血红蛋白氧亲和力在临床应用的研究进展

人体内氧的运输主要依赖红细胞内血红蛋白与氧的结合和解离,血红蛋白与氧结合的能力即血红蛋白氧亲和力是血红蛋白的重要特征之一。氧亲和力通过血红蛋白氧饱和度为50%时的氧分压(P_(50))表征。所以,P_(50)反映出人体的氧摄入和组织细胞的氧获取的能力,其改变受多种因素影响,包括体内H+浓度、二氧化碳分压(PCO_2)、温度、2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)等变构效应剂及多种药物。P_(50)的检测和调节在输血和潜在的疾病诊断及治疗等临床应用方面具有巨大的研究空间和潜力。

纯化工艺对牛血红蛋白携氧/释氧能力的影响研究

目的考察纯化过程中不同实验条件对牛血红蛋白携氧/释氧能力的影响,筛选获得稳定携氧/释氧能力血红蛋白的方法,为血红蛋白氧载体(HBOC)的原料制备提供工艺方案。方法采用低渗溶血、微滤、阴离子层析、超滤等步骤,从新鲜牛血中分离得到纯化的牛血红蛋白。在纯化过程中,运用红细胞携氧/释氧功能评价装置对牛血红蛋白进行分析,同时检测纯化样品的高铁血红蛋白(MetHb)含量、纯度、回收率等,对纯化工艺条件进行筛选。结果研究确定较优的纯化条件为:溶血选用PB溶血液,微滤选用聚偏二氟乙烯(PVDF)材质滤膜,层析条件筛选为缓冲液A(20 mmol/L Tris-HCl,pH 8.0),缓冲液B(20 mmol/L Tris-HCl+0.15 mol/L NaCl,pH 8.0),超滤选用PBS缓冲液。该方法对牛血红蛋白的携氧/释氧能力基本无影响,分离纯化的牛血红蛋白氧饱和度达50%时的氧分压(P50)为(28.69±0.11)mmHg,变异系数(CV)为0.40%,Hill系数为2.49±0.04,CV 1.52%,纯度达到99%以上,MetHb含量低于1%。结论在纯化过程中不同实验条件可对牛血红蛋白携氧/释氧能力造成差异影响,该研究为筛选最佳工艺参数奠定了基础。