嵌有非天然氨基酸蛋白质的生物合成及其纯化鉴定

基于基因密码子扩展技术,构建能够嵌入非天然氨基酸pBpa蛋白质的大肠杆菌BL21(DE3)双质粒原核表达工程菌株,原核表达后,通过Ni-NTA纯化介质的初步纯化以及AKTA蛋白纯化系统的Superdex75分子筛进一步精细纯化,获得了在IL-1β的5号预设位点上嵌入了非天然氨基酸pBpa的嵌合体蛋白,并且通过质谱确认pBpa在预设位点的精准插入.本研究证明基于密码子扩展技术构建的双质粒工程菌可以将非天然氨基酸pBpa插入到IL-1β的特定位点,能够生物合成并纯化出大量的非天然氨基酸嵌合体蛋白质,这为其他非天然氨基酸或其他功能蛋白及其特异性位点的非天然氨基酸嵌合蛋白的生物合成奠定了基础.

郑州北龙湖湿地公园疣鼻天鹅越冬行为节律及其对人类活动的响应

2021年11月至2022年3月,采用瞬时扫描法对郑州北龙湖湿地公园的疣鼻天鹅进行了越冬行为节律以及对人类活动响应的调查研究。结果表明,北龙湖的疣鼻天鹅在越冬期以运动(33.55%±7.95%)、取食(30.17%±7.75%)和静息(17.37%±8.05%)行为为主。运动行为高峰在8:50—10:10、14:20—14:50、16:20—16:40,取食行为高峰在10:50—11:10、16:40—17:00。其中,运动和静息行为(r=-0.676,P<0.01)、取食与理羽行为(r=-0.487,P<0.01)间呈极显著负相关,取食与静息行为(r=-0.356,P<0.05)间呈显著负相关。越冬前期和越冬后期,疣鼻天鹅的行为仅在警戒(P=0.040<0.05)与运动(P=0.045<0.05)行为方面具有显著性差异。疣鼻天鹅成体与亚成体在警戒(P=0.000<0.01)、求偶(P=0.006<0.01)和静息(P=0.020<0.05)行为方面存在显著性差异,成体比亚成体承担了更多的警戒任务。在北龙湖湿地公园工作日与非工作日不同人流量下,疣鼻天鹅各行为均无显著性差异,表明疣鼻天鹅已经对湿地公园人类的活动产生了适应性。