心力衰竭时大鼠心肌细胞肌浆网钙回摄的变化

目的:探讨心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄异常的机制。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支制备慢性心衰模型。4周后采用酶解法分离假手术组和心衰组大鼠心室肌细胞,利用激光扫描共聚焦显微镜检测心肌细胞肌浆网钙含量。采用western-blot技术检测心肌细胞肌浆网钙调蛋白SERCA2a、PLN、PP1的表达水平。结果:心衰组的大鼠心肌细胞荧光强度小于假手术组,并且心衰组大鼠心肌细胞咖啡因诱导的钙瞬变也低于假手术组;心衰组大鼠心SERCA2a表达水平降低,PP1的水平升高,PLN总体水平不变,但磷酸化的PLN水平降低。结论:钙泵表达量下降和钙泵活性降低是心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄减少的主要原因。

灵芝孢子油对人肺癌细胞的生长抑制作用及超微结构的影响

目的：探讨灵芝孢子油对人肺癌细胞（A549）超微结构的影响以及对其生长的抑制作用.方法：利用CCK-8法检测灵芝孢子油对A549细胞的生长抑制作用;利用透射电镜研究灵芝孢子油对A549细胞超微结构的影响;利用乳酸脱氢酶（LDH）检测法研究灵芝孢子油对细胞膜通透性的影响;上述方法研究灵芝孢子油对体外培养的肺癌细胞A549的抑制作用.结果：CCK-8检测结果表明25 μg/ml浓度的灵芝孢子油可导致A549细胞的存活率明显下降;透射电镜结果显示,随着灵芝孢子油浓度的增加,可以观察到细胞超微结构的明显改变;LDH检测显示灵芝孢子油可使细胞的LDH释放量明显增加,且呈剂量依赖性.结论：灵芝孢子油对人肺癌细胞具有明显抑制作用.

膜蛋白电镜结构检测的研究进展

膜蛋白是生物蛋白家族的重要组成部分,由于膜蛋白所处的特殊的空间位置,对膜蛋白结构和功能的研究越来越多。单颗粒研究方法和冷冻断层方法是利用电子显微镜结构解析研究膜蛋白结构的两种主要方法。近些年以来,由于数据处理能力以及制样技术的迅速进步,膜蛋白的电镜结构研究已经取得了巨大的进展。本文主要对膜蛋白结构研究方法中的冷冻断层成像技术和单颗粒研究方法作了一个简单的介绍。

早老素在扩张型心肌病中的作用研究进展

早老素(presenilin,PS)是在家族性早发型阿尔茨海默病中发现的一种跨膜蛋白,主要表达于细胞膜和细胞器膜上。PS作为γ-分泌酶的重要组成部分,参与细胞内多种蛋白的调控。近年研究发现在扩张型心肌病中存在PS基因突变,并且发现PS基因对心脏的形成及心肌细胞中钙稳态的调控具有重要作用。本文综述了PS在心脏中的作用以及PS可能影响心肌细胞钙稳态的相关机制,后者包括β-淀粉样蛋白、1,4,5-三磷酸肌醇受体、Ryanodine受体、钙泵等,为家族性扩张型心肌病的研究提供参考。

纳米金棒诱导A549细胞产生自噬的机制研究

纳米金棒(AuNRs)具有众多独特的属性,已广泛运用于生物医学领域,但其是否具有潜在的生物危害尚有争议。作者运用了激光扫描共聚焦显微镜技术、western blotting技术和其他分子生物学方法从细胞氧化应激的角度探讨了AuNRs诱导A549细胞产生自噬的分子机制。研究结果表明,4μg·m L^(-1)的AuNRs处理6 h能够诱导A549细胞自噬标志蛋白LC3-II表达增加,LC3蛋白从细胞核转移至细胞质并形成自噬小泡。进一步研究发现,AuNRs能够降低A549细胞线粒体膜电位、ATP含量、UCP2蛋白表达水平以及细胞抗氧化能力并导致活性氧蓄积,后者可能最终引起细胞产生自噬。而10 mmol·L^(-1)抗氧化剂NAC能够逆转上述线粒体及细胞功能的改变,并抑制自噬的发生。这一研究为深入认识其生物危害及可能机制提供了有力的实验证据。

多普勒彩超辐照对不同孕期胎鼠脑组织超微结构的影响

目的采用多普勒彩超辐照不同孕期大鼠,观察超声对胎鼠脑组织超微结构的影响。方法采用多普勒彩超照射不同孕期大鼠(孕12d、15d、18d)30min,仪器采用PREIRUS型彩色电脑声像仪,照射条件:EUP-LTM4探头,二维频率5.0 MHz,组织热指数(Tis)=0.4,机械指数(Micd)=1.2。照射后24h取胚胎脑组织标本,利用透射电镜(TEM)观察细胞器超微结构变化。结果经过多普勒彩超辐照30min后,孕期12d胎鼠神经元细胞器超微结构改变不明显,偶见线粒体嵴溶解,内质网未见明显扩张,细胞核形状较规则,胞质中有较小的空泡出现;孕期15d胎鼠神经元细胞器超微结构改变明显,细胞器损伤程度重于12d胎鼠;孕期18d胎鼠可见明显超微结构改变,内质网明显扩张,细胞核形态严重不规则,线粒体嵴溶解更明显,核周间隙扩张,胞质中出现较大空泡。结论多普勒彩超辐照对不同孕期胎鼠脑组织中细胞器超微结构的影响不同,胎鼠孕期越早,相同的辐照对其影响越小。

Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响

目的:探讨Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响。方法:本实验以AAV-9为载体构建心肌特异性PS1-shRNA重组腺相关病毒,通过尾静脉注射PS1-shRNA重组腺相关病毒干扰大鼠心肌组织中Presenilin1基因的表达,并利用激光扫描共聚焦显微镜检测并记录心肌细胞肌浆网钙容量及舒张期自发钙释放事件的变化;同时,采用western blot技术分析各组大鼠心肌组织中雷诺丁受体及钙泵表达水平的改变。结果:与对照组相比,PS1-shRNA重组腺相关病毒干预组大鼠心肌细胞肌浆网钙容量显著降低,自发钙释放事件明显增加;雷诺丁受体表达水平略降低,钙泵表达水平无显著性变化。结论:Presenilin1基因表达水平降低会引起心肌细胞钙泄漏,从而造成心肌细胞肌浆网钙容量降低。

Presenilin基因调控钙稳态机制的研究进展

阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease，AD）和心力衰竭是两种最常见的老年性疾病。AD是一种以认知功能退化为主要特征的痴呆性疾病，主要表现为记忆、推理和语言等功能性障碍，由各种原因导致的神经系统退行性病变是AD发生的根本原因。