温阳-能量-免疫轴理论的构建与价值分析

阳气充盈密固,阴阳得以平衡。阳气具有温煦、推动、兴奋等功效,与当前研究热点能量代谢与免疫功能相符。王冰提出用温热的药物或治法振奋机体机能,以消除机体功能向下的趋势,奠定了温阳-能量-免疫轴理论的中医理论基础。结合现代医学方法,深入探究阳气、能量代谢与免疫三者之间的内在关联,成就了温阳-能量-免疫轴理论的现代医学理论基础。温阳-能量-免疫轴理论,势必从阳气的物质基础、阳虚证的免疫代谢学特征、温阳之法的分子机制、从阳治未病等方面为防病治病提供科学的指导和参考价值。

萸连丸对DSS诱导结肠炎小鼠Th17/Treg平衡的调控机制

目的探讨萸连丸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)疗效和Treg/Th17平衡的调控机制。方法将BALB/c雄性小鼠随机分为正常组、模型组、萸连丸组和美沙拉嗪给药组,每组10只。除正常组外,其余各组采用“2.5%DSS(第1~7天)——自由饮水(第8~14天)——2.5%DSS(第15~21天)”方法复制慢性复发性结肠炎。同时造模第8天开始予以萸连丸、美沙拉嗪肠溶片连续灌胃14d。造模第22天观察小鼠部分形态指标,采用流式细胞术测定结肠组织中CD4+Foxp3+、CD4+IL17A+细胞水平,采用蛋白印迹法检测结肠组织中检测低氧诱导因子(HIF-1a)、驱动蛋白家族成员2A(KIF2A)、BCL-2同源结构域蛋白NOXA、蛋白磷酸酶2a(PP2A)表达水平。结果与模型组相比,萸连丸组小鼠体质量明显增加,结肠长度明显增加,肠重指数明显降低;病理提示结肠组织中少量炎性细胞浸润,溃疡基本修复;结肠组织中CD4+IL17A+细胞水平显著下降,CD4+Foxp3+细胞水平显著升高;结肠组织中HIF-1a、PP2A表达水平显著降低,KIF2A表达水平显著升高。结论萸连丸可通过Th17/Treg细胞平衡而有效治疗DSS诱导小鼠慢性复发性结肠炎,其作用机制涉及HIF-1a、PP2A表达水平降低和KIF2A表达水平升高。

寒热错杂病机实质初探

关于寒热错杂病机概述,张仲景以“阴阳气不相顺接”为基本病机,而阴阳失调的关键在于气机失调。李东垣以“脾胃虚弱”“枢轴不利”为发病基础,强调“元气”和“阴火”的对立关系是导致寒热错杂主症的病理机制。同时二者均以“寒热并用、辛开苦降”之法重塑阴阳或气火的平衡,反映出张仲景和李东垣对寒热错杂病机的认识存在相似之处。随着代谢重编程、病理性代谢产物的“元气阴火观”及能量信号、免疫调控的“阴阳观”相继提出,以客观物质基础阐述寒热错杂病机内涵成为可能。文章从寒热错杂主症为出发,探析阴阳、脾胃、气火、能量代谢、免疫调节在寒热错杂证中的可能机制,以期为脾胃病寒热错杂病机实质研究提供思路。

基于“病证方药”结合探析左金丸对寒热错杂证溃疡性结肠炎的治疗价值

基于传统中医药理论和现代科学技术的“病证方药”结合研究有利于诠释经典方剂的配伍规律及作用机制。文章坚持古为今用,以“病证结合”“方证对应”“阴火理论”“寒热并用”“辛开苦降”等中医药理论为指导,从现代病理药理研究角度出发,探析左金丸对寒热错杂证溃疡性结肠炎的治疗价值,以期揭示左金丸治疗寒热错杂证溃疡性结肠炎的可能机制,也为经典方剂的二次开发提供思路。

四神丸对DSS诱导的结肠炎小鼠巨噬细胞极化的调控机制

目的 探讨四神丸(SSP)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导结肠炎小鼠巨噬细胞极化的调控机制。方法 将C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组、模型组、四神丸组和美沙拉嗪组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠采用“2.5%DSS(第1~7天)——自由饮水(第8~14天)——2.5%DSS(第15~21天)”方法复制慢性结肠炎。同时造模第8天开始予以左金丸、美沙拉唑肠溶片灌胃处理,连续14天。造模第22天,观察小鼠一般情况及结肠病理学变化,采用流式细胞术测定结肠组织中CD11b^(+)F4/80^(+)细胞的MHC-II^(+)、iNOS^(+)、CD163^(+)、CD209^(+)及Ki-67^(+)表达水平,蛋白印迹法检测结肠组织中己糖激酶2(HK2)、6-磷酸果糖激酶1(PFK1)和M2型丙酮酸激酶(PKM2)蛋白表达水平。结果 与模型组比较,SSP可有效改善DSS诱导结肠炎小鼠体重变化率、疾病活动指数、结肠长度、肠重指数和黏膜镜下评分(P<0.05,P<0.01);降低结肠炎小鼠结肠组织中CD11b^(+)F4/80^(+)Ki-67^(+)、CD11b^(+)F4/80^(+)MHC-II^(+)、CD11b^(+)F4/80^(+)iNOS^(+)的表达水平(P<0.05,P<0.01),提升CD11b^(+)F4/80^(+)CD163^(+)、CD11b^(+)F4/80^(+)CD209^(+)的表达水平(P<0.05,P<0.01);同时伴见结肠炎小鼠结肠组织中HK2、PFK1和PKM2蛋白表达量明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论 四神丸能够通过重塑巨噬细胞M1/M2的平衡而有效治疗DSS诱导的小鼠慢性结肠炎,其作用机制与HK2、PFK1和PKM2信号介导的糖酵解受到抑制有关。

四神丸对脾肾阳虚型结肠炎小鼠树突状细胞表面共刺激分子的调控作用

目的探讨四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)小鼠树突状细胞表面共刺激分子的调控作用。方法将BALB/c雄性小鼠随机均分为正常组、正常小鼠加用四神丸组(5g·kg^(-1))、模型组、四神丸组(5g·kg^(-1)),每组10只。除正常组和正常小鼠加用四神丸组外,其余各组小鼠采用葡聚糖硫酸钠(DSS)+肌肉注射氢化可的松+大黄灌胃法建立脾肾阳虚型结肠炎小鼠模型。第15天按照相应剂量灌胃给药,每日1次,连续给药7 d。每天称小鼠体质量并观察小鼠的一般情况变化,采集新鲜的血液,提取血清,检测T3、T4、T指标;测定小鼠结肠重量、结肠长度、计算结肠和脾脏的质量指数;采用HE染色法进行结肠组织病理学观察;采用流式细胞术检测小鼠脾脏树突状细胞CD40,CD24,CD135,CD107b,CD115,CCR6,CD172a,F4/80的表达;Western Bloting方法检测小鼠结肠组织内PI3K,Akt,P-Akt,mTOR,p-mTOR,Raptor,Rictor蛋白表达。结果与模型组比较,四神丸组小鼠体质量增加,DAI评分下降,结肠重量,单位结肠长度,肠重指数降低,结肠长度恢复,结肠组织PI3K,Akt,P-Akt,mTOR,p-mTOR,Raptor,Rictor蛋白表达均明显下降(P<0.01);树突状细胞表面共刺激分子CD40,CD24,CD135,CD107b,CD115,CCR6表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01),CD172a,F4/80表达水平显著升高(P<0.01)。结论四神丸有效治疗脾肾阳虚型UC小鼠可能是与调节树突状细胞表面共刺激分子的水平有关。