牛蒡子苷元对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用及其机制

目的观察牛蒡子苷元(ATG)对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用,并探讨其机制。方法将30只Wistar大鼠随机分为3组各10只,实验组和模型组均采用豚鼠全脊髓匀浆和完全弗氏佐剂混合而成的抗原乳剂诱导制备EAE模型,正常组皮下注射等量生理盐水与完全弗氏佐剂制备而成的空白乳剂。皮下注射后当日起,实验组大鼠每日腹腔注射3 mg/kg的ATG溶液,共14 d;正常组与模型组注射等量生理盐水。皮下注射后当日至第14 d,每日采用神经功能学评分法评价大鼠神经功能。皮下注射第14 d处死大鼠,HE染色观察脑和脊髓组织组织病理学,免疫荧光染色检测脊髓组织抗离子钙接头蛋白分子1(Iba1)相对荧光强度,RT-PCR法检测脊髓组织IL-1β、IL-6、TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA,Western blotting法检测脊髓组织Nod样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关点样蛋白(ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、血红素氧合酶-1(HO-1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白,分光光度法检测脊髓组织丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)。结果与模型组比较,实验组大鼠神经功能评分降低(P<0.05)。与模型组比较,实验组脑、脊髓组织中炎症细胞浸润明显减少,活化的小胶质细胞数量降低(P均<0.05)。与模型组比较,实验组脊髓组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1 mRNA相对表达量降低,NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白相对表达量降低,MDA含量降低,GSH含量升高,Nrf2、HO-1相对表达量升高(P均<0.05)。结论ATG对大鼠EAE有治疗作用,机制可能与降低NLRP3/ASC/Caspase-1炎症体通路介导的神经炎症,活化Nrf2/HO-1信号通路介导的抗氧化作用有关。