细胞外囊泡对子宫内膜异位症相关性不孕的作用及其机制

目的探讨细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)相关性不孕中的作用及其机制。方法利用Exo-spinTM技术从10例健康育龄女性(H-EVs组)和10例EMs相关性不孕患者(E-EVs组)阴道黏液中分离EVs。以磷酸盐缓冲盐水(PBS)为对照(PBS组,n=10),将人类精子分别与H-EVs、E-EVs和PBS共培养,利用计算机辅助精液分析和伊红染色评估3组精子活力。以10只正常雌性小鼠为空白对照(NC组),将含有60μL PBS、60μL H-EVs溶液、60μL E-EVs溶液的医用可吸收明胶海绵分别送入模型组(M组,n=10)、H-EVs阴道移植组(H-EVs-VT组,n=10)和E-EVs阴道移植组(E-EVs-VT组,n=10)雌鼠阴道,持续1个月;再将雌雄性小鼠同笼配对(雌雄比例4∶1),并在妊娠第9天收集雌鼠子宫、卵巢组织,通过组织病理学、流式细胞术、实时定量反转录PCR及蛋白质印迹法比较4组雌鼠的生育力。结果人EVs形态呈直径为50~200 nm的圆形或椭圆形结构,E-EVs可降低精子运动能力及存活率,而H-EVs能增加精子运动能力及存活率(P<0.05)。动物实验显示:与NC组比较,E-EVs可诱导促炎因子TGFβ1、IL-6、IL-17A和转录因子ROR-γt的释放导致Th17/Treg失衡,降低EMs小鼠的妊娠率及胚胎着床数目(P<0.05);而H-EVs可增加抗炎因子IL-10和转录因子Foxp3的表达从而缓解Th17/Treg失衡,增加EMs小鼠的妊娠率及胚胎着床数目(P<0.05)。结论阴道黏液EVs可调控精子活力,并介导EMs相关的炎症因子释放来调节Th17/Treg平衡,从而影响生育能力,这为EMs相关性不孕的机制提供新的解释。