参附注射液通过调节核内HMGB1和NF-κB结合发挥抗炎活性的机制

探讨参附注射液(Shenfu injection,SFI)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264.7细胞的抑炎作用及其潜在机制。采用LPS诱导野生型RAW264.7细胞制作炎症细胞模型,经参附注射液不同剂量进行干预,RT-qPCR、WB和ELISA检测细胞内促炎因子,包括诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的转录、翻译和分泌水平,评价参附注射液的抗炎作用;构建高迁移率组蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)过表达RAW264.7细胞(HMGB1^(+)-RAW264.7)和HMGB1点突变RAW264.7细胞(HMGB1^(m)-RAW264.7),通过免疫荧光检测野生型、HMGB1^(+)和HMGB1^(m)-RAW264.7细胞中HMGB1的核移位情况,采用哺乳动物双杂交法和免疫共沉淀法检测HMGB1、P65和P50的结合率,以探讨核内HMGB1在炎症反应中的作用及SFI抗炎的潜在分子机制。结果表明:SFI可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中iNOS、IL-1β和TNF-α的转录、表达和分泌(P<0.01)。SFI能抑制HMGB1向核外迁移,使其高表达于核内。核内高表达HMGB1可使RAW264.7细胞对LPS的耐受度增加。在1μg/mL浓度LPS诱导下,HMGB1^(+)-RAW264.7细胞中TNFα和IL-1β的转录和表达水平均升高,且SFI能逆转这一现象。HMGB1^(m)-RAW264.7细胞中TNFα和IL-1β与对照组无差异。SFI可增加核内HMGB1与P65、HMGB1与P50的结合率(P<0.01),减少P50与P65的结合率。试验结果表明:SFI可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应;其作用途径可能是通过抑制HMGB1出核,竞争性结合P65和P50合,减少P65-P50二聚体的形成,进而抑制核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)通路的激活。

抗结核药所致的药物性肝损伤的研究概况

通过查阅近年来有关抗结核药所致的药物性肝损伤的文献资料,整理总结其发病机制和临床防治的研究进展,为抗结核药所致的药物性肝损伤的实验室和临床研究提供参考。

一贯煎加味抗肝纤维化的实验性研究

目的:研究一贯煎加味抗肝纤维化的作用。方法:采用四氯化碳(CC l4)诱导小鼠肝纤维化模型,同时设一贯煎加味大和小剂量组作对照。观察小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)及光镜观察肝脏病理形态变化。结果:大、小剂量一贯煎加味可显著降低小鼠血清ALT、AST的活性,减轻肝组织病理损害程度。结论:一贯煎加味具有保护肝细胞,减少肝损伤,抗肝纤维化的作用。

组织学与胚胎学课程形成性评价改革的探索

在组织学与胚胎学教学中,结合形态学课程的特点和教育目标,通过看图说话、在线识图与讨论、学习笔记分享、线上作业、自主学习和实验报告等丰富多样的方式对学生的学习过程进行动态追踪与评价。从课程特点出发、立足学生需求建立以“学生为中心”的课堂教学,不断提升学生学习的能动性与热情,让教与学有效互动,构建和谐课堂。

参附注射液对内毒素休克大鼠肺组织表达PPARγ和TNFα的干预作用

目的观察内毒素休克大鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达情况及参附注射液的干预作用。方法经腹腔注射脂多糖(LPS)建立内毒素休克SD大鼠模型,用低、中、高剂量参附注射液进行治疗,观察肺组织病理改变,检测肺组织中PPARγ和TNFα的表达量,同时检测血浆中TNFα和IL-1β的水平。结果模型组大鼠具有典型的急性肺损伤表现;肺组织中PPARγ的转录和表达(P<0.01)量均显著下调,TNFα的表达明显增加(P<0.01);血浆中TNFα和IL-1β水平明显上升(P<0.01)。与模型组比较,参附注射液改善肺组织充血、水肿及炎性细胞浸润;呈剂量依赖性上调肺组织中PPARγ的转录和表达,下调TNFα的表达;同时抑制血浆中炎症介质TNFα和IL-1β水平(P<0.01)。结论参附注射液保护内毒素休克大鼠肺组织,其作用机制可能与上调PPARγ从而抑制炎症介质的产生有关。

参附注射液对内毒素休克模型大鼠肺组织炎症的改善作用及抗炎机制研究

目的:研究参附注射液对内毒素休克模型大鼠肺组织炎症的改善作用及其抗炎机制。方法:将48 只大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(阳性对照,1 mg/kg)和参附注射液低、中、高剂量组(5、10、15 mL/kg),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)复制内毒素休克模型,造模后各组大鼠腹腔注射给药1次。给药24 h 后,苏木精-伊红(HE)染色后观察大鼠肺组织病理学变化并进行病理学评分;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肺组织中核转录因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白P65、P50 mRNA的表达水平;Western blot法测定肺组织中P65、P50 蛋白的表达水平,并检测肺组织细胞核和细胞浆中P65蛋白的表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺泡间隔增厚,血管明显充血,肺间质大量中性粒细胞浸润;肺组织病理学评分和P65、P50 mRNA及蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01 或P<0.001),细胞核、细胞浆中P65 蛋白和血浆中TNF-α水平均显著升高(P<0.001)。与模型组比较,地塞米松组和参附注射液中、高剂量组大鼠肺泡结构完整,无明显出血,炎性细胞浸润程度明显改善;肺组织病理学评分和P65、P50 mRNA及蛋白的表达水平以及血浆中TNF-α水平均显著降低(P<0.05 或P<0.01 或P<0.001),地塞米松组和参附注射液低、中剂量组大鼠肺组织细胞核、细胞浆中P65 蛋白表达水平均显著降低(P<0.05 或P<0.01 或P<0.001)。结论:参附注射液可通过降低肺组织中P65、P50 mRNA及蛋白的表达水平及血浆中TNF-α的水平,改善内毒素休克模型大鼠肺组织的炎症反应。

师生互动式集体备课开展方式的探索

通过对传统《组织胚胎学》教研室集体备课形式不足之处的分析,进行教研活动中集体备课形式的改进,在以"学生为中心"的教学指导思想下,首次提出"师生互动式"集体备课形式,初步探索"师生互动式"集体备课的开展模式,并佐以实例对集体备课前的准备、参与人员的挑选、集体备课内容与实施方案以及成效评价等方面进行探索,分析讨论师生双方的受益情况。

参附注射液对LPS诱导的RAW264.7细胞HMGB1核转位的干预作用

目的:探讨参附注射液(SFI)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)核转位的干预作用。方法:以经LPS诱导的小鼠单核巨嗜细胞RAW264.7为对象,以组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP966为阳性对照,在CCK-8法筛选给药剂量的基础上,采用免疫荧光法观察低、中、高剂量(3、6、12μL/m L)SFI对细胞中HMGB1核转位的影响,采用实时荧光聚合酶链式反应法检测细胞中HMGB1 mRNA的表达情况;采用Western blotting法检测细胞中HMGB1、Toll样受体4(TLR4)的表达情况,并比较细胞胞核、胞浆中HMGB1的表达情况;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中HMGB1、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:在空白对照组中,HMGB1主要定位于细胞核;经LPS诱导后,HMGB1由细胞核向胞浆迁移。与空白对照组比较,LPS组细胞中HMGB1 m RNA及其蛋白、TLR4的蛋白表达量以及上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α水平均显著升高(P<0.01);细胞胞核中HMGB1的蛋白表达量显著降低,而胞浆中HMGB1的蛋白表达量显著升高(P<0.01)。经SFI作用后,各给药组细胞HMGB1的核移位及分泌均受到不同程度的抑制;与LPS组比较,各给药组细胞中HMGB1 m RNA及其蛋白的表达量,阳性对照组和SFI中、高剂量组细胞中TLR4的蛋白表达量以及各给药组细胞上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α水平均显著降低(P<0.01);阳性对照组和SFI中、高剂量组细胞胞核中HMGB1的蛋白表达量均显著升高,而各给药组细胞胞浆中HMGB1的蛋白表达量均显著降低(P<0.01)。结论:SFI可能通过抑制RAW264.7细胞中HMGB1的核移位及分泌出胞,避免炎症通路的激活和炎症因子的产生,从而发挥减轻LPS致炎症反应的作用。

基于HMGB1/NF-κB信号通路评价参附注射液对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用

目的探讨参附注射液对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW 264.7细胞)中高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein, HMGB1)/核转录因子-κB(Nuclear factor-κB, NF-κB)信号通路相关蛋白及通路下游炎症因子的干预作用。方法经LPS诱导RAW 264.7细胞建立炎性损伤模型,用3、6、12μL/mL剂量参附注射液干预细胞24 h。Western Blot法检测HMGB1、Toll样受体4(TLR4)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、p65、p-p65和肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达;细胞免疫荧光法观察p65的核转位情况;Elisa法检测细胞上清中炎症因子HMGB1、白细胞介素1β(IL-1β)和TNFα的分泌水平。结果与对照组比较,模型组RAW 264.7细胞中HMGB1、TLR4、p65、p-p65和TNFα蛋白表达均显著升高,IκBα的表达则显著降低;形态学观察到大量p65从胞浆向核内转移;细胞上清中HMGB1、IL-1β和TNFα的分泌水平显著升高。与模型组比较,参附注射液呈剂量依赖性抑制HMGB1、TLR4、p65、p-p65和TNFα的表达,上调IκBα的表达;有效抑制p65向核内移位;降低细胞上清中炎症因子HMGB1、IL-1β和TNFα分泌水平;上述作用均呈剂量依赖性。结论参附注射液可能通过抑制HMGB1/NF-κB信号通路的激活而减轻LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应。

课程思政融入组织学与胚胎学教学的探索与实践

目的课程思政是指将思想政治教育融入专业知识中的一种新的教育理念。目前,将“课程思政”融入专业课的教学过程中是我国高校教育改革面临的新要求、新挑战。专业课的教学不应只局限于理论知识的传授,应有思想启迪、价值引导和道德涵育。本文将以组织学与胚胎学课程中血液一节为例,探索“课程思政”在组织学与胚胎学教学中的应用实践。在组织学与胚胎学专业知识教授的同时潜移默化地融入思政教育元素以期培养学生的爱国主义精神、奉献精神、思变及创新意识,做到知识传授和价值引领同向同行,践行立德树人的根本任务。

加味一贯煎对抗结核药所致的大鼠肝损伤的防治作用

目的:研究加味一贯煎对抗结核药物异烟肼(INH)和利福平(RFP)联合使用后所致的Wistar大鼠肝脏损伤的防治作用。方法:通过ip INH 0.07 g·kg-1和ig RFP 0.07 g·kg-1,1次/日,持续8周诱导Wistar大鼠肝损伤模型,同时设高、中、低剂量(25.2,18,12.6 g·kg-1)加味一贯煎汤剂ig治疗8周后,观察动物的肝损伤表现,测定其血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)含量;取肝脏测定肝组织匀浆中丙二醛(MDA)含量;并对肝脏进行肉眼观察及光学显微镜观察。结果:与模型组比较经加味一贯煎汤剂高、中、低剂量治疗后大鼠的血清中ALT,AST及肝组织匀浆中的MDA含量显著降低,肝组织病理损伤的程度明显减轻,而高、中、低剂量组间无显著差异。结论:加味一贯煎可在一定程度上改善抗结核药物INH和RFP联合使用后所致的Wistar大鼠肝脏损伤。

参附注射液抑制HMGB1核转位保护内毒素休克大鼠肺损伤

目的:探讨参附注射液保护内毒素休克大鼠肺损伤的分子机制。方法:经腹腔注射脂多糖(LPS)建立内毒素休克SD大鼠模型,用5ml/kg、10ml/kg、15ml/kg剂量参附注射液干预,观察肺组织病理改变,检测肺组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的转录、表达、亚细胞定位及血浆中HMGB1分泌水平。结果:LPS可致SD大鼠肺泡隔水肿,充血,大量粒细胞浸润;肺组织中HMGB1的转录和表达均显著上调;胞浆中HMGB1表达显著增加,而核内HMGB1则显著下调;血浆中HMGB1水平明显上升。与模型组比较,参附注射液各剂量均可减轻内毒素休克大鼠肺组织水肿、充血和炎性细胞渗出,对肺损伤具有明显的保护作用,10ml/kg组病理评分最低;抑制内毒素休克大鼠肺组织中HMGB1的转录(呈剂量依赖性)、翻译和核转位(以10ml/kg组效果最优);抑制HMGB1分泌出胞,减少血浆中HMGB1含量(呈剂量依赖性)。结论:参附注射液抑制内毒素休克大鼠肺组织中HMGB1的核转位,可能是其扶阳固脱的重要分子机制。

贵州小型猪胃肠黏膜5-HT IR及SS-IR细胞的分布规律及形态学初步观察

为了观察贵州小型猪胃肠黏膜5-羟色胺(5-HT)、生长抑素(SS)免疫反应(IR)细胞的分布及形态特点,试验运用免疫组织化学SABC法显示成年贵州小型猪胃肠黏膜5-HT、SS-IR阳性细胞,观察其分布规律和形态,并对阳性细胞进行计数。结果表明:成年贵州小型猪胃肠黏膜5-HT-IR、SS-IR阳性细胞呈椎形、圆形、卵圆形、梭形等多种形态,多分布于腺体的底、体部,黏膜表面上皮细胞间较少;5-HT-IR阳性细胞于十二指肠分布最密集,其次为胃黏膜,在小肠各段中呈下降的分布趋势;在大肠各段的分布又呈上升趋势;SS-IR阳性细胞在胃窦最多,从小肠起始段至大肠末端的分布呈减少趋势。说明贵州小型猪胃肠黏膜5-HT-IR、SS-IR阳性细胞形态多样,两种细胞的分布规律与大多数哺乳动物的分布规律相似。

加味一贯煎抗脂肪肝的实验性研究

目的:观察加味一贯煎抗脂肪肝的作用。方法:采用复合致病因素(高脂饲料和乙醇)造成大鼠脂肪肝模型后,使用加味一贯煎大、小剂量分别进行治疗,观察血液生化指标及病理形态。结果:模型对照组大鼠血液生化中的胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)较正常对照组明显升高(P<0.05),肝脏脂肪变严重,细胞内有大量脂滴形成的空泡;而加味一贯煎高、低剂量组中的血清TC和TG较模型对照组明显下降(P<0.05),细胞内的空泡也明显减少。结论:加味一贯煎抗实验性脂肪肝的形成有一定效果。