建立高尿酸血症性肾损害小鼠模型的实验研究

目的建立合理、稳定的高尿酸血症肾损害小鼠模型,为筛选及研究治疗高尿酸血症肾病的药物提供病理模型。方法将氧嗪酸钾、次黄嘌呤、腺嘌呤、乙胺丁醇和酵母膏5种造模剂单用、两药合用或三药联用,观察不同造模时间、造模剂量和造模方式所建立的小鼠高尿酸血症肾损害模型的血清尿酸、尿素氮以及肌酐水平、肝脏黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)和腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)活性的变化、肾脏的病理学改变以及各组体重变化情况。结果与正常组比较,次黄嘌呤和氧嗪酸钾联用单次造模组小鼠血清尿酸水平及尿素氮明显升高(P<0.01),肾皮质可见肾小管管型,肾髓质可见盐类结晶;次黄嘌呤、乙胺丁醇和氧嗪酸钾三药联用7 d组小鼠血清尿酸水平及尿素氮明显升高(P<0.01),肝脏XOD活性明显降低(P<0.05),肾近曲小管内可见嗜酸性不溶性蛋白;酵母膏和氧嗪酸钾联用14 d组以及酵母膏、腺嘌呤和氧嗪酸钾联用14 d组,与正常组相比,小鼠血清尿酸、尿素氮以及肌酐值均显著升高(P<0.01),酵母膏和氧嗪酸钾联用组可见肾小管上皮细胞脱落,肾近曲小管内可见嗜酸性不溶性蛋白,酵母膏、腺嘌呤和氧嗪酸钾联用组小鼠肾髓质可见盐类结晶。酵母膏和氧嗪酸钾联用组比酵母膏、腺嘌呤和氧嗪酸钾联用组小鼠体重增长更快,两组差异有显著性(P<0.05)。结论与其他造模方式比较,由于酵母膏和氧嗪酸钾联用所建立的高尿酸血症肾损害小鼠模型更加稳定,对小鼠体重无明显影响,同时该造模方式更符合临床特点,因此采用酵母膏和氧嗪酸钾联用14 d建立高尿酸血症肾损害小鼠模型更为合适。

黄芩苷抗急性痛风性关节炎的实验研究

目的:研究黄芩苷对急性痛风性关节炎的作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.5 mg/kg)阳性对照组和黄芩苷低(15 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量组,连续给药7 d。给药后第5天,除正常对照组外其余各组大鼠右后踝关节注射尿酸钠(MSU)晶体混悬液。造模后不同时间观察大鼠步态并测定踝关节周径,第7天用ELISA法测定血清中IL-1β、IL-18及TNF-α含量,对踝关节进行组织病理学检查。并用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型、热板法和醋酸扭体实验观察黄芩苷的抗炎镇痛作用。结果:与模型组比较,黄芩苷各剂量组对大鼠关节肿胀有显著的抑制作用并能显著改善痛风小鼠步态(P<0.05或P<0.01),高剂量组血清IL-1β、IL-18含量显著降低(P<0.01),组织病理学观察显示黄芩苷组和秋水仙碱组大鼠踝关节的炎性细胞浸润减少。黄芩苷可显著减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀并具有镇痛作用。结论:黄芩苷对急性痛风性关节炎的炎症和疼痛有显著的改善作用,其机制与抑制炎症反应有关。

黄芩苷对尿酸钠诱导RAW264.7细胞NLRP3及炎症因子表达的影响

目的:研究黄芩苷对尿酸钠诱导RAW264.7细胞NLRP3炎性小体及炎症因子表达的影响。方法:取RAW264.7细胞分为对照组、模型组和药物组,模型组用尿酸钠(终浓度2 mg·m L^(-1))刺激,药物组先加入不同浓度黄芩苷(终浓度为2.5,5,10和20μg·m L^(-1))预处理1 h后再加入尿酸钠。24 h后收集细胞,用qRT-PCR法检测TNF-α,IL-1β,IL-18和NLRP3的mRNA表达水平;收集细胞培养上清液,用ELISA法检测TNF-α,IL-1β和IL-18的浓度。结果:与对照组比较,模型组巨噬细胞NLRP3及炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-18的基因表达显著上调,巨噬细胞分泌TNF-α,IL-1β和IL-18显著增加;与模型组比较,黄芩苷组显著抑制上述指标。结论:NLRP3炎性小体参与尿酸钠诱导的炎性反应,黄芩苷可抑制NLRP3的mRNA表达,减少炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-18的分泌而发挥抗炎作用。