RT-PCR方法检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因类型

目的 :提高 RT- PCR检测慢性粒细胞白血病 (CML)残留白血病细胞的敏感性 ,探讨最适逆转录酶用量、最适退火及延伸温度以及 PCR周期数 ,确定 bcr/ abl的融合类型 ,并研究其与预后的关系。方法 :通过改变 PCR条件 ,将常规用量的逆转录酶减少到常规的 1/ 4 (5 U) ,退火温度由原来的 5 0℃增加至 6 0℃ ,反应周期数由原来的 30周期增加到 4 5周期 ,检测临床 16 4例 CML 患者标本。结果 :可使残留白血病细胞的检出率由原来的 10 - 4提高至 10 - 5～10 - 6。 15 5例 Ph染色体阳性的患者中发现 bcr/ abl融合基因类型 ,其中 b3/ a2 型 78例 ,b2 / a2 型 5 4例 ,b3/ a2 和 b2 / a2 两型均有者为 2 3例 ;9例 Ph染色体阴性病例中 ,b3/ a2 型 1例 ,b2 / a2 型 3例 ,两型均有 1例 ,阴性 4例 (即 Ph- bcr-CML )。结论 :几乎所有 CML患者都有 bcr/ abl融合基因 ,并存在不同类型 ,有少部分患者体内同时存在两类不同嵌合体的白血病细胞 ,即两种不同的突变细胞株 ,预示着患者预后差。

高能聚焦超声治疗胰腺癌40例

为了观察FEP -BY0 1型肿瘤超声治疗机治疗胰腺癌的安全性及近期疗效 ,应用FEP -BY0 1型肿瘤超声治疗机治疗胰腺癌 40例。结果表明 :完全缓解率 (CR) 2 0 % ( 8/4 0 ) ;部分缓解率 (PR) 70 % ( 2 8/4 0 ) ;有效率 90 % (CR+PR) ;无效 (PD) 10 % ( 4/4 0 )。并且能明显缓解癌性疼痛 ,有效率达 80 % ( 3 2 /4 0 )。所有病例治疗时均未出现胰液漏、腹腔内出血、胃肠道穿孔、皮肤烧伤等并发症。

双标记原位杂交法检测间期细胞BCR/ABL融合基因

目的 :应用双标记原位杂交方法检测 BCR/ ABL融合基因。方法 :BCR基因探针用地高辛标记 ,碱性磷酸酶显色 ;ABL基因用3 H- d ATP标记 ,核子乳胶放射自显影。结果 :检测 9例初治的慢性粒细胞白血病 ( CML)病人均为阳性 ,阳性细胞比例为 93% ;检测 CML来源的 K5 62细胞株阳性细胞占 98.8% ;正常人假阳性率为 0 .75 %。结论 :该方法简便、快速 ,适用于

基因工程干扰素对慢性粒细胞白血病骨髓细胞DNA损伤修复的影响

以姊妹染色体互换为观察指标．观察了干扰素对慢性粒细胞白血病骨髓细胞DNA损伤修复的影响，探讨了干扰素对慢性粒细胞白血病的治疗机理，对指导临床治疗具有重要的意义。

干扰素α-2b联合红细胞生成素对骨髓纤维化红系祖细胞作用的体外研究

目的 :研究干扰素 α- 2 b( IFN- α2 b)联合红细胞生成素 ( EPO)对骨髓纤维化 ( MF)红系祖细胞 ( CFU- E)的作用。方法 :采用细胞体外培养法对 2 0例 MF患者 CFU- E进行观察。结果 :单用IFN-α2 b对 MF患者 CFU- E有明显促增殖作用 ;与 EPO联合时其促增殖作用更加明显 ,使 MF患者 CFU- E接近正常对照组。结论 :IFN-α2 b联合 EPO对 MF患者红系祖细胞具有显著促增殖作用 。

bcr/abl反义寡聚脱氧核苷酸抑制慢性粒细胞白血病细胞生长的研究

目的:研究bcr/ abl基因的反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASON)对K5 6 2细胞生长的影响。方法:根据bcr/ abl基因类型(b3/ a2 )的c DNA序列分析,以其m RNA融合区的18个核苷酸为作用靶序列,人工合成了18聚ASON片段,同时合成18聚无义ASON片段,作为序列特异性对照。用ASON和无义ASON片段与K5 6 2细胞共同培养,同时设置空白对照组,作用一定时间后分别测定细胞动力学、3H- Td R掺入率、bcr/ abl m RNA和P2 10蛋白的表达。结果:3.5～30 .0 μmol·L- 1的ASON对K5 6 2细胞生长有不同程度的抑制作用,ASON浓度低于10 .0 μmol·L- 1时抑制作用很小,大于10 .0 μm ol·L- 1时抑制作用显著,这种作用有浓度、时间依赖关系,而无义ASON与空白对照组比较差异无显著性(P<0 .0 5 )。同时发现ASON使细胞的3H - Td R掺入率下降,bcr/ abl m RNA及P2 10蛋白的表达下降。结论:ASON的抑制作用是从基因水平上封闭了bcr/ abl m RNA转录及P2 10蛋白的翻译,抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡。ASON对慢性粒细胞白血病(CML )细胞有抑制作用。

老年胰腺癌患者外周血CD_(44)表达及其临床意义

目的探讨黏附分子CD44在老年胰腺癌外周血淋巴细胞中的表达及其意义。方法用流式细胞检测法(FCM)测定60例老年胰腺癌患者外周血中CD44水平并与正常人及胰腺炎患者进行相互比较,对照分析手术前后或热疗前后CD44的变化。结果胰腺癌组外周血CD44含量为564.51±16.64,明显高于正常对照组(382.46±15.28,P<0.01)及慢性胰腺炎组(396.37±16.32,P<0.01),且手术前或热疗前胰腺癌患者外周血CD44的表达也明显高于手术后或热疗后(P<0.01)。亦发现CD44的表达水平与患者的临床分期和组织学分级有关(P<0.01)。结论外周血淋巴细胞中CD44含量可作为老年胰腺癌诊断的参考指标,其表达水平的高低可判定临床疗效及预后。

EGCG对口腔鳞癌细胞增殖及信号传导通路的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对不同的人鳞癌细胞株增殖及信号传导通路的影响,并观察了EGCG对人口腔上皮癌移植瘤的抑制效应。方法体外培养人CAL-27、SCC-25、KB细胞株,应用MTT法检测EGCG对细胞增殖的影响,筛选出敏感细胞株。应用流式细胞术检测EGCG对CAL-27细胞细胞周期的影响,应用Protein Pathway Array技术检测EGCG对CAL-27细胞株蛋白表达的影响。KB细胞接种裸鼠建立人口腔上皮癌移植瘤模型,随机分为EGCG组和对照组,连续给药4周,测量移植瘤体积及质量,计算裸鼠肿瘤抑制率。结果 EGCG对多种类型的人口腔鳞癌细胞系均有抑制作用,并呈剂量依赖性。不同的细胞系对EGCG的敏感性不同,EGCG对CAL-27的抑制作用最强。流式细胞术显示EGCG对CAL-27细胞周期的影响主要是引起S期和G2/M期阻滞,G0/G1期细胞减少。应用Protein Pathway Array技术共分析了107种蛋白,应用EGCG处理CAL-27细胞后共有15种蛋白发生了明显变化。结论 EGCG能够抑制多种类型人口腔鳞癌细胞株的增殖,敏感细胞株为CAL-27。EGCG主要影响CAL-27细胞的EGFR和Notch信号传导通路,并通过以上信号传导通路影响细胞周期相关蛋白表达水平的变化,导致细胞周期S期和G2/M期阻滞。动物实验表明EGCG能明显抑制人类口腔上皮癌移植瘤的增长。

海参糖胺聚糖的提取及抗肿瘤活性的研究

选取提取温度、时间、料液比和NaOH浓度作为考察因子,在单因素实验的基础上,进行了均匀设计实验,采用逐步回归方法建立了具有良好预测性能的碱浸提工艺条件的数学模型,通过Matlab7.0中的fmincon软件确定了海参糖胺聚糖最佳的提取工艺条件。MTT比色法考察了糖胺聚糖对黑色素瘤B16细胞抑制作用的生物活性。实验结果表明:提取温度对海参糖胺聚糖得率的影响显著,最优提取工艺条件为:提取温度85℃,提取时间10min,料液比1∶55(g∶mL),NaOH浓度10%,在该最佳工艺条件下进行验证实验,糖胺聚糖的得率可达36.08%,与模型的预测值36.01%基本一致,表明模型可较好地预测海参糖胺聚糖的得率。糖胺聚糖对黑色素瘤细胞作用72h,IC50为0.13mg/mL,具有显著的抗肿瘤活性。

急性白血病患者多重耐药基因检测的临床意义

目的 :结合临床化疗效果探讨白血病多重耐药 ( mdr)的诊断方法。方法 :采用流式细胞术检测白血病细胞内药物浓度和原位杂交技术检测白血病 mdr基因的表达。结果 :1 2例难治及复发患者柔红霉素 ( DNR)的平均浓度为 ( 4 4.80± 7.74) %,而 1 0例初治完全缓解患者 DNR的浓度为( 80 .0 1± 2 .1 0 ) %,两组比较差异有显著性 ( P<0 .0 1 ) ,且 1 2例难治及复发患者 mdr1基因表达结果除 4名阴性外 ,其他均为阳性 ,而 1 0例初治完全缓解患者 mdr1基因表达均为阴性。结论 :两种检测方法联合检测白血病 mdr,能初步筛选急性白血病 mdr的类型 。

晚期黑色素瘤治疗进展

恶性黑色素瘤(MM)是起源于神经嵴黑色素细胞的高度恶性肿瘤,其发病率占全部恶性肿瘤的1%~3%,60%是由黑痣恶变而来,同时也和遗传、基因突变等因素相关。其恶性程度高,易发生远处转移,预后较差。在我国,黑色素瘤发病率不断增高,每年新发病例已超过10 000例。多数早期患者通过手术能够得到治愈,但对于进展期患者,化疗通常效果不佳,因而寻找新的治疗策略尤为重要。

全血细胞减少症病因研究进展

全血细胞减少症是常见的临床表现,造血系统疾病与非造血系统疾病均可引起,病种繁多,病因复杂。本文对全血细胞减少症的病因进行了分类,从临床特点、鉴别诊断等方面进行了系统分析,并对各疾病的免疫机制做了重点阐述。同时对免疫相关性全血细胞减少症的研究现状进行了详细的阐述,对提高全血细胞减少症的病因诊断,避免漏诊、误诊有重要意义。

干扰素治疗慢性粒细胞白血病微量残留病疗效分析

应用染色体技术和聚合酶链反应方法检测干扰素治疗慢性粒细胞白血病完全缓解后微量残留病28例的疗效。发现治疗后2例Ph'染色体阴转，长期应用干扰素组Ph'染色体阳性率下降，1例bcr／ab1mRNA转为阴性。而短期应用干扰素组无Ph'染色体变化，或bcr／ab1mRNA阴转。按目前我们应用干扰素的剂量、疗程，很难达到有效清除bcr／ab1mRNA阳性细胞的目的。

放疗与榄香烯注射液联合治疗肺癌的效果评价

目的对应用榄香烯注射液与放疗方式联合对患有肺癌脑转移的患者实施治疗的临床效果进行研究。方法将我院收治的86例患有肺癌脑转移的患者随机分为对照组和治疗组,平均每组43例。采用常规放疗方式对对照组患者实施治疗;采用榄香烯注射液与放疗方式联合对治疗组患者实施治疗。结果治疗组患者肺癌脑转移病情控制效果明显优于对照组;治疗后半年、一年、三年内存活率明显高于对照组;出现不良反应的人数明显少于对照组;治疗前后血清MMP-2和MMP-9水平的改善幅度明显大于对照组;放疗计划实施时间和住院接受治疗总时间明显短于对照组。结论应用榄香烯注射液与放疗方式联合对患有肺癌脑转移的患者实施治疗的临床效果非常明显。

慢性粒细胞白血病Ph^1染色体和bcr/abl融合基因检测的意义

目的 :探讨 Ph1染色体和 bcr/ abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病诊断中的意义。方法 :选择 95例慢性粒细胞白血病患者和 2 0例缺铁性贫血患者作为研究对象 ,采用骨髓细胞短期培养法制备染色体、采用RT- PCR法分析 bcr/ abl融合基因。结果 :95例慢性粒细胞白血病患者中 ,Ph1染色体阳性者 83例 (87.4 % ) ,bcr/ abl阳性阳性者 90例 (94 .7% ) ,Ph1和 bcr/ abl均阳性 83例 (94 .7% ) ,Ph1阴性、bcr/ abl阳性 7例 (7.4 % ) ,Ph1 和 bcr/ abl均阴性 5例 (5 .3% )。 2 0例缺铁性贫血患者 Ph1 和 bcr/ abl均阴性。结论 :Ph1 染色体、 bcr/ abl融合基因的检测有助于慢性粒细胞白血病的诊断和鉴别诊断。

多学科协作式肿瘤学教学团队的形成及其运行机制

基于医学发展背景,尤其是肿瘤学的学科特色及医学教育改革的趋势,组成多学科性、专家型教学团队,进一步确立课程目标及教学模式,重视教材建设,强化实践教学,注重以知识综合运用为前提、临床思维能力训练为目的的跨学科教学。

“医学科研导论”课程教学与创造性思维的开发

"医学科研导论"课程的教学,要沿着科研程序和论文写作过程这两条主线,构成课程框架与逻辑顺序。通过将医学方法学知识与医学专业知识有机融合,使学生从被动接受知识向主动思考问题转变、从重视思维结果向反思思维过程转变、从关注思维内容向留意思维方法转变,以突出思维能力与表达能力的训练。

高渗液对缺氧/复氧人脐静脉内皮细胞内游离钙离子浓度的影响

目的：观察高渗液（HS）对缺氧/复氧的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）的影响,阐明高渗液治疗休克时对血管内皮细胞的保护机制。方法：体外分离和培养的HUVECs分为对照组和实验组,采用荧光探针技术,应用激光共聚焦显微镜,测定细胞内[Ca^2＋]i的变化,两组细胞先置于缺氧（95%氮气,5%CO2）环境中8 h,然后将实验组细胞置于配制好的HS中15 min,再在常氧状态下（95%空气,5%CO2）培养16 h。对照组细胞加对照液（M199培养液）15 min后同实验组。两组细胞分别于缺氧前（T0）、缺氧后（T1）、处理后（T2）、复氧后1/2、2、8、16 h（T36）测定细胞内Fluo-3荧光强度。结果：两组细胞荧光强度T1与T0比较显著升高（P〈0.05）;实验组细胞荧光强度T2低于实验组T1及对照组T2（P〈0.05）,但仍高于T0（P〈0.05）,且复氧过程中逐渐降低,至T5恢复到T0水平;两组细胞T3时点荧光强度均高于各T2时点（P〈0.05）;实验组复氧过程中不同时点（T36）荧光强度低于各自同一时间点的对照组（P〈0.05）。结论：缺氧/复氧可以引发HUVECs内[Ca^2＋]i升高,而HS能减轻HUVECs内的钙超载,保护缺氧/复氧损伤的内皮细胞。

大剂量免疫球蛋白治疗再生障碍性贫血的疗效

目的 评价静脉输注大剂量免疫球蛋白 (HDIg)治疗再生障碍性贫血的疗效。方法 球蛋白治疗组为 70例 ,其中重型再障 (SAA) 30例 ,慢性再障 (CAA) 4 0例。对照组 73例 ,其中重型再障 31例 ,慢性再障 42例。应用大剂量免疫球蛋白 (HDIg) 1g/kg·次 ,每月一次 ,同时应用康力龙、左旋咪唑、再障生血片。对照组仅用后三种药物。结果 球蛋白治疗组SAA 30例 ,基本治愈 3例 ,缓解 5例 ,明显进步 6例 ,有效率 47% ,CAA 40例 :基本治愈6例 ,缓解 12例 ,明显进步 14例 ,有效率 80 %。血象上升时间 ,血小板平均 15天左右 ,白细胞及红细胞平均 5 0天左右。对照组SAA31例 ,仅 3例明显进步 ,有效率 10 % ;CAA 42例 ,基本治愈 1例 ,缓解 5例 ,明显进步 16例 ,有效率5 2 % ;血象上升时间平均 80天左右。结论 大剂量免疫球蛋白联合雄激素治疗再障疗效明显优于对照组 ;球蛋白治疗CAA组疗效优于SAA组 ,且多次应用球蛋白疗效显著提高。