紫云英苷对未分化胃癌细胞凋亡的影响

目的:探讨紫云英苷(Astragalin)对未分化胃癌细胞HGC-27的作用及相关分子机制。方法:将紫云英苷作用HGC-27细胞,设置对照组(0μg/ml)和Astragalin组(12.5、25、50μg/ml),每组设置3复孔,用CCK-8法分别在用药0、24、48、72 h后检测细胞增殖活性;在浓度为0、50μg/ml的Astragalin作用24 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,hoechst 33342、JC-1染色观察其核形和线粒体膜电位,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的改变,二代测序仪分析基因的逆转录水平。结果:紫云英苷可明显抑制HGC-27的增殖(P<0.01),下调细胞线粒体膜电位,诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G1期(P<0.01)。同时,紫云英苷上调基因bax、bad的转录水平,抑制egf、egfr、pik3cb、pdk1、akt3、bcl-2和sgk3基因的转录(P<0.01)。Western blot实验也证实紫云英苷降低PI3K和AKT蛋白的表达,同时BAX和BCL-2蛋白的比例也显著增加(P<0.01)。结论:紫云英苷可通过抑制EGFR/PDK/AKT信号通路诱导未分化型胃癌细胞HGC-27凋亡,并将细胞周期阻滞于G1期,对未分化胃癌具有一定的治疗作用。

大黄酸诱导胃癌细胞HGC-27凋亡的作用及其机制

目的:探讨大黄酸对胃癌细胞HGC-27增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:终浓度为0、5、10和20 mg/L的大黄酸在体外分别作用于胃癌HGC-27细胞0、24、48、72 h,每组各设3复孔,使用CCK-8法检测细胞的增殖活力,同时将细胞置于小高内涵显微镜下观察其生长状态,细胞经hoechst染色观察其核型变化,JC-1染色结合流式细胞术分析线粒体膜电位改变,使用流式细胞仪检测细胞周期,RT-qPCR法分析基因的逆转录水平,Western blot分析蛋白表达的改变。结果:与浓度为0 mg/L大黄酸处理的HGC-27细胞对比,5、10和20 mg/L浓度的大黄酸作用于HGC-27细胞24 h后,细胞线粒体膜电位下降(P<0.01),细胞增殖活力受到抑制,并诱导其凋亡,作用效果随大黄酸浓度增加和作用时间延长而增强,而细胞周期无显著变化,细胞内bcl-2、jak1、jak2、stat3和notch基因的表达下调,bax、caspase-3基因的表达水平明显升高(P<0.01)。结论:大黄酸可通过调节NOTCH/JAK/STAT信号通路来诱导胃癌细胞HGC-27凋亡,具有抗胃癌的效应。