基于数字PCR技术的Y染色体微缺失检测方法开发

为验证数字PCR(dPCR)技术在Y染色体微缺失检测中应用的可行性,以无精子区域(Azoospermia factor,AZF)中的AZFa,AZFb及AZFc为靶标,选择特异性引物并验证其有效性,通过退火温度优化去除可能的非特异性扩增,最终通过已知缺失类型的临床样本验证检测方法的灵敏度及准确性。优化后的dPCR方法检测样本的浓度可低至0.1 mg·L^(-1),该值远低于常规qPCR的检测限(1 mg·L^(-1)),并能够准确反映Y染色体的缺失状况。因此dPCR可准确反映样本中的Y染色体微缺失状况,可开发成为男性不育症及其他生殖诊断中的重要技术。

一种基于细胞计数技术的羊肚菌单孢子菌种分离方法

为了获取羊肚菌(Morchella esculenta)单孢子菌种,利用经无菌处理的羊肚菌孢子悬液,经细胞计数板计数后稀释至每100微升含2个、1个、0.5个孢子,分别加入96孔细胞培养板培养孔中,镜检观察各孔中的孢子数并标记出含单个孢子的培养孔。室温下培养,待单孢子孔中孢子萌发的菌丝生长至培养孔底部边缘时,将菌丝转移至PDA平板中培养,对培养得到的菌丝进行ELISA鉴定,确定分离得到羊肚菌单孢子菌种,然后将菌种进行编号,扩大培养并保存。利用该方法分离得到3株羊肚菌单孢子菌种,分别编号为LG-01、LG-02、LG-03。