,占72.3%。

快速PCR法与常规法检测动物细胞培养物污染支原体的比较研究

本文报告两步ＰＣＲ法快速检测污染动物细胞培养物的支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）．外部引物ＰＦ１，ＰＲ１和内部引物ＰＦ２，ＰＲ２选自ｒＲＮＡ操纵子１６ＳｒＲＮＡ，２３ＳｒＲＮＡ空间保守区域，第一步ＰＣＲ产物长度在３０９～５２７ｂｐ之间，第二步ＰＣＲ产物长度在１１０～３０９ｂｐ之间，此方法能扩增污染细胞常见的七种支原体，灵敏度达到２０３ｆｇ／ｍｌ，不能扩增常污染细胞的ＣＭＶ、Ｅ．ｃｏｌｉ以及ＳＰ２／０细胞、Ｈｅｌａ细胞的ＤＮＡ．５３株细胞培养物，ＰＣＲ检测２０株（３７．７％）为阳性，直接培养法检测１３株（２４．５％）为阳性，ＤＮＡ荧光染色法检测１４株（２６．４％）为阳性，其中动物细胞２３株，ＰＣＲ检测９株（３９．１％）为阳性，直接培养法检测７株（３０％）为阳性，ＤＮＡ荧光染色法检测８株（３４．８％）为阳性，不计ＡＴＣＣ提供的４株阴性细胞，阳性率分别为４７．４％，３６．８％，４２．１％，三种方法检测１８株动物细胞结果一致（１２株阴性，６株阳性）．３株ＰＣＲ检测阳性，其他方法检测阴性；Ｖｅｒｏ４１ＤＮＡ荧光染色法检测阳性，其他方法检测阴性：Ｊ－１１１ＰＣＲ检测阴性，其他方法检测阳性。ＰＣＲ法与常规法相比，灵敏度提高?

细胞培养物中污染支原体的去除

经小鼠体内、体外加用不同的抗菌素处理及克隆的方法处理细胞污染的支原体，三株细胞经两次、一株细胞经三次处理后，经培养法、ＤＮＡ染色法及ＰＣＲ法检查支原体污染均为阴性，并证明对其抗体分泌没有任何影响，不失为一个理想的去除支原体的方法，从而使有重要应用价值的支原体污染细胞的应用成为可能。

人体组织库的建立及其在抗体组织特异性检测中的应用

共收集54种正常人体组织及人体肿瘤组织，建立人体组织库及适合本实验室的LSAB免疫组化方法，并用于6种抗体的组织特异性研究。实验表明，此组织库组织类型多，容量大，各组织的质量符合实验要求，能够用于各种抗体的组织特异性检测，同时证明所检6种抗体均有较强的特异性。

淋病奈瑟氏菌培养基和保护剂的研究

本文报告了淋病奈瑟氏菌生长培养基、糖发酵生化培养基、保存培养基和真空干燥保护剂的研究。应用27株淋病奈瑟氏菌进行试验表明,全部菌株在特殊蛋白胨血琼脂和多种蛋白胨血琼脂上24小时生长良好;26株菌在NGCM-1生化培养基中发酵葡萄糖产酸(96.3％),保存培养基在27℃可保存菌种30天左右,10％脱脂奶粉作为保护剂真空干燥菌种可保存20个月以上。

中国肺炎链球菌分型及其感染的研究

肺炎链球菌是引起肺炎、脑膜炎、中耳炎、心内膜炎、关节炎。以及化脓性疾患的重要病原菌,对人群的健康有严重的危害性,尤其对老年人及婴幼儿危害更大,病死率较高。耐药菌株的不断出现,已成为临床治疗中十分棘手的问题。近年来世界卫生组织及许多国家对防治肺炎链球菌的感染极为关注,并研制成功了肺炎链球菌多糖菌苗,世界卫生组织还专门组织进行了全球性肺炎链球菌的菌型监测。

46株分泌单抗杂交瘤细胞株支原体污染的检测

４６株分泌单抗杂交瘤细胞株支原体污染的检测李秀华，郭玮，高光，范学祥，吕秀华，袁曾麟，尹红章，李德富（中国药品生物制品检定所，北京１０００５０）细胞培养物感染支原体是一个十分严重的问题，尤其是对有重要应用价值的杂交瘤细胞，往往造成细胞生长缓慢、胞浆颗...

小鼠抗—HBs的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定

用纯化的小鼠单克隆抗-HBs(Ab1)免疫同系BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓细胞融合,获得两株(MA1、MA3)持续分泌抗-HBs的单克隆抗独特型抗体(抗-1d,Ab2)杂交瘤细胞系。对MA3做了较全面的鉴定。MA3的Ig类型为IgM,核型分析结果染色体数为106条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,MA3所分泌的Ab2既能被不同来源的抗-HBs所中和,又能被HBsAg所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的MA3 IgM免疫同系小鼠,诱导出具有抗-HBs活性的抗-抗-独特型抗体(Ab3)。因此认为MA3所分泌单克隆抗体(McAb),可模似HBsAg,具有类似HBsAg的免疫原性,是一种带有HBsAg表位内影像的抗-HBs的单克隆抗-1d。

23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗的研制

目的 研制 2 3价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗。方法 采用 1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、2 0、2 2F、2 3F和 33F等 2 3型肺炎链球菌进行大罐培养和荚膜多糖的纯化 ,制备出 2 3价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗。结果 经检定其主要质量指标均符合欧洲药典 (1997年版 )要求。结论 已建立起较为成熟的培养及纯化工艺 。

流感嗜血杆菌结合疫苗安全性及免疫原性考察

作者对48名6～12月龄的婴幼儿皮下接种了法国流感嗜血杆菌－破伤风类毒素结合疫苗（ACT－Hib），考察疫苗的安全性及免疫原性。全程接种2次，间隔1个月。接种剂量为10μg／0．5ml／人。接种后人体反应轻微，48人中仅1人（2．1％）有局部红晕，2人体温升至37．6和38．5℃，48h后全部恢复正常。免后1个月抗体水平明显提高，100％受试者抗体含量≥0．15μg／ml，GMT由免前的0.087μg／ml提高至18．56μg／ml。第2针免后1个月，80．9％的受试者抗体含量≥10μg／ml，GMT为22.52μg／ml。

23价肺炎球菌多糖疫苗临床试验

目的评价23价肺炎球菌多糖疫苗的安全性和免疫原性。方法23价肺炎球菌多糖疫苗免疫不同年龄组人群,观察局部及全身反应,并检测血清抗体滴度。结果试验组接种后出现的注射部位总疼痛率为30.8%。2人注射部位出现弱、中反应的红肿,反应率为0.23%。全身反应主要为弱反应,反应率为0.6%。试验组免后抗体平均滴度4.03,阳性对照组为4.15;抗体阳转率试验组为86.4%,阳性对照组为72.5%。试验组与阳性对照组全身发热和局部疼痛反应差异无统计学意义。试验组与阳性对照组的免疫原性相近。结论23价肺炎球菌多糖疫苗是安全有效的。

b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗的研制

［摘 要］目的 研制b型流感嗜血杆菌（Hib）结合疫苗并考察其稳定性。方法 用溴化氰活化提纯Hib荚膜多糖抗原，通过己二酰肼（ADH）与破伤风类毒素（TT）蛋白共价结合，制备b型流感嗜血杆菌结合物，并考察放置在2～8℃及室温9个月和37℃ 3个月后的稳定性。结果 用本工艺提取的多糖，合成的多糖衍生物，多糖蛋白结合物的化学组成及结构特性均达到了国外同类产品的质控要求。结合物在2～8℃及室温放置9个月后基本无降解。结论 为临床评价Hib结合疫苗的安全性和保护效果及确定效期提供了实验基础。

淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒的检定和应用

应用新研制的淋球菌培养基（WGC）与意大利GC（IGC）和MTM培养基对照进行淋球菌生长试验，其敏感性基本一致。用已知菌株对氧化酶试纸和奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒进行检定，亦呈现正确反应。应用WGC与IGC培养基培养9o3例临床标本，培养物经革兰氏染色和氧化酶试纸作初步检定，IGC卜淋球菌阳性402例，WGC上同时田位400例，两者符合率为99．5％，WGC上400例中，有366例用快速糖试验作证实试验，确诊为淋球菌者有364例，两者符合率为99．45％。