LY294002对人胃腺癌细胞株BGC-823糖酵解水平的影响及其机制探讨

背景:有氧糖酵解是肿瘤细胞的特征性表型之一,靶向糖酵解有望成为一种有效的肿瘤治疗策略。M2型丙酮酸激酶(PKM2)在肿瘤组织中呈高表达,参与肿瘤细胞的有氧糖酵解。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是调控肿瘤细胞糖酵解相关基因表达的重要转录因子,而PI3K信号在肿瘤细胞中可上调HIF-1α表达。目的:探讨PI3K特异性抑制剂LY294002对人胃腺癌细胞增殖和糖酵解水平的影响及其可能机制。方法:以不同浓度LY294002(10～100μmol/L)在不同条件下(常氧或缺氧)处理人胃腺癌细胞株BGC-823,CCK-8实验和流式细胞分析检测细胞增殖和细胞凋亡,蛋白质印迹法检测p-Akt、p-mTOR、HIF-1α、PKM2表达,比色法检测反映糖酵解水平的胞内乳酸脱氢酶活性和胞外乳酸浓度。结果:LY294002可呈浓度和时间依赖性地抑制BGC-823细胞增殖,在较高浓度时可诱导细胞早期凋亡。LY294002可呈浓度依赖性地抑制p-Akt、p-mTOR、HIF-1α表达,在较高浓度时可抑制PKM2表达,同时降低糖酵解水平。缺氧诱导可消除LY294002对HIF-1α、PKM2表达和糖酵解水平的抑制作用。结论:LY294002可通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制人胃腺癌细胞增殖及其糖酵解水平,而HIF-1α介导了糖酵解的抑制过程。

pEGFP-C1-STAT3真核表达载体的构建及其在SGC7901细胞株中对Snail表达的影响

目的研究信号转导与转录激活因子3(STAT3)基因转染人胃癌细胞株SGC7901后,对锌指转录因子Snail1(Snail)及切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ER-CC1)表达的影响。方法利用基因重组技术构建重组pEGFP-C1-STAT3真核表达载体;脂质体介导转染技术转染胃癌细胞株SGC7901,荧光显微镜、Western blot检测转染后SGC7901细胞株中STAT3、pSTAT3、Snail及ERCC1的表达,流式细胞仪检测转染后顺铂处理下细胞凋亡率。结果重组质粒经HindⅢ、SacⅡ双酶切测序与STAT3基因序列一致;利用脂质体介导将pEGFP-C1-STAT3重组质粒转染SGC7901细胞株,获得了STAT3基因表达,Western blot检测pSTAT3、Snail、ERCC1表达增高,具有统计学意义,流式细胞术分析显示转染重组质粒pEGFP-C1-STAT3后,细胞在顺铂作用下的早期凋亡率减低。结论成功构建STAT3重组质粒并转入中分化胃腺癌细胞株SGC7901后,细胞Snail及ERCC1显著增高,细胞对顺铂敏感度下降。

内镜支架引流治疗肝细胞肝癌所致肝门部胆管恶性梗阻的疗效分析

目的评估无法手术切除的肝细胞肝癌所致肝门部胆管恶性梗阻患者的内镜支架引流疗效。方法回顾性分析2012年1月—2019年1月在海军军医大学第三附属医院因无法手术切除的肝细胞肝癌导致肝门部胆管恶性梗阻而行内镜支架引流的106例患者的临床资料。根据置入支架类型的不同,分为金属支架组(30例)和塑料支架组(76例)。观察指标包括临床成功率、并发症发生率、支架通畅期及总体生存时间。采用多因素Cox回归模型分析患者支架通畅期和总体生存时间的独立预测因素。结果患者的总体临床成功率为67.9%(72/106),术后胆管炎发生率为29.2%(31/106)。金属支架组与塑料支架组的临床成功率分别为93.3%(28/30)和57.9%(44/76)(χ^(2)=12.40,P<0.001),术后胆管炎发生率分别为13.3%(4/30)和35.5%(27/76)(χ^(2)=5.12,P=0.024)。中位支架通畅期为5.2(95%CI:3.7~6.0)个月,中位总体生存时间为3.0(95%CI:2.5~3.7)个月。多因素Cox回归分析显示肝脏引流体积<30%是支架通畅期的独立预测因素(HR=2.12,95%CI:1.01~4.46,P=0.048)。BismuthⅣ型(HR=2.06,95%CI:1.12~3.77,P=0.020)、Child-Pugh C级(HR=4.09,95%CI:2.00~8.39,P<0.001)、塑料支架(HR=1.87,95%CI:1.21~2.90,P=0.005)是总体生存时间的独立预测因素。结论肝细胞肝癌一旦累及肝门部胆管预后不良。与塑料支架相比,金属支架引流在临床成功率、术后胆管炎发生率方面均具有一定优势。肝脏引流体积<30%是支架通畅期的独立预测因素,而BismuthⅣ型、Child-Pugh C级、塑料支架为总体生存时间的独立预测因素。

社区2型糖尿病患者低血糖发生风险的病例对照研究

【目的】探究社区2型糖尿病患者低血糖发生的危险因素,为减少2型糖尿病低血糖的发生提供依据。【方法】以2018年在同济大学医学院附属安亭镇社区卫生服务中心糖尿病小屋建档、既往无低血糖病史的2型糖尿病患者914例为研究对象,其中纳入研究后1年内发生低血糖≥1次的糖尿病患者196例为病例组,同期未发生低血糖事件的718例患者为对照组,进行病例对照研究,调查2组患者的基本情况、疾病史、用药情况、生活习惯及相关危险因素等。采用多因素logistic回归分析糖尿病患者发生低血糖的危险因素。【结果】多因素回归分析显示,冠心病史[标化比值比(aOR)=2.077,95%CI:1.293~3.337)]、肾脏病史(aOR=4.775,95%CI:1.537~14.830)及胰岛素使用史(aOR=1.765,95%CI:1.147~2.716)是低血糖发生的危险因素,使用血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)(aOR=0.127,95%CI:0.044~0.366)及β-受体阻滞剂(aOR=0.271,95%CI:0.119~0.616)则为糖尿病患者发生低血糖的保护因素。【结论】社区2型糖尿病患者存在一定比例的低血糖发生风险。既往冠心病史、肾脏病史及胰岛素的使用是患者低血糖发生风险升高的独立危险因素,社区全科医生应给予更多关注。

射频消融术联合内镜金属支架治疗无法手术切除的胆管癌患者44例的疗效观察

目的探索射频消融术(RFA)联合内镜金属支架治疗无法手术切除的胆管癌患者的疗效。方法回顾性收集2012年1月3日至2019年6月30日在海军军医大学第三附属医院内镜科行RFA联合内镜金属支架治疗无法手术切除的44例胆管癌患者的临床资料,包括年龄、性别、胆管癌部位(肝门部胆管癌和远端胆管癌)等。结合随访情况进行术后评估,包括临床成功率、术后并发症发生率、支架通畅期和总生存时间(OS)。采用Kaplan-Meier法和log-rank检验分析肝门部胆管癌与远端胆管癌患者OS的差异。统计学方法采用Mann-WhitneyU检验。结果 44例胆管癌患者的年龄为(70.3±11.6)岁,男性20例(45.5%),肝门部胆管癌和远端胆管癌患者各22例(50.0%)。44例患者的临床成功率为93.2%(41/44)。共有5例(11.4%)患者出现了术后并发症,均通过相应治疗好转。44例患者的中位随访时间(范围)为9.2个月(3.1~57.6个月),中位支架通畅期(范围)为7.0个月(5.8~8.2个月),共有32例(72.7%)患者死亡,中位OS(范围)为10.9个月(9.0~12.8个月)。肝门部胆管癌患者的中位OS(范围)为7.8个月(4.6~11.0个月),远端胆管癌患者的中位OS(范围)为12.5个月(5.7~19.4个月),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RFA联合内镜金属支架治疗无法手术切除的胆管癌患者是安全、有效的。