miR-646 抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移的机制初探

目的探讨mi R-646对骨肉瘤细胞增殖和迁移的抑制作用。方法通过MTT实验检测mi R-646过表达或受到抑制后对U2OS细胞增殖的影响。Transwell实验分析mi R-646过表达或受到抑制后对U2OS细胞迁移的影响。MIRDB预测mi R-646与表皮生长因子受体(EGFR)的位点结合后,利用荧光素酶报告及实验检测mi R-646对EGFR的靶向作用,并通过Western blotting检测mi R-646对EGFR通路的作用。结果 MTT结果表明,转染mi R-646后U2OS细胞的增殖受到了显著地抑制,24 h时抑制率为21.76%±1.05%,相反,当mi R-646受到抑制后U2OS细胞的增殖得到了促进,24 h时促进的比率为18.89%±0.81%。Transwell实验发现mi R-646可以抑制骨肉瘤细胞系U2OS的迁移能力。随后MIRDB预测发现mi R-646与EGFR的3’UTR区域具有结合位点,荧光素酶报告基因实验证明了mi R-646可以直接作用于EGFR。Western blotting结果证明mi R-646对U2OS细胞增殖迁移能力的抑制在一定程度上是通过mi R-646对EGFR通路的抑制实现的。结论 mi R-646可以通过抑制EGFR通路的活性,进而抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移功能。

肌皮瓣修复关节周围软组织肉瘤组织缺损的临床研究

目的探讨系列肌皮瓣在肢体关节周围软组织肉瘤切除后组织缺损修复中的临床应用。方法肢体关节周围软组织肉瘤外科手术软组织缺损28例,其中初发7例,补充切除8例,复发13例。所有病例均行软组织肉瘤广泛切除肌皮瓣修复手术治疗,软组织缺损面积最大为26 cm×16 cm。依据不同部位设计修复所需肌皮瓣,应用背阔肌肌皮瓣修复肩部、股二头肌肌皮瓣修复髋部、腓肠肌肌皮瓣修复膝部。结果 28例中24例术后肌皮瓣成活,3例肌皮瓣远端边缘性坏死,1例远侧2/3坏死,经换药或植皮后愈合。平均随访38个月,有4例肿瘤局部复发,均为多次手术后复发患者,2例复发再次手术切除植皮,2例复发无法保肢行截肢手术治疗。移植肌皮瓣质地良好,皮肤色泽与受区相似,肌皮瓣血液循环良好,患肢关节恢复正常屈伸。结论肌皮瓣具有稳定的血供,易于切取和存活,修复肢体关节周围软组织肉瘤手术组织缺损同时改善肢体功能,为关节周围软组织肉瘤的外科规范化治疗提供了有益探索。

钒酸盐对Ⅰ型糖尿病大鼠骨矿盐代谢及骨显微结构的影响

目的评价钒酸盐对Ⅰ型糖尿病大鼠骨代谢及骨显微结构的影响。方法 45只雄性Wistar大鼠被分为3组:正常饲养组(n=15)、高血糖组(n=15)、高血糖钒酸盐治疗组(n=15)。对高血糖组和高血糖钒酸盐治疗组大鼠进行Ⅰ型糖尿病造模,正常饲养组大鼠尾静脉注射生理盐水作为对照。以8 w龄Wistar雄性大鼠按45 mg/kg体重注射佐链尿菌素,制作糖尿病大鼠模型。造模成功后,给予高血糖钒酸盐治疗组糖尿病大鼠应用钒酸盐治疗,每只大鼠按0.18 mg/(kg·d)钒计量喂养,每只大鼠通过灌胃治疗,治疗共持续12 w。正常饲养组和高血糖组则以生理盐水灌胃进行对照。连续喂养12 w,期间每周分别对3组大鼠进行体重、血糖监测。喂养结束以后,分别取3组大鼠胫骨、股骨进行Micro-CT检测、免疫组化和组织形态学检测、生物力学检测、骨矿含量等相关指标检测。结果经过12 w治疗,结果显示钒酸盐能够明显改善大鼠的高血糖状态,提高体重指标,而且治疗组平均骨小梁厚度、最大负荷载力、骨盐含量指标均明显高于高血糖组(P<0.05)。但钙盐的含量并没有显著提高(P>0.05)。结论钒酸盐能够降低高血糖大鼠的血糖值,改善糖尿病大鼠的骨代谢、骨小梁显微结构及骨组织的力学性能,可为糖尿病性骨质疏松症提供新的治疗方法。

熊果酸抑制骨肉瘤细胞的生物学功能

目的检测熊果酸对骨肉瘤细胞生长转移的影响。方法将不同浓度熊果酸分别作用于人骨肉瘤细胞系U2OS细胞,MTT实验检测细胞增殖情况,Hochest 33258染色检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞转移情况。利用Western blot方法检测熊果酸对相关蛋白的作用。结果 10、20、30μg/mL熊果酸处理U2OS细胞24 h后,对其增殖的抑制率分别为39.51%±0.75%、48.91%±3.64%、56.49%±1.54%。熊果酸通过抑制cyclin d1蛋白抑制U2OS细胞的增殖,通过调节bcl-2和bax蛋白促进U2OS细胞的凋亡。Transwell实验发现,熊果酸可以剂量依赖的方式抑制U2OS细胞的迁移,其抑制作用是通过其对MMP2蛋白的抑制实现的。结论熊果酸可以抑制骨肉瘤细胞系U2OS细胞的增殖与转移,可以作为临床骨肉瘤治疗的潜在化疗药物进行进一步探索。

有机镓促进卵巢切除大鼠骨折愈合及生长的实验研究

目的本研究的目的是证实有机镓对卵巢切除大鼠骨折愈合的作用。方法 40只雌性Wistar大鼠被分为2组:(1)假手术组(对照n=10只),(2)卵巢切除组(n=30只),无菌条件下腹侧入路行完整双侧卵巢摘除;假手术组摘除与卵巢重量相同的卵巢周围脂肪组织各1块。12w后对40只大鼠制造开放性骨折并予克氏针内固定。术后分为假手术组(n=10)和一个卵巢切除组(n=15)用PBS治疗,另外一个卵巢切除组(n=15)用有机镓治疗。治疗共持续4w,取骨折愈合的大鼠股骨分别进行micro-CT测定骨小梁组织结构;组织形态学测定骨组织愈合面积;生物力学测定愈合股骨的最大负荷载力;骨矿含量检测评价钙盐含量。结果经过4w治疗,micro-CT显示有机镓治疗组平均骨小梁厚度(Tb.Th)、平均骨小梁数目(Tb.N)均明显高于对照组(P<0.05)。卵巢切除组的愈合组织骨面积较假手术组降低9.2%,有机镓治疗组比卵巢切除组高34.9%(P<0.05)。有机镓治疗组股骨骨折愈合强度显著高于卵巢切除组,最大负荷载力增加50.6%,结构强度增加36.5%,能量吸收增加90.9%,但是均低于假手术组。与卵巢切除组相比,有机镓治疗组显著提高愈合组织的骨矿含量。结论有机镓能够抑制骨折后的骨量丢失,促进骨折愈合组织的生长,改善骨小梁三维结构及骨组织的力学性能,可用来促进骨质疏松性骨折的愈合并改善骨质量,预防再骨折。

圆红冬孢酵母高效电转化条件的优化

【目的】建立圆红冬孢酵母的高效电转化方法,为利用圆红冬孢酵母重组表达功能性基因提供方法基础。【方法】以圆红冬孢酵母作为受体菌,将具有潮霉素抗性标记的改造质粒p CAMBIA1301-KCS通过电转化的方式导入到受体菌中,研究酵母细胞培养时间(2、8、14、20、26 h)、电击电压(1、1.5、2.0、2.5、3.0 kV)、前处理剂种类(DTT、LiAc、CaCl2、H2O)对转化效率的影响。【结果】当培养时间为20 h [培养液D(600 nm)约为1.6]、电击电压为2.0 kV、前处理试剂为DTT时,该系统转化率最高可达到20.8×104 cfu/μg。【结论】采用电击法将环状质粒转化入圆红冬孢酵母,能够成功实现外源基因的遗传转化,采用优化的转化条件可以获得较高的转化效率,是过去相关报道最高转化率的100倍。

miR-212抑制骨肉瘤细胞恶性生物学行为的实验研究

目的探讨miR-212对骨肉瘤细胞增殖和迁移的抑制机制。方法 MIRDB预测miR-212与锌指蛋白133(ZNF133)的结合位点后,利用荧光素酶报告基因实验检测miR-212对ZNF133的靶向作用。通过MTT实验和Transwell实验检测miR-212过表达或受到抑制后对MG63细胞增殖和迁移的影响。通过Western blotting实验检测miR-212对ZNF133及CDK4/6和MMP2的作用。结果MIRDB预测发现miR-212与ZNF133的3’UTR区域具有结合位点,荧光素酶报告基因实验证明了miR-212可以直接作用于ZNF133。MTT实验表明转染miR-212后显著抑制MG63细胞增殖;miR-212受到抑制后促进MG63细胞增殖。Transwell实验发现miR-212可以抑制骨肉瘤细胞系MG63迁移。Western blotting实验证明miR-212对MG63细胞增殖迁移能力的抑制在一定程度上是通过miR-212对ZNF133及CDK4/6和MMP2的抑制实现的。结论 miR-212可以通过抑制ZNF133及相关蛋白抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移。

热射病合并横纹肌溶解综合征及前臂骨筋膜室综合征1例报道

本文报道了1例热射病合并横纹肌溶解综合征及前臂骨筋膜室综合患者的诊治经过,旨在为此类患者的治疗提供参考。

柚皮苷与顺铂联用对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响

目的观察柚皮苷与顺铂联用对MG63细胞增殖和迁移的效果。方法将传代的MG63细胞分为顺铂处理组(顺铂组)、柚皮苷处理组(柚皮苷组)和两种药物联合处理组(联合组),分别使用不同浓度的药物在不同时间点用MTT方法检测MG63细胞光密度值(OD 490),观察细胞增殖情况;在药物作用24 h后观察细胞迁移情况。随后通过Western blot实验检测药物对cyclin d1蛋白和MMP2蛋白表达情况的调节作用。结果对细胞处理24 h后,20μg/m L柚皮苷组、5μg/m L顺铂及二者联合处理对MG63细胞的增殖抑制率分别为7.52%±2.31%、26.89%±0.19%、42.51%±2.53%,联合组抑制率高于各单药组(P<0.01)。顺铂与柚皮苷均可以抑制MG63细胞的迁移,二者联合作用后对细胞迁移的抑制作用更为明显。蛋白检测显示,顺铂和柚皮苷作用MG63细胞24 h后,均可以在一定程度上抑制cyclin d1和MMP2的表达,联合作用后抑制作用增强。结论柚皮苷与顺铂联合使用对抑制骨肉瘤细胞增殖和迁移有协同效果,可以降低顺铂的使用浓度,进而减少治疗时化疗药物的毒副作用。

孙中山与黎元洪及武汉“中心说”

孙中山与黎元洪这两位历史巨人,为推翻中国两千多年的封建帝制起到了别人不可替代的作用,他们在武汉结下的友谊传为美谈,至今为海内外中国人所景仰。

黎元洪妻妾传奇

老鸨强加的"交际花"黎氏有一个如花似玉的交际花如夫人黎本危,江西贵溪人,她小时候因家乡闹饥荒,家里上无片瓦,下无立锥之地,又恰巧父母双亡,可怜她为了葬父,被人骗卖到汉口烟花巷内操皮肉生涯,艺名危红宝,因无牌证而为黑牌妓女(即暗娼)。接下来,她凭借其绝色容颜和婉转歌喉,一跃成为汉口"书寓"春院红得发紫的风尘女子。曾几何时,不知有多少政界名流、军界将领、富商巨贾拜倒在她的石榴裙下。可是,她却出污泥而不染,对这些遗老遗少均不为所动,只是逢场作戏,卖技卖艺不卖身,想自己趁还年轻拼命赚钱赎身,找一个如意郎君,过上一个常人的平静生活。经过三个年头的拼命挣钱,终于赎回全部身价,决定弃贱从良,不再接客。可是,春院老鸨仍然把她当作一棵摇钱树,运用各种手段,让红宝上钩。

黎元洪妻妾传奇

本文作者以长篇历史传记《黎大总统史话》向辛亥革命90周年献礼,该书以演义的形式,揭开了长期藏于深宫后院的神秘面纱,现摘其中一瞥,让读者先睹为快。

“江城”涌动投资潮

“江城”涌动投资潮裴祎，郭严丁在本世纪初，因武昌首义推翻中国历史上绵延２０００余年的封建帝制而闻名全球的江城武汉，曾被中国民主革命的先行者孙中山先生认定为“沟通大洋计划的顶水点”；在本世纪末，已建立起雄厚工业基础的江城武汉又被列入沿江开放城市。伴随着...

“色”情李玟

她是第一位推出英文专辑的中国歌手，她是哈佛大学杰出华人奖得主，美国《时代》杂志的封面人物和跨越２１世纪的和平大使；还是世界１００位性感美女的“十佳”今年春节晚会上，她第６个出场表演了歌舞《好心情》，顿时，又一次在观众中再掀波澜，涌现出一批批追星族——

骨与软组织肉瘤伴肺转移患者应用阿帕替尼联合化疗的临床疗效

目的探讨骨与软组织肉瘤伴肺转移患者应用阿帕替尼联合常规化疗和单纯常规化疗的临床疗效和药物安全性。方法收集2015年1月至2017年12月就诊于中国医科大学肿瘤医院的33例骨与软组织肉瘤伴肺转移患者的临床资料。骨肉瘤患者接受甲氨蝶呤、阿霉素、顺铂和异环磷酰胺序贯方案,软组织肉瘤接受阿霉素+异环磷酰胺联合方案。化疗联合阿帕替尼治疗的患者(阿帕替尼组)18例,常规化疗治疗的患者(常规治疗组)15例。研究患者的原发灶及转移灶变化、不良反应和预后情况。结果接受治疗前,阿帕替尼组和常规治疗组患者的肺部转移灶最大直径分别为(4.46±1.70)cm和(4.53±2.00)cm,差异无统计学意义(P=0.909);治疗后,阿帕替尼组和常规治疗组患者的肺部转移灶最大直径分别为(1.46±1.39)cm和(3.02±1.20)cm,差异有统计学意义(P=0.002)。接受治疗后,阿帕替尼组和常规治疗组患者原发灶最大直径缩小的中位数分别为0.31cm和0.12cm,差异无统计学意义(P=0.542);接受治疗后,阿帕替尼组和常规治疗组患者肺部转移灶最大直径缩小的中位数分别为0.59cm和0.18cm,差异有统计学意义(P=0.027)。33例患者的中位无进展生存时间(PFS)为9.4个月。阿帕替尼组和常规治疗组患者的中位PFS分别为9.6个月和8.3个月,差异无统计学意义(P=0.593)。阿帕替尼组和常规治疗组患者对于化疗均产生了一定程度的不良反应,其中最主要的不良反应为口腔黏膜反应和消化道反应(包括恶心呕吐和腹泻)。结论阿帕替尼可在不降低患者的生存率、不良反应可控的情况下,有效缩小骨与软组织肉瘤伴肺转移患者的原发灶和转移灶体积,药物安全性和临床疗效显著。

晚期骨肉瘤抗血管生成靶向治疗的研究进展

骨肉瘤是一种间质起源的原发性骨恶性肿瘤,发病人群较年轻,肿瘤的恶性程度高、预后差,同时易复发和转移,治疗较为困难。骨肉瘤血运丰富,其生长、侵袭、浸润、转移均依赖于肿瘤新生血管形成,血管生成主要由肿瘤细胞分泌的各种促血管生成因子始动,根据各种促血管生成因子的作用靶点及信号通路采取抗血管生成靶向治疗,能够有效抑制骨肉瘤的各种生物学行为,提高患者的生存率。但抗血管生成治疗过程中也存在耐药、不良反应较大、疗效评估标准不一、治疗策略难以选择等问题,需要进一步研究解决。文章主要对骨肉瘤抗血管生成药物的临床研究、存在的问题及治疗策略等内容进行综述。

扩大刮除植骨与瘤段切除重建治疗股骨近端骨巨细胞瘤的疗效分析

目的 比较扩大刮除植骨与瘤段切除重建两种术式治疗股骨近端骨巨细胞瘤患者的临床效果,分析影响下肢运动功能的康复、围手术期并发症及肿瘤复发的因素.方法 回顾性分析中国医科大学肿瘤医院2013年1月—2017年12月收治的35例股骨近端骨巨细胞瘤患者的临床资料,其中男18例、女17例,确诊年龄为(39.85 ± 11.59)岁.根据肿瘤发病部位及影像学分型,结合骨巨细胞瘤中国协作组成员单位(GTOC)评分,分别对患者采用扩大刮除植骨(15例)或瘤段切除重建治疗(20例).术后定期随访,比较两种术式的手术时间、术中出血量、术后辅助行走时间、短期并发症及末次随访下肢功能国际骨与软组织肿瘤协会( MSTS)评分、肿瘤复发情况.对比分析病理性骨折、骨肿瘤国际保肢协会(ISOLS)股骨近端肿瘤分区、Campanacci分级、手术方式及肿瘤体积,对患者肿瘤转归及下肢功能恢复情况的影响.结果 全部患者术后随访4~60(33.50 ± 16.65)个月,2例患者分别于术后6个月和8个月死于其他原发肿瘤转移恶化,1例术后6个月意外死亡.末次随访时,术前合并病理性骨折的患者术后下肢功能MSTS评分为(20.00 ± 3.33)分,低于未合并病理性骨折患者的(22.88 ± 3.81)分,差异有统计学意义(t=2.381, P<0.05).扩大刮除植骨术中出血量(316.55 ± 80.35)mL,低于瘤段切除重建术的(384.53 ± 76.37)mL,差异有统计学意义(t=2.530, P<0.05);扩大刮除植骨术后短期并发症2例,瘤段切除重建术后8例,两者相比差异有统计学意义( χ2 =7.887, P<0.05).手术方式、是否存在病理性骨折、ISOLS分区、肿瘤体积及Campanacci分级对肿瘤复发情况的影响无组间差异(P值均>0.05).结论 扩大刮除植骨与瘤段切除重建两种术式治疗股骨近端骨巨细胞瘤可获得相似的下肢功能恢复效果,肿瘤复发率亦无差异;但瘤段切除重建手术创伤较大,术中出血量及术后短期并发症发生率较高.术前发生病理性骨折,对患者术后下肢功能恢复产生负面影响.

甲状旁腺激素1型受体对骨肉瘤细胞炎症因子和血管生成的影响及其机制研究

目的探讨甲状旁腺激素1型受体(PTHR1)对骨肉瘤细胞炎症因子和血管生成的影响及其机制。方法培养骨肉瘤MG63细胞,分为PTHR1阴性对照组(si-NC组)和PTHR1小干扰RNA组(si-PTHR1组),采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测si-NC组和si-PTHR1组细胞中PTHR1、血管紧张素原(AGT)mRNA的相对表达水平,采用Western blot检测两组细胞中肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-8(IL-8)蛋白的相对表达量,采用血管生成实验检测两组细胞血管生成能力。结果si-NC组MG63细胞中PTHR1、AGT mRNA相对表达量分别为0.94±0.08、1.12±0.11,均大于si-PTHR1组的0.58±0.06、0.55±0.04,差异均有统计学意义(t=6.24、8.44,P值均<0.01)。si-NC组TNF、IL-1β和IL-8蛋白的相对表达量分别为1.18±0.16、1.14±0.13和1.18±0.08,大于si-PTHR1组的0.58±0.04、0.56±0.05、0.52±0.04,差异均有统计学意义(t=6.30、7.21、10.84,P值均<0.01)。si-NC组细胞血管生成率为92.90%±6.42%,大于si-PTHR1组的57.27%±3.10%,差异有统计学意义(t=8.660,P<0.001)。结论下调PTHR1在骨肉瘤细胞中的表达,可以减少骨肉瘤细胞炎症因子的释放和血管生成,其机制可能与下调AGT的表达有关。

转化型抢劫罪的既未遂标准与普通抢劫罪一致

【裁判要旨】转化型抢劫罪不仅存在既未遂的犯罪形态，且转化型抢劫罪的既遂与未遂标准应当与普通抢劫罪的既遂与未遂标准一致，即以最终是否取得财物和是否导致他人轻伤以上后果中的任何一种为既遂的标准。