依托咪酯对脂多糖诱导人气道平滑肌细胞炎性损伤的改善作用及其机制

目的观察依托咪酯对脂多糖(LPS)诱导人气道平滑肌细胞(ASMCs)炎性损伤的改善作用,并探讨其机制。方法取对数生长期的人ASMCs分为对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组。对照组常规培养ASMCs;LPS组加入500 ng/mL的LPS;依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组加入500 ng/mL的LPS后,再分别加入5µg/mL、10µg/mL、20µg/mL的依托咪酯。各组细胞继续培养72 h,采用ELISA法检测细胞中炎性因子IL-2、IL-6、TNF-α,采用MTT法测算细胞存活率,采用流式细胞法检测细胞凋亡率,采用荧光定量PCR法检测细胞中转化生长因子(TGF)-β1、Smad家族蛋白3(Smad3)mRNA,采用蛋白印迹法检测细胞中TGF-β1、Smad3蛋白。结果与对照组相比,LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中IL-2、IL-6、TNF-α水平均升高(P均<0.05);与LPS组相比,依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中IL-2、IL-6、TNF-α水平均降低(P均<0.05),且依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组低于依托咪酯低浓度组(P均<0.05),依托咪酯高浓度组低于依托咪酯中浓度组(P<0.05)。对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞存活率分别为100.00%、40.08%±6.04%、52.87%±6.21%、66.48%±7.10%、81.26%±9.54%,组间相比,P均<0.05。对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞凋亡率分别为4.40%±1.09%、25.16%±5.07%、19.77%±4.03%、14.71%±2.25%、10.05%±2.05%,组间相比,P均<0.05。与对照组相比,LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量、Smad3 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与LPS组相比,依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量、Smad3 mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),且依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组低于依托咪酯低浓度组(P均<0.05),依托咪酯高浓度组低于依托咪酯中浓度组(P<0.05)。结论5µg/mL、10µg/mL、20µg/mL的依托咪酯对LPS诱导人ASMCs炎性损伤均具有改善作用,可升高细胞存活率、降低细胞凋亡率,且20µg/mL依托咪酯的的改善作用最强。依托咪酯对LPS诱导人ASMCs炎性损伤的改善作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路的激活有关。

认缴资本制下的催缴出资制度

认缴资本制在其运行过程中出现了许多弊端,尤其是对债权人保护上,我国公司法专家学者提出构建股东出资义务加速到期制度,但是因理论上和实务态度都对该制度的正当性存疑而陷入困境。在我国建立健全催缴出资制度具有科学合理性和现实必要性,其能在维护公司自治性的前提下兼顾公司、股东与债权人三者利益。此外,在具体制度构建上我国公司法要注意区分内部催缴和外部催缴。

“20+20”课堂模式下提高学生数学运算能力——以“极坐标与参数方程”为例

数学运算能力是学生学习能力要求之一,数形结合思想是学生解题重要方法之一,为了提升学生的综合运算能力,教师把教学的重难点通过教学设计来体现,帮助学生学会反思、归纳。

林林的兔子

林林有了一对可爱的小兔子，就像有了一个宝贝。这对小兔子看起来非常干净，雪白的毛上没有一点杂色，尖而长的耳朵像两片叶子，轻轻一扇，仿佛就把好听的话都扇到心里面去了。可是这对兔子也真的浪费了林林很多时间。她每天一回家就要带它们去草地吃草，为了选到合适的草地，林林常常要跑很多地方。当她打开小笼子让小兔子吃草的时候，又会担心草不干净，担心小兔子吃不惯……这样折腾到回家常常很晚了，才开始写作业。