华支睾吸虫CsLegumain促胆管癌细胞迁移和侵袭的机制研究

目的探讨华支睾吸虫CsLegumain在胆管癌细胞的增殖、侵袭和转移中的作用及其分子机制。方法构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CsLegumain并转染胆管癌细胞,建立CsLegumain过表达细胞株。通过CCK8试验、细胞划痕试验、Matrigel Transwell试验分析CsLegumain在胆管癌细胞的增殖、侵袭和转移中的作用。通过实时荧光定量PCR及Western blot分别检测CsLegumain影响的靶分子转录水平和蛋白表达水平。结果成功构建CsLegumain稳定表达细胞株。CCK8试验显示,CsLeguamin对RBE细胞的增殖无显著影响(均P>0.05)。划痕实验中,过表达CsLegumain的RBE细胞其运动能力与对照组细胞相比显著增强,细胞间的距离明显变窄(均P<0.05)。Transwell试验显示,过表达CsLegumain的RBE细胞穿过基质小室的数量较对照组细胞数量多(P<0.05)。过表达CsLegumain组RBE细胞中E-cadherin和N-cadherin的转录水平及其蛋白表达水平均较对照组细胞显著降低(均P<0.05)。结论CsLeguamin对胆管癌细胞的增殖无显著影响,但具有促进胆管癌细胞迁移和侵袭能力,可能的机制是通过调控E-cadherin和N-cadherin的表达诱导EMT促进胆管癌细胞的迁移和侵袭。