RamR突变协同靶位基因GyrA突变调控RamA表达水平的研究

为了探讨RamR突变类型及对RamA表达调控的影响,靶位突变与外排泵过表达之间的关联,从临床分离的34株沙门菌中筛选不同RamR突变类型菌株,通过外排泵能量抑制(CCCP)试验和有机溶剂耐受试验(OST)验证外排泵的活性,构建不同RamR突变类型的质粒,互补到RamR野生型突变菌株中,采用RT-PCR方法检测各菌株RamA的表达水平。结果表明,15株ramR存在4种突变类型:M83T(n=6),A37S(n=3),T18P(n=3)和氨基酸的缺失(n=3)。CCCP抑制试验和OST试验证实,15株菌株中有10株存在明显的有活力的外排泵作用,4株存在活力微弱的外排泵。RamR三种氨基酸突变类型都上调了RamA的表达水平。靶位基因GyrA第83位的突变协同RamR的A37S或M83T突变均可引起RamA的表达显著增强,而T18P突变没有明显影响。相反,GyrA第87位的突变协同RamR的A37S或M83T突变则下调RamA的表达水平。本研究表明,所有的RamR的突变都可引起RamA表达水平增高,RamR与靶位基因突变协同调控RamA的表达水平,协同GyrA第83位突变可明显促进RamA的表达,而协同GyrA第87位突变则下调RamA的表达。