人乳铁蛋白胶体金免疫层析检测试剂卡的研制

文章建立一种快速定量检测人乳铁蛋白的方法。该方法基于胶体金免疫层析技术,通过对标记和包被条件等工艺进行优化筛选,研制一种双抗体夹心法检测人乳中乳铁蛋白的检测试剂卡,并对该试剂卡的性能进行了评估。结果表明,空白限可低至0.014 mg/mL,与高效液相色谱法对比测试人乳的样本检测相关系数为0.92,与牛乳铁蛋白、酪蛋白和β-乳球蛋白均无交叉反应,为人乳铁蛋白的检测提供了一种快速、简便、易于操作的方法。

普通饮食诱导的肥胖倾向和肥胖抵抗倾向大鼠胃组织和血浆ghrelin的研究

目的:探讨大鼠胃组织和血浆ghrelin表达水平对普通饲料诱导的肥胖倾向(obesity-prone,OP)与肥胖抵抗倾向(obesity-resistance-prone,ORP)形成的作用。方法:16只健康雄性Wistar大鼠,普通饲料(脂肪供能比为14.8%)喂养10周后,根据其腹脂/体重比值大小选入OP组与ORP组,每组7只。记录体重和摄食量,测定内脏脂肪含量和空腹血糖、血脂、血胰岛素和血浆ghrelin水平,以及胃组织ghrelin蛋白表达水平。结果:OP组大鼠体重增量、能量利用率、内脏脂肪含量明显高于ORP组(P<0.01);与ORP组大鼠相比,OP组血糖、甘油三酯、胰岛素水平显著升高(P<0.05),血浆ghrelin水平有降低趋势(P=0.14);OP组大鼠胃组织ghrelin表达显著高于ORP组(P<0.01);大鼠胃组织ghrelin表达水平与体重增量、能量利用率、肾周与睾周脂肪、空腹血糖呈正相关关系(P<0.05),与胰岛素敏感指数呈负相关关系(P<0.05)。结论:胃组织ghrelin表达水平较高或较低很可能是大鼠形成OP或OPR的重要影响因素。

ghrelin与摄食和肥胖的关系

ghrelin是生长激素促分泌素受体的内源性配体,主要在胃部产生,也广泛分布于其他组织,具有多种生物学效应。它通过激活下丘脑神经元表达促胃肽NPY(神经肽Y)/AGRP(刺鼠相关蛋白)来促进摄食和调节能量平衡,在肥胖的发病机制中起重要作用。本文从分子结构、分布、生理功能等方面简单介绍了ghrelin,主要对ghrelin与摄食和肥胖的关系进行综述。

高脂饮食诱导的肥胖倾向和肥胖抵抗大鼠胃组织和血浆ghrelin水平的研究

目的:探讨高脂饮食诱导的肥胖倾向(OP)与肥胖抵抗倾向(ORP)大鼠体内ghrelin水平的差异。方法:将20只健康雄性Wistar大鼠以高脂饲料喂养10周后,根据体重增量的不同划入OP组与ORP组,每组6只。记录体重和摄食量,测定内脏脂肪含量、血糖、血脂、血浆胰岛素和血浆ghrelin水平,检测大鼠胃组织ghrelin蛋白表达水平。结果:OP大鼠体重增量、能量利用率、内脏脂肪含量明显高于ORP大鼠(P<0.01);与ORP大鼠相比,OP大鼠血浆ghrelin水平有降低趋势(P=0.07),而胃组织ghrelin表达极显著增高(P<0.01);大鼠胃组织ghrelin表达水平与体重增量(P<0.05)、肾周脂肪重量(P<0.05)呈正相关关系。结论:胃组织ghrelin表达水平可能是高脂饮食条件下大鼠发展为肥胖倾向或肥胖抵抗倾向的重要影响因素。

高脂饲料诱导的肥胖倾向和肥胖抵抗倾向大鼠内脏脂肪visfatin和AMPK表达及其相互关系

目的:探讨大鼠内脏脂肪组织visfatin和AMPK的表达对肥胖倾向(OP)和肥胖抵抗倾向(ORP)形成的可能作用。方法:20只雄性Wistar大鼠,高脂饲料喂养10周,依据腹脂/体重比值选大鼠进入OP和ORP两组,每组各7只,测定大鼠血脂、血糖、血浆胰岛素和visfatin浓度,肾周脂肪组织中visfatin表达和AMPK活性。结果:与ORP组大鼠相比,OP组大鼠血浆visfatin浓度有升高趋势(P=0.16),肾周脂肪组织visfatin表达显著升高(P<0.05),而AMPK活性显著降低(P<0.05),内脏脂肪visfatin表达与AMPK活性之间存在负相关关系。结论:内脏脂肪组织中visfatin表达升高和AMPK活性降低可能与肥胖倾向有关。Visfatin可能通过负性调节AMPK活化程度影响肥胖倾向的发生。

常规维持量补充肌酸对大鼠内源性肌酸合成的影响

目的:探讨常规维持量补充肌酸(0.15g/kg/d)对大鼠内源性肌酸生物合成系统的影响。方法:将100只SD大鼠按体重随机分为10组:5组为训练组,分别以0、0.03750、.075、0.15和0.3g/kg/d剂量补充肌酸4周。其余5组为相应对照组(补充肌酸、不运动)。训练组大鼠进行4周游泳训练。4周后测定各组大鼠肾脏精氨酸-甘氨酸转脒基酶(AGAT)的活性,肾脏、肝脏和血清胍乙酸(GA)含量,肾脏、血清和骨骼肌肌酸含量,骨骼肌和血清肌酸激酶(CK)活性以及血清肌酐含量。结果:0.075g/kg/d及其以上剂量补充肌酸4周即可抑制训练组和对照组大鼠肾脏AGAT活性(P<0.05),显著降低其肾脏和肝脏胍乙酸含量(P<0.01);训练组大鼠肾脏AGAT活性,肾脏和肝脏胍乙酸含量显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:常规维持量补充肌酸(0.15g/kg/d)可抑制运动训练和非训练大鼠内源性肌酸生物合成系统。

两种心衰标志物荧光免疫层析联合检测技术研究

目的:研制一种NT-proBNP与可溶性ST2(sST2)的荧光免疫层析联合检测试剂盒。方法:采用双抗体夹心法结合荧光免疫层析定量检测技术制备免疫层析联合检测试剂盒,并对试剂盒的空白限(LoB)、检测限(LoD)、回收率、精密度、交叉反应、稳定性及临床样本相关性进行评价。结果:研制试剂盒NT-proBNP的LoB及LoD分别为6.8 pg/ml、19.0 pg/ml,平均回收率为108%,批内CV<15%、批间CV<20%,200 ng/ml sST2对检测无干扰,试纸条室温或37℃存放14 d稳定性良好,与罗氏NT-proBNP电化学发光法试剂盒平行检测50例临床血清样本的相关性良好;sST2的LoB及LoD分别为0.47 ng/ml、1.67 ng/ml,平均回收率为103%,批内CV<15%、批间CV<20%,7500 pg/ml NT-proBNP对检测无干扰,试纸条室温或37℃存放14 d稳定性良好,与Critical Diagnostics ST2 ELISA试剂盒平行检测30例临床血清样本的相关性良好。结论:研制了一种NT-proBNP与sST2的荧光免疫层析联合定量检测试剂盒,为心力衰竭的临床快速检测提供了一种简便、快捷的方法。

中国房价居高不降制度因素及其治理建议

我国现行的分税制、城市土地批租制度、征地制度存在弊端,导致地方政府过度依赖土地财政,加快地价不合理上涨,从而导致高房价的产生。故治理高房价要从制度改革着手,使其理性回归,稳健发展。

肱骨近端骨折术后中医骨折三期治疗的效果分析

探究中医骨折三期治疗对肱骨近端骨折术后患者的治疗效果。方法:选择从2018年10月到2019年10月在我院接受治疗的治疗的肱骨近端骨折术后90名患者作为本次研究的对象,按照治疗方法的不同将所有患者平均分成两组,分别为观察组与对照组,在患者术后的治疗期间对对照组的患者采取传统的治疗方法,对观察组的患者采取中医骨折三期治疗的方法,对两组患者在接受治疗后的疼痛情况、并发症的发生情况、生活质量以及肢体的功能恢复情况进行比较。结果:在经过治疗后,观察组患者的各项指标均明显强于对照组患者,差异具有统计学意义,p<0.05.结论:对接受肱骨近端骨折术治疗的患者采取中医骨折三期治疗的方法,患者的疼痛情况明显改善,患者的并发症发生率明显降低并且其功能恢复较好,具有较高的临床应用价值。

人IL-6重组蛋白及IL-6荧光免疫层析检测试剂卡的研制

研制一种人IL-6荧光免疫层析检测试剂卡,用于IL-6分子的临床快速检测,并且研制一种重组表达人IL-6蛋白作为IL-6检测试剂卡的标准品。首先获得人IL-6基因序列,经密码子优化后连接到表达载体pET30a,然后转化到大肠杆菌BL21感受态细胞诱导表达。经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside, IPTG)诱导后,得到可溶性表达的IL-6蛋白。经镍柱亲和层析纯化和超滤,得到重组人IL-6蛋白。基于荧光免疫层析技术及双抗体夹心法原理,应用时间分辨荧光微球制备IL-6荧光免疫层析检测试剂卡。经性能评估,试剂卡的空白限为5.2 pg/mL,变异系数在7.34%~11.11%之间,重复性较好;回收率在96.3%~107.2%之间;试剂卡37℃放置6周稳定性较好,与常见竞争物无交叉反应,参考值范围0~9.0 pg/mL;与电化学发光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA)比较临床样本检测结果相关性较好,相关系数r值为0.965。综上,研制的IL-6重组蛋白具有较高的纯度及浓度,可作为试剂盒检测的标准品;制备的IL-6定量检测试剂卡性能可满足临床应用的需求,且具有简便、快捷等优点。

我国部分地区猪巨细胞病毒感染的检测

根据猪巨细胞病毒(PCMV)的DNA聚合酶基因序列合成1对引物,利用PCR方法对2011—2012年来自江苏、浙江、安徽、上海、山东和四川等省市193个患病猪群的仔猪病料进行了病原学检测。结果显示:PCMV阳性率为59.0%,其中江苏、浙江、上海和安徽的PCMV阳性率分别达到61.9%、64.4%、64.3%和66.7%,表明这些地区的PCMV感染率较高,为该病毒病的预防与控制提供了一定的理论基础。