结缔组织病患者骨代谢的变化及云克对类风湿关节炎骨代谢的影响

目的:通过测定骨密度和骨代谢指标了解结缔组织病患者骨质疏松的发生情况和骨代谢的变化情况,并评价云克治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)对骨代谢的影响。方法:选取2016年2月-2017年2月于江苏大学附属医院风湿免疫科住院患者共280例,其中系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)75例,原发性干燥综合征(primary Sjogren syndrome,pSS)45例,RA 160例。采用双能X线法测定患者腰椎和髋部骨密度,采用电化学发光免疫分析法检测骨钙素(osteocalcin,OC)、Ⅰ型原胶原N端前肽(N-terminal propeptide of typeⅠprocollagen,PINP)和Ⅰ型胶原C端肽交联(C-terminal crosslinking telopeptide of typeⅠcollagen,CTX)。分别分析骨代谢指标OC、PINP和CTX与患者年龄、病程、体重指数(body mass index,BMI)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、补体C3、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、骨密度以及激素使用程度等因素的相关性。有70例RA患者给予云克治疗4个月,统计分析云克治疗前后骨代谢指标的差异。结果:280例结缔组织病患者骨量减少的发生率为27.7%,骨质疏松的发生率为21.5%。与SLE组比较,OC、PINP以及CTX水平在pSS组和RA组呈升高趋势;同时,pSS和RA患者的OC、PINP以及CTX水平在骨量正常组、骨量减少组和骨质疏松组呈逐渐升高的趋势。相关性分析发现,pSS患者骨代谢指标与RF呈显著正相关(OC:r=0.570,P=0.002;PINP:r=0.752,P <0.001;CTX:r=0.660,P <0.001);SLE患者OC、PINP与髋部骨密度呈显著负相关(OC:r=-0.382,P=0.028;PINP:r=-0.527,P=0.002);pSS患者OC、CTX与髋部骨密度呈显著负相关(OC:r=-0.471,P=0.013;CTX:r=-0.422,P=0.028)。与治疗前比较,云克治疗4个月后RA患者OC水平上升(P <0.05),ESR水平下降(P <0.05);而PINP、CTX、CRP和骨密度无明显变化。结论:结缔组织病患者存在不同程度的骨代谢异常,骨质疏松发生率较高。骨代谢指标可早期预测骨量丢失情况。云克治疗有助于改善RA患者骨代谢。

SLE患者血清对小鼠BMMSC生长、增殖及凋亡的影响

目的了解小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)生长增殖特性,探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清对其影响。方法分离培养BALB/c小鼠第二代BMMSC,加入不同浓度SLE患者血清,分别在第2,4,6,8天进行细胞计数,描绘生长曲线;第二代培养第6天的BMMSC加入不同浓度SLE患者血清,MTT法测定细胞增殖情况,AnnexinV/PI测定细胞凋亡。结果正常人血清组对BMMSC增殖、凋亡与对照组无明显差别;小鼠第二代BMMSC生长在第6天达到高峰;5%、10%或15%SLE血清均对BMMSC生长呈浓度依赖性抑制作用,可增加BMMSC的凋亡。结论SLE患者血清中可能存在某些物质抑制BMMSC的生长。

同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响

背景:趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在狼疮肾炎的发病中起到一定作用,探究骨髓间充质干细胞对狼疮小鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响对于进一步研究狼疮肾炎的发病机制以及骨髓间充质干细胞对狼疮肾炎的治疗机制有一定意义。目的:探讨同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠外周血和肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响。方法:分离培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,扩增至第3代,细胞浓度为1×10^(9) L^(-1)。选取四五周龄雌性MRL/lpr小鼠15只,分为MRL/lpr组(未进行尾静脉输注)、PBS组(12周龄末注射PBS)、骨髓间充质干细胞组(12周龄末注射骨髓间充质干细胞),每组5只,另选取5只C57BL/6小鼠为正常对照。各组小鼠在20周龄末处死,采用ELISA法检测各组小鼠外周血血浆中CXCL12的表达;流式细胞分析外周血、肾脏中B淋巴细胞表面CXCR4的表达;免疫组化染色观察肾脏中CXCL12的表达;苏木精-伊红染色观察肾脏病理变化。结果与结论:(1)与C57BL/6组相比,MRL/lpr组狼疮鼠外周血血浆和肾脏中CXCL12表达增高,且外周血以及肾脏B淋巴细胞表面CXCR4的表达均增高;(2)与PBS组相比,骨髓间充质干细胞组狼疮鼠外周血血浆和肾脏中CXCL12表达降低,且外周血以及肾脏B淋巴细胞表面CXCR4的表达均降低;(3)苏木精-伊红染色观察输注骨髓间充质干细胞后狼疮鼠肾脏炎症改善;(4)结果表明,MRL/lpr狼疮鼠肾脏中存在CXCL12/CXCR4表达异常,骨髓间充质干细胞输注可能通过影响CXCL12/CXCR4的表达从而起治疗作用。

原发性干燥综合征患者的骨代谢变化及影响因素

[目的]探讨原发性干燥综合征(pSS)患者的骨质状况及影响患者骨量的相关因素.[方法]选取pSS患者55例作为观察组,健康体检者50例作为对照组.比较两组腰椎、股骨颈的骨密度(BMD)及Ⅰ型胶原C端肽交联(CTX)、Ⅰ型原胶原N端前肽(PINP)和骨钙素(OC)水平,分析其与年龄、病程、血沉(ESR),C反应蛋白(CRP)、补体C3、补体C4、血清补体C1q、激素使用情况的相关性,并比较pSS患者BMD与骨代谢指标.[结果]pSS患者腰椎、股骨颈BMD及PINP、OC水平均低于对照组,CTX水平高于对照组,且差异均有显著性(P<0.05).pSS患者腰椎及股骨颈的BMD与其年龄、补体C1q呈负相关,且腰椎BMD与激素用量呈负相关(P<0.05);pSS患者CTX水平与补体C4呈负相关(P<0.05),与激素用量呈正相关(P<0.05);PINP、OC水平与CRP、激素用量呈负相关,而OC水平与补体C4呈正相关(P<0.05).pSS患者中骨量减少组、骨质疏松组的CTX水平高于骨量正常组,骨质疏松组PINP、OC水平低于骨量正常组,骨量正常的pSS患者PINP、OC水平较正常对照组降低(P<0.05).[结论]pSS患者存在BMD和骨代谢异常,并与疾病活动和激素用药有关.骨代谢指标可评估骨量正常pSS患者的骨质状况.

骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠B淋巴细胞CXCR4表达的影响

目的:研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)输注对狼疮鼠血浆C3、IgG浓度及B细胞、浆细胞表面CXCR4表达的影响,分析BMMSCs改善系统性红斑狼疮疾病活动的机制。方法:分离培养C57BL/6小鼠的BMMSCs,并对MRL/lpr狼疮鼠进行尾静脉输注。实验分为C57BL/6组(C57BL/6小鼠未进行尾静脉输注)、MRL/lpr组(MRL/lpr鼠未进行尾静脉输注)、BMMSCs组(MRL/lpr鼠12周龄注射BMMSCs)和PBS组(MRL/lpr鼠12周龄注射PBS)。在20周末取小鼠的外周血、骨髓、脾脏进行流式细胞分析,检测B细胞、浆细胞表面CXCR4表达;同时取4组血浆,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测C3、IgG浓度。取小鼠肾脏组织行苏木精伊红(HE)染色。结果:①MRL/lpr组较C57BL/6组小鼠血浆C3浓度明显降低、IgG浓度明显增高(P均<0.01);MRL/lpr组较C57BL/6组小鼠B细胞表面CXCR4的表达在外周血明显下降,在骨髓和脾脏明显升高(P均<0.01);MRL/lpr组小鼠骨髓(P<0.05)及脾脏(P<0.01)浆细胞表面CXCR4表达明显高于C57BL/6小鼠。②BMMSCs组较PBS组、MRL/lpr组C3浓度明显升高、IgG浓度明显降低(P均<0.01);BMMSCs组较PBS组B细胞表面CXCR4表达在外周血明显增加(P<0.01),在骨髓(P<0.01)和脾脏(P<0.05)明显下降,较MRL/lpr组在骨髓和脾脏均明显下降(P均<0.01)。③BMMSCs组较PBS组、MRL/lpr组浆细胞表面CXCR4表达在骨髓和脾脏均明显降低(P均<0.05)。④肾脏HE染色提示输注BMMSCs后狼疮鼠肾脏炎症改善。结论:BMMSCs输注可调节B细胞、浆细胞表面CXCR4的表达,改善MRL/lpr鼠病情活动指标。

艾拉莫德治疗难治性强直性脊柱炎临床效果观察

目的:了解艾拉莫德治疗难治性强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的临床效果。方法:入选36例难治性AS患者,根据随机数字表法分为治疗组和对照组。治疗组18例,每日早晚服用艾拉莫德25 mg,对照组18例,继续使用原有的改善病情抗风湿药,为期24周。评估主要疗效指标:达到AS疗效评价(ASAS)20%改善程度(ASAS20)患者的比例;次要疗效指标:ASAS标准中6项改善5项(ASAS 5/6)患者的比例、Bath AS疾病活动指数(BASDAI)改善达到50%以上(BASDAI 50)患者的比例、ASAS 50%改善程度(ASAS 50)患者的比例和ASAS部分缓解患者的比例。观察两组患者BASDAI、Bath AS功能指数(BASFI)、总体评价、背痛评分、晨僵时间、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)的变化,所有患者均进行安全性评价。结果:使用艾拉莫德治疗第12周时有44.4%患者达到ASAS 20,20周时66.7%患者达到ASAS 20,次要疗效指标(ASAS 5/6、BASDAI 50、ASAS50、ASAS部分缓解)也有所改善。第24周时有61.1%患者达到ASAS 5/6,55.6%患者达到BASDAI 50,50.0%患者达到ASAS 50,27.8%患者达到ASAS部分缓解。结论:艾拉莫德可有效缓解难治性AS患者临床症状。

锝(^(99)Tc)亚甲基二磷酸盐治疗难治性强直性脊柱炎临床疗效观察

目的评价锝(^(99)Tc)亚甲基二磷酸盐(^(99)Tc-MDP)治疗难治性强直性脊柱炎(AS)的临床疗效和安全性。方法入选60例难治性AS患者根据随机数字表法分为治疗组和对照组。治疗组:原有的改善病情抗风湿药加^(99)Tc-MDP。对照组:继续使用原有的改善病情抗风湿药。主要疗效指标:达到AS疗效评价(ASAS)20%改善程度(ASAS 20)的受试者比例。次要疗效指标:达到AS疗效缓解50%(ASAS 50)、ASAS标准中6项改善5项(ASAS 5/6)、Bath AS疾病活动指数(BASDAI)改善50%(BASDAI 50)、ASAS部分缓解的受试者比例。结果 AS患者使用^(99)Tc-MDP治疗第4周时,有30%患者达到治疗反应,16周时80%患者达到治疗反应。次要疗效标准(ASAS 5/6、BASDAI 50、ASAS 50、ASAS部分缓解)也有改善,第16周时有72.5%患者达到ASAS 5/6,55.0%患者达到BASDAI 50、42.5%患者达到ASAS 50、35%患者达到ASAS部分缓解。不仅如此,在第8周时患者ESR、CRP均有所下降。而且^(99)Tc-MDP的耐受性好,不良反应少。结论 ^(99)Tc-MDP可有效缓解难治性AS患者临床症状,降低炎症指标,为治疗难治性AS提供了一种新的选择。

来氟米特活性代谢产物A771726对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用

目的:探讨来氟米特(leflunomide,LEF)在体外对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:在植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激下,人外周血淋巴细胞与不同剂量的LEF(5,15,45μg/ml)共培养。检测各组T淋巴细胞的增殖、凋亡情况,分析各组T淋巴细胞免疫表型CD152,CD28的表达以及各组T淋巴细胞的IFN-γ,IL-10,TGF-β1 mRNA水平。结果:在体外,LEF对由PHA诱导的T淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用,且抑制作用与LEF呈剂量依赖性。LEF对T淋巴细胞CD152,CD28的表达无明显影响。LEF能促进IL-10,TGF-β1 mRNA的表达,抑制IFN-γmRNA的表达。结论:LEF可能通过抑制T淋巴细胞增殖、减少T淋巴细胞凋亡、促进T淋巴细胞IL-10、TGF-β1 mRNA表达及抑制IFN-γmRNA表达来下调免疫反应。

间充质干细胞对系统性红斑狼疮患者树突状细胞的免疫抑制作用

目的:探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单核细胞来源树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫功能的影响。方法:从人骨髓中分离培养MSCs,采用流式细胞仪(FCM)分析鉴定MSCs的纯度。分离SLE患者外周血单核细胞,用重组人粒—巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)、重组人白细胞介素4(rh IL-4)诱导培养DC的同时加入MSCs共培养,设立MSCs处理组,MSCs未处理组。在第7天收集细胞,流式细胞术检测两组DC表面CD 1a,CD14的表达。SLE患者的不成熟DC与MSCs共同培养加入终浓度为50 ng/m L的重组人肿瘤坏死因子-α(rh TNF-α)48 h后收集细胞,流式细胞术检测两组DC表面CD86、CD83、HLA-DR的表达。分别将MSCs处理或未处理的DC和T淋巴细胞共培养,72 h后用MTT法检测DC刺激淋巴细胞增殖的能力。结果:与对照组相比,MSCs处理组DCs表面CD1a、CD86、CD83以及HLA-DR表达明显下降(P<0.01),CD14表达明显增高,对淋巴细胞的刺激能力明显减弱(P<0.01)。结论:MSCs可能通过抑制SLE患者DC的发育、成熟和功能的途径,抑制SLE患者的免疫反应。

骨髓间充质干细胞对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:从人骨髓中分离培养BMSCs,采用流式细胞仪(FCM)分析鉴定BMSCs的纯度。在PHA刺激下,人外周血淋巴细胞与不同数量的BMSCs共培养。检测各组T淋巴细胞的增殖、凋亡情况,分析各组T淋巴细胞免疫表型CD152、CD28的表达以及各组T淋巴细胞的IFN-γ、IL-10、TGF-β1 mRNA的表达。结果:在体外,BMSCs对由PHA诱导的T淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用,且抑制作用与BMSCs呈剂量依赖性。BMSCs对T淋巴细胞的CD152、CD28的表达无明显影响。BMSCs能促进IL-10、TGF-β1mRNA的表达,抑制IFN-γmRNA的表达。结论:BMSCs可能通过抑制T淋巴细胞增殖、减少T淋巴细胞凋亡、促进T淋巴细胞IL-10、TGF-β1mRNA表达及抑制IFN-γmRNA表达来下调免疫反应。

脐带间充质干细胞移植治疗难治性系统性红斑狼疮患者的疗效分析

目的探讨脐带间充质干细胞(MSCs)移植治疗难治性系统性红斑狼疮(SLE)的疗效及安全性。方法 18例难治性SLE患者,均采用脐带MSCs移植治疗,评价移植前后SLE患者的临床表现和实验室检查的变化。结果脐带MSCs移植治疗1个月后SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)为(10.8±5.2)分,3个月时为(6.7±4.6)分,6个月时为(4.7±3.8)分,均显著低于治疗前的(13.2±5.0)分(P<0.01);治疗3个月后24 h尿蛋白定量为(1089±818)mg/24 h,治疗后6个月后为(750±632)mg/24 h,显著低于治疗前的(1853±1187)mg/24 h(P<0.01);所有患者均无移植相关并发症的发生。结论 MSCs移植治疗SLE安全有效,远期疗效还需进一步观察。

狼疮性肾炎肾损害的临床表现与病理分析

目的探讨狼疮性肾炎(LN)的肾脏损害临床表现、实验室检查与病理的关系。方法对29例LN患者进行B超定位下行经皮肾活检及血、尿常规、肝肾功能、24小时尿蛋白定量及免疫学检查等。根据WHO1982年标准进行病理分型,并分别进行活动性指数(AI)、慢性指数(CI)和肾小管间质病变(TIL)评分。统计学分析采用STATA(40)软件进行Fisher检验。结果病理类型以Ⅳ型LN最多,占37%,其次是Ⅴ型(245%)和Ⅱ型(205%)。肾组织各病理类型之间其临床表现中血尿(750%)、24小时尿蛋白定量范围、抗DsDNA抗体阳性率、补体C3下降率检测在各型之间比较,差异均有显著性(P<005)。Ⅱ型及Ⅲ型LN多表现为肾炎综合征,尿蛋白一般<3g/d,Ⅳ型及V型多表现为肾病综合征,有2例Ⅳ型表现为急进性肾炎。Ⅳ型LN的血尿、肾功能不全发生率最高,其AI亦显著高于其他类型。LN肾间质受累以Ⅳ型最为显著。结论LN的病理类型与临床表现有一定关系,根据其临床表现和实验室检查结果可以大致推测其病理类型。

骨髓间充质干细胞联合来氟米特对小鼠淋巴细胞增殖的抑制

背景：来氟米特是一种新型的免疫抑制剂，其活性产物A771726在体外能抑制增生分裂细胞的二氢乳清酸脱氢酶和酩氨酸激酶的活性，抑制活化淋巴细胞的增殖。目的：观察骨髓间充质干细胞在体外联合来氟米特对小鼠淋巴细胞增殖的抑制效应。设计、时间及地点：随机对照，细胞学免疫调控实验，于2007—06／11在江苏大学附属医院中心实验室完成。材料：清洁级5-6周龄BALB／c雌性小鼠42只，18只分离制备骨髓间充质干细胞，传至第3代用于实验；24只用于制备脾淋巴细胞。来氟米特活性代谢产物A771726由美国欣凯公司肖飞博士惠赠。非特异性有丝分裂原ConA、脂多糖为sigma公司产品。方法：将制备的T、B淋巴细胞悬液分为骨髓间充质干细胞组、来氟米特组、骨髓间充质干细胞＋来氟米特组，其中骨髓间充质干细胞浓度为2×10^8L^-1，骨髓间充质干细胞数：淋巴细胞数=1：30，来氟米特终浓度为15mg／L，此外各组加入5mg／L非特异性有丝分裂原ConA或25mg／L脂多糖。主要观察指标：MTF法检测T、B淋巴细胞增殖抑制率。通过表面标志检测T、B淋巴细胞活化情况。流式细胞仪测定T淋巴细胞凋亡程度。RT-PCR法检测T淋巴细胞干扰素γ、白细胞介素10、白细胞介素4mRNA表达水平。结果：与阳性对照比较，骨髓间充质干细胞组、来氟米特组、骨髓间充质干细胞＋来氟米特组T淋巴细胞体外增殖抑制率均明显提高（P〈0．05），且后者变化幅度大于前两组（P〈0．05）；各组B淋巴细胞增殖抑制情况与上述结果相似。与阳性对照比较，各组T淋巴细胞CD3^＋CD69^＋、CD3^＋CD28^＋的表达以及B淋巴细胞CD19^＋CD69^＋、CD19^＋CD86^＋的表达均基本相似；骨髓间充质干细胞组、骨髓间充质干细胞＋来氟米特组T淋巴细胞凋亡率明显下降（P〈0．05）。与阳性对照比较，骨髓间充质干细胞＋来氟米特组可使T淋巴细胞干扰素γmRNA提高、白细胞介素10mRNA降低（P〈0．05），白细胞介素4mRNA表达无变化，且其前2项指标变化幅度明显大于骨髓间充质干细胞组、来氟米特组（P〈0．05）。结论：骨髓间充质干细胞与来氟米特体外联合，能抑制T淋巴细胞凋亡，可协同抑制T、B淋巴细胞增殖、白细胞介素10mRNA表达，协同促进干扰素γmRNA的表达，对T、B淋巴细胞活化、白细胞介素4mRNA表达无影响。

间充质干细胞的免疫调节作用与系统性红斑狼疮

间充质干细胞(MSC)是骨髓内除了造血干细胞之外的另一重要成分,近年来对MSC的研究越来越多,MSC具有体外扩增及多向分化的潜能,同时,MSC还具有低免疫原性以及免疫调节特性。本文综述了MSC免疫调节作用的研究现状及其在系统性红斑狼疮治疗中的应用前景。

类风湿关节炎患者骨代谢相关基因表达及信号通路的变化

目的:探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者骨代谢相关基因骨保护素、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)及核转录因子κB(NF-κB)、骨形态发生蛋白(BMP)信号通路的表达。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测40例RA患者和32例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中骨保护素、RANKL、NF-κB p50、NF-κB p52、NF-κB p65、BMP-2、BMP-9的mRNA表达水平,比较两组骨保护素/RANKL比值,并分析差异有统计学意义的指标与红细胞沉降率(ESR)、血清C-反应蛋白(CRP)和DAS28评分等疾病活动指标的相关性。另选取10例初发RA患者和10例健康对照者,检测其PBMC中NF-κB p65 mRNA的水平。结果:与健康对照者相比,RA患者RANKL mRNA相对表达量明显上升(P<0.01),骨保护素/RANKL比值明显下降(P<0.01),NF-κB p65 mRNA相对表达量明显下降(P<0.01),骨保护素、NF-κB p50、NF-κB p52、BMP-2及BMP-9的mRNA相对表达量两组间差异无统计学意义,RANKL、NF-κB p65、骨保护素/RANKL与血ESR、血清CRP和DAS28评分无相关性。与健康对照组相比,初发RA患者的NF-κB p65 mRNA表达量增高(P<0.05)。结论:RA患者PBMC表达破骨指标增加,并可能通过NF-κB信号通路影响骨代谢。

脐带间充质干细胞移植对不同证型系统性红斑狼疮患者的效果分析

背景:系统性红斑狼疮按中医辨证分为热毒炽盛等4个症型,治疗以补肾养阴,清化淤毒为主,但仍有许多患者治疗效果不佳。间充质干细胞具有多向分化、造血支持和免疫调节的功能,目前已有多项研究用于治疗难治性、复发性系统性红斑狼疮,取得良好疗效。目的:探讨脐带间充质干细胞移植对不同证型系统性红斑狼疮患者的疗效。方法:系统性红斑狼疮患者21例,经中医辨证分成热毒炽盛证、肝肾阴虚证、脾肾阳虚证及气滞血瘀证4型,分别统计患者脐带间充质干细胞移植前后各型的临床及实验室指标变化。结果与结论:脐带间充质干细胞移植1,3,6个月均可有效减少系统性红斑狼疮患者实验尿蛋白含量,降低系统性红斑狼疮疾病活动指数评分(P<0.01)。与移植前比较,移植脐带间充质干细胞后1,3,6个月可显著减少肝肾阴虚型患者尿蛋白含量(P<0.01),移植后1,3个月对热毒炽盛及气滞血瘀型尿蛋白含量为轻度减少(P<0.05),脾肾阳虚型患者在植后1个月时的尿蛋白含量轻度减少(P<0.05)。脐带间充质干细胞移植可提高所有中医分型患者的血浆白蛋白含量(P<0.01),其中对热毒炽盛型效果稍差(P<0.05)。脐带间充质干细胞移植后各型患者外周血血小板有上升趋势,但与移植前相比差异无显著性意义。结果说明,脐带间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮有效,对不同症型的系统性红斑狼疮患者的疗效有一定的差异。

三种蛋白联合检测对痛风患者肾损害的评估——附96例报告

目的 :探讨白蛋白、β2 微球蛋白和托 霍蛋白 (Tamm Horsfallprotein ,THP)联合检测对评估痛风患者早期肾损害的价值。方法 :采用放射免疫法 ,检测 96例急性痛风性关节炎患者的尿白蛋白 ,血、尿 β2 微球蛋白及血、尿托 霍蛋白水平 ,并对反映肾损害的诸因素进行相关分析。结果 :96例尿白蛋白 ,血、尿 β2 微球蛋白水平显著高于对照组 (P <0 0 1) ;血、尿托 霍蛋白水平显著低于对照组 (P <0 0 1)。降尿酸治疗 1个月后 ,尿白蛋白、血 β2 微球蛋白有所恢复 ,但与治疗前比较差异无统计学意义(P >0 0 5 ) ;而尿β2 微球蛋白和血、尿托 霍蛋白较治疗前有显著改善 (P <0 0 1)。相关分析显示 ,尿白蛋白分别与血 β2 微球蛋白、血清肌酐呈正相关 (r =0 4 6 3、r =0 4 33) ;与肌酐清除率呈负相关 (r =-0 4 5 3)。肾图、肾B超异常的患者的尿 β2 微球蛋白及托 霍蛋白显著高于肾图、肾B超正常的患者。结论 :白蛋白、β2 微球蛋白和托 霍蛋白联合检测可作为痛风患者早期肾损害的指标 ,积极的降尿酸治疗 ,早期肾功能损害可恢复。

沙利度胺对人T淋巴细胞的免疫调节作用

目的探讨沙利度胺(Thd)对健康人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法健康人外周血T淋巴细胞经不同浓度Thd作用后,用MTT比色法检测其增殖情况,用流式细胞术检测其早期凋亡及CD28、CD152表达,用RTPCR检测其白细胞介素6(IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。结果在体外,与阴性对照组相比,500μg/mlThd组可促进T淋巴细胞的增殖、早期凋亡,抑制T淋巴细胞CD28的表达。100μg/mlThd组可促进T淋巴细胞CD152表达。各剂量组均能抑制IL-6、TNF-αmRNA表达,100μg/ml和500μg/mlThd可增强IL-10mRNA的表达。结论Thd可以通过影响T淋巴细胞的增殖、早期凋亡以及CD152、CD28,IL-6、TNF-α、IL-10mRNA的表达,对健康人T淋巴细胞具有免疫调节作用。

类风湿关节炎患者外周血T_H17与Treg细胞的变化

目的探讨外周血辅助性T细胞17(TH17)与调节性T细胞(Treg)在类风湿关节炎(RA)发生、发展中的变化。方法选取RA患者活动组25例、稳定组20例及健康人对照组25例,采用流式细胞术及定量PCR的方法,分别从蛋白质水平与mRNA水平检测其外周血CD4+T细胞IL-17及FoxP3的表达。结果活动组RA患者外周血CD4+T细胞IL-17蛋白质及mRNA表达水平显著高于稳定组(P<0.01),稳定组又显著高于健康人对照组(P<0.01)。活动组RA患者外周血CD4+T细胞FoxP3蛋白质及mRNA表达水平显著低于稳定组及健康人对照组(P<0.01),但稳定组FoxP3表达与健康人对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RA患者外周血中存在TH17/Treg细胞失衡,且这种变化与疾病的进程相关。

MSCs联合来氟米特对异基因鼠B细胞的免疫调节

目的探讨体外骨髓间充质干细胞(MSCs)联合来氟米特(LEF)对BALB/c鼠B细胞的免疫调节作用。方法从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs,并通过其形态的均一性及流式细胞术(FCM)检测其表面标志以鉴定其纯度。用EZ-SepTM Mouse1X分离脾脏淋巴细胞,经脂多糖(LPS)刺激,并与LEF和/或MSCs作用。分为A组(脾细胞)、B组(脾细胞+LEF)、C组(脾细胞+MSCs)和D组(脾细胞+LEF+MSCs)。用MTT法检测B细胞的增殖。FCM检测B细胞CD69+、CD86+表达情况,以及B细胞凋亡情况。结果MSCs对B细胞增殖有明显抑制作用,MSCs联合LEF后抑制作用更强。C组吸光值(OD值)为0.303±0.016,明显高于D组的0.250±0.013(P<0.01)。C组CD86+B细胞百分率较A组明显降低[(76.17±1.13)%vs(87.57±1.66)%](P<0.01)。D组CD86+B细胞百分率显著低于C组[(60.94±1.22)%vs(76.17±1.13)%](P<0.01)。MSCs和/或LEF对B细胞CD69+的表达和B细胞凋亡均无显著影响。结论MSCs联合LEF对BALB/c鼠B细胞有免疫负调节作用,但机制复杂,可能与抑制B细胞增殖、干预B细胞不同时期活化有关。