中华眼镜蛇膜毒素与McAb偶联物对白血病细胞的杀伤作用

用中华眼镜蛇膜毒素(CT)与抗人T细胞McAb Wu71偶联制备免疫毒素Wu71:CT。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫双扩散和间接免疫荧光检测,证实结合物中McAb和CT均保持活性。在无Ca^(2+)、Mg^(2+)的培养基中将人白血病T淋巴细胞系CEM细胞与Wu71:CT共同孵育,先加入Ca^(2+)以抑制CT的溶细胞作用,而不影响McAb与靶细胞的结合;一定时间后用Mg^(2+)和金属螯合剂EGTA恢复CT的溶胞作用,结果在Wu71:CT 0.5×10^(-6)mol/L浓度下靶细胞CEM 82.4％被杀伤,而抗原阴性的非靶细胞Raji仅死亡23.3％,表明Wu71:CT有较好的特异性杀伤作用。扫描电镜显示,免疫毒素作用下的CEM细胞膜破裂、萎缩、崩溃,而非靶细胞大部分保持完整。提示McAb与CT偶合物在白血病和肿瘤的导向治疗中可能具有潜在价值。

抗人T细胞单克隆抗体与商陆毒蛋白结合物的制备及其抗白血病细胞活性

将美洲商陆抗病毒蛋白通过二硫键与抗人T细胞单克隆抗体Wu71偶联制备免疫毒素。结合物经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫双扩散和间接荧光检测,表明该结合物对人T淋巴细胞白血病CEM细胞显示很强的杀伤作用,在10^(-9)mol/L浓度下可杀灭76.4%的靶细胞,而对抗原阴性的SP_2/O细胞杀灭作用很弱。^(14)C-亮氨酸掺入蛋白质合成抑制试验显示结合物在10^(-9)mol/L时可抑制72.4%的蛋白质合成。这一免疫毒素有可能用于白血病自体骨髓移植时白血病细胞的体外清除。

应用流式细胞术检测同步化处理的肺癌细胞系细胞周期

本文应用吖啶橙酸变性染色方法流式细胞术检测经5-氟脱氧尿嘧啶核苷同步化技术处理的肺癌细胞系GLC-82和HAC-84的细胞周期。结果显示经同步化处理的肿瘤细胞M期比例明显增加,且M期细胞比例与同步化后处理时间密切相关。

免疫脂质体对白血病细胞杀伤的扫描电镜观察

采用脂质体技术包裹中华眼镜蛇膜毒素（ＣＴ）并与抗人Ｔ细胞单克隆抗体结合制备成ｐＨ敏感型免疫脂质体．它在ｐＨ８．０～７．０间十分稳定，但在接近细胞浆微酸性环境（ｐＨ＜６．０）时很容易破裂而释出包裹之内容物．用这一免疫脂质体处理人白血病Ｔ淋巴细胞系ＣＥＭ细胞并用扫描电镜观察脂质体对靶细胞的作用，显示这一免疫脂质体可特异性杀灭靶细胞而对抗原阴性细胞影响不大．

白血病骨髓细胞中p53蛋白的表达及其意义

采用人类特异的p53单克隆抗体pAB1801,用ABC免疫组化法即生物素-抗生物素法对36例白血病骨髓细胞进行了免疫组化检测,结果突变p53蛋白表达阳性率为55.56％。p53突变与白血病的类型有重要关系:在急性粒细胞白血病中p53有较高表达,在急性淋巴细胞白血病中p53表达较低,在慢性粒细胞白血病的慢性期突变p53的表达很低,而急变期可出现类似急性粒细胞白血病的突变p53基因表达。研究结果提示p53蛋白表达有可能作为慢性粒细胞白血病急变期的早期诊断指标之一。

中国不同民族基因组的保存及遗传多样性研究

褚嘉祐,1989年～1991年在中国医学科学院分子肿瘤学国家重点实验室做博士后研究,现任医科院医学生物学研究所所长、博士生导师。曾获“做突出贡献的中国博士学位获得者”及“全国首届中青年医学科技之星”称号。

三种单抗偶联PAP-S制备的免疫毒素对人白血病T淋巴细胞的细胞毒性作用

混合应用3种抗人T细胞单克隆抗体与美洲商陆抗病毒蛋白(PAP-S)制备免疫毒素进行体外实验。这些免疫毒素均对人类T淋巴细胞具特异性杀灭作用。在浓度为10^(-9)mol/L时,3种免疫毒素混合可杀灭94.5％的自血病T细胞系CEM细胞而不致严重影响骨髓造血细胞功能。这些免疫毒素有可能用于白血病细胞的体外杀灭及白血病异体骨髓移植时T细胞的清除,以避免移植物抗宿主反应的发生。

云南个旧非小细胞肺癌ras癌基因产物P_(21)蛋白的表达

应用ＡＢＣ免疫组化法对来自云南个旧的２０例非小细胞肺癌标本进行了ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１蛋白的表达检测结果阳性１５例，阳性率７５０％，表达率较高其中１６例鳞癌中。

商陆毒蛋白与蓖麻毒蛋白A链作为免疫毒素“弹头”的比较研究

免疫毒素系由具有导向能力的载体和具有杀伤能力的毒素或药物偶联形成的复合物。单克隆抗体的问世使载休的高度特异性得到解决,选择合适的“弹头”

应用线粒体DNA D-loop区遗传多样性分析云南4个少数民族的遗传关系

对傣、佤、拉祜和藏族４个群体的９９名个体ｍｔＤＮＡ非编码区（Ｄ－ｌｏｏｐ）高变区I１６０４８～１６５６９及１～４１的５６３ｂｐ片段进行序列分析。计算了核酸多态度，并用Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－Ｊｏｉｎｉｎｇ 法构建系统进化树，在进化树中，９９个ｍｔＤＮＡ序列分别聚在４个群中。所有在ＣＯ Ⅱ ／ｔＲＡＮ Ｌｙｓ 基因间序列存在９ｂｐ缺失的个体均聚在Ｃ１群中，Ｃ２群由１个佤族个体和４个藏族个体组成，Ｃ３群中除２个藏族个体外均为其他３个民族个体，４个群体的大部分个体聚在Ｃ４群。根据核酸多态度计算的净遗传距离重建的进化树显示，傣族、佤族和拉祜族的亲缘关系较接近，与藏族距离较远。结果表明遗传距离与他们的地理分布是非常一致的。而拉祜族与相传同为氐羌后裔并有相近语言的藏族跗距离却较远，这一结果提示这两个民族可能具有不同的起源。

甲型肝炎减毒活疫苗免疫程序的探讨

５２名ＨＡＶ抗体阴性的儿童，按０、３个月免疫程序，经２针低剂量（５．５０ｌｇＣＣＩＤ５０／ｍｌ）甲型肝炎减毒活疫苗免疫，于第２针接种后７天检测ＨＡＶ抗体阳转率为１００％，抗体效价ＧＭＴ值为１∶１４；全部接种儿童的ＡＬＴ均在正常范围内（２～２４μｌ）；免前ＨＡＶ抗体阳性的儿童，经２针免疫后。

膀胱移行细胞癌p16缺失及其蛋白表达意义

目的 了解膀胱移行细胞癌中抑癌基因 p1 6缺失及其蛋白表达情况。方法 应用双重PCR和免疫组化 S- P法对 31例膀胱移行细胞癌组织分别进行缺失和突变检测。结果 发现有 7例存在 p1 6基因的缺失 ,缺失率为 2 2 .6%。其中有 1例外显子 1缺失 ,有 5例外显子 2缺失 ,1、2外显子共缺失的有 1例。p1 6蛋白阴性率为 38.7%。结论 抑癌基因 p1 6的变异及其蛋白的不表达与膀胱移行细胞癌的发生有一定关系。

用非放射性标记MYO探针进行DNA指纹分析

用非放射性标记ＭＹＯ探针进行人的ＤＮＡ指纹分析，获得了清晰易读的ＤＮＡ指纹图，并用该方法调查了云南省的７８名无关个体，经统计学分析，计算出无关个体的相关几率是３．４×１０－１０，高于３２Ｐ标记的Ｍｙｏ探针。研究结果表明该方法是一种简便、快速、灵敏、可靠、经济的ＤＮＡ指纹图检测技术，可在法医鉴定及其它领域里得到更广泛的应用。

应用G6PD／6PGD比值法检测云南勐腊县6－磷酸脱氢酶缺乏症的基因频率

采用Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ法对云南勐腊县１２３例随机采集的男性血液标本进行了红细胞６－磷酸脱氢酶缺陷的基因频率检测。先用四氮唑蓝纸片法筛选疑诊病例，对筛选出的病例进一步应用四氮唑蓝定量测定法测定Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值。结果在检测的１２３人中，Ｇ６ＰＤ缺乏者２０人，即在此人群中Ｇ６ＰＤ缺乏的基因频率为０．１６２６，仍属国内Ｇ６ＰＤ缺陷高发地区，但显著低于过去报道的０．６６９。以前国内多数实验室均采用高铁血红蛋白还原试验来进行筛选，由于只能间接测定酶的活性，很易造成假阳性，致报告发病率偏高。木研究使用的四氮唑蓝法特异性比较高，结果较可靠。

西双版纳少数民族β地中海贫血的临床和基因诊断

目的 :了解西双版纳地区少数民族中β 地中海贫血的基因突变类型。方法 :对 11例傣族、基诺族临床病例 ,应用等位基因特异性扩增技术进行突变类型的基因诊断。结果 :显示有Ⅱ型 (TATAbox 2 8,A→G) 1例、Ⅳ型 (Condon17,A→T) 2例、Ⅶ型 (Condon41 42 , TTCT) 4例 ,Ⅸ型 (Condon71 72 ,+A) 1例 ,X型 (IVSⅡn .6 5 4,C→T) 3例 ,证实了西双版纳少数民族中五种 β 地中海贫血基因突变类型的存在。

一个重型β地中海贫血家系中的β珠蛋白基因变异

用DNA序列测定技术检测云南 1个重型 β地中海贫血病例的家系中 β珠蛋白基因变异 ,确定基因型并预测发病风险。结果显示 :该家系中存在 5种 β珠蛋白基因变异 ,除IVS - 2nt6 5 4(C→T)外 ,首次发现 β地贫病例中存在TATAbox -31(A→C)和IVS - 2nt749(C→T)突变及两者组成的基因型 ;在中国人中发现Code 2 (CAC→CAT) ,IVS - 2nt6 6 6 (T→C)多态位点和基因型 ,并推测 - 31(A→C)突变表型是 β+ 。

微卫星标记分析在人类基因组多样性研究中的应用

人类基因组多样性（HGD）研究中一项引人注目的技术是以微卫星DNA为标记的基因分型。微卫星DNA种类多、分布广、呈高度多态性，并容易用PCR方法检测，故得以广泛应用。本文主要对微卫生DNA的分子生物学特征，在HGD研究中的应用方法及其应用前景作一综述。

云南省基诺族青少年学生血脂水平调查

为了解云南省基诺族青少年学生血脂水平 ,分别测定了基诺族青少年学生和昆明市同龄汉族学生血清中CHOL ,TG ,HDL -C ,LDL -C ,Lp (a) ,APOA1,APOB的含量 ,比较它们之间的差异 ,并进行身高、体重、每日平均运动时间与血脂水平的相关分析 .结果 :基诺族青少年学生血脂水平与昆明市同龄汉族学生存在差异 ,可能与基诺族青少年学生的生活环境、生活方式、运动、种族等因素有关 .

应用PCR-SSCP银染检测膀胱癌中H-ras基因突变

目的 :了解膀胱癌中H ras基因突变情况。方法 :应用PCR SSCP银染和DNA测序技术对 31例膀胱癌组织进行检测。结果 :H ras基因突变发生率为 38 7% ,突变位点在H ras基因的第 1外显子的第 12位密码子 ,由GGC变为GTC。结论 :H ras基因突变与膀胱癌的发生发展存在着一定的联系 ,H ras基因突变可望作为膀胱癌早期临床诊断有价值的指标。

Luminex液相芯片技术检测与胰岛素抵抗相关的脂肪细胞因子水平在妊娠期糖耐量受损孕妇中的相关性研究

目的研究汉族妇女血清中的与胰岛素抵抗相关脂肪细胞因子水平,并且比较在妊娠期正常血糖水平组和糖耐量受损组中的水平差异。方法采用Luminex液相芯片技术对IL-6、TNF-α、瘦素、MCP-1等脂肪细胞因子在共80例孕妇血清中的表达水平进行检测,并进行差异性检测。结果瘦素水平在2组中具有显著性差异(P<0.01),其他各细胞因子则无明显区别(P>0.05)。结论血清瘦素水平与妊娠期糖耐量受损(GIGT)密切相关,如果改善血清瘦素水平,提高胰岛素敏感性,将对GIGT的防治有重要的临床意义。而IL-6、TNF-α、MCP-1等细胞因子水平与GIGT则无关,其与GIGT的关系需要进一步的研究。