基于VEGF-C/VEGFR-3通路探讨电针对急性心肌缺血小鼠心肌炎性损伤及细胞凋亡的影响

目的:观察电针对急性心肌缺血(AMI)小鼠心肌组织血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、促炎因子和细胞凋亡的影响,探讨电针治疗AMI的作用机制。方法:将50只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、抑制剂组和抑制剂+电针组,每组10只。除假手术组外,其余各组小鼠结扎冠状动脉左前降支(LAD)制备急性心肌缺血模型;假手术组开胸后仅穿线不结扎。电针组予电针“神门”“通里”干预,疏密波,频率2 Hz/15 Hz,电流强度1 mA,每次30 min,每天1次,连续3 d;抑制剂组腹腔注射SAR 131675(12.5 mg·kg^(-1)·d^(-1),每日1次,连续3 d);抑制剂+电针组于电针前30 min腹腔注射SAR 131675。检测小鼠造模前、造模后30 min、干预3 d后心电图,记录ST段位移值;干预结束后,ELISA法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及心肌组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素23(IL-23)含量;HE染色法观察心肌组织形态变化;免疫荧光双标法检测心肌组织VEGF-C/VEGFR-3共表达阳性细胞数;TUNEL法检测心肌细胞凋亡水平;Western blot法检测心肌组织VEGF-C、VEGFR-3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)、活化的多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(Cleaved PARP-1)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组小鼠ST段位移值升高(P<0.01);CK-MB、AST、TNF-α、IL-23含量升高(P<0.01);心肌纤维排列紊乱,间质炎性细胞浸润明显;VEGF-C/VEGFR-3共表达阳性细胞数减少(P<0.01);心肌细胞凋亡数增加(P<0.01);VEGF-C、VEGFR-3、Bcl-2蛋白表达减少(P<0.01),Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP-1蛋白表达增加(P<0.01)。与模型组比较,电针组小鼠ST段位移值降低(P<0.01);CK-MB、AST、TNF-α、IL-23含量降低(P<0.01);心肌病理损伤程度减轻;VEGF-C/VEGFR-3共表达阳性细胞数增加(P<0.01);心肌细胞凋亡数减少(P<0.01);VEGF-C、VEGFR-3、Bcl-2蛋白表达增加(P<0.01),Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP-1蛋白表达减少(P<0.01)。模型组与抑制剂组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,抑制剂+电针组小鼠VEGF-C蛋白表达增加(P<0.01)。与抑制剂组比较,电针组小鼠ST段位移值降低(P<0.01);CK-MB、AST、TNF-α、IL-23含量降低(P<0.01);心肌病理损伤程度减轻;VEGF-C/VEGFR-3共表达阳性细胞数增加(P<0.05);心肌细胞凋亡数减少(P<0.01);VEGF-C、VEGFR-3、Bcl-2蛋白表达增加(P<0.01),Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP-1蛋白表达减少(P<0.01)。与抑制剂+电针组比较,除VEGF-C蛋白表达外,电针组各指标均改善(P<0.01)。结论:电针可减轻AMI小鼠炎性反应和细胞凋亡,其机制可能与激活VEGF-C/VEGFR-3通路促进淋巴管生成有关。