小胶质细胞活化对脑出血后继发性脑损伤作用的研究进展

小胶质细胞是参与防御脑损伤的主要免疫细胞。脑出血后,小胶质细胞被激活,吞噬受损神经细胞和红细胞,并分泌大量炎性因子和抗炎因子,在脑出血后继发性脑损伤中发挥神经毒性及损伤修复双重作用。该文就脑出血后小胶质细胞活化及其作用展开综述,探讨小胶质细胞在脑出血后继发性脑损伤中的作用。

小鼠脑出血后不同时间点小胶质细胞极化状态的实验研究

目的观察小鼠脑出血后不同时间点小胶质细胞M1及M2型的转化,为促炎型M1型小胶质细胞向抗炎修复型M2型小胶质细胞的转化,减轻脑出血后神经功能损伤提供理论依据。方法选取健康雄性ICR小鼠48只,随机分为假手术组、脑出血组,每组按术后时间点不同随机分为1 d、3 d、7 d三个时间点,每个时间点8只。通过立体定位仪用微量注射器向尾状核注射Ⅳ型胶原酶0.5 U制备脑出血模型,假手术组注射等量生理盐水。各组于术后对应时间点参照改良Garcia评分量表进行神经功能缺损评分后灌注取脑,采用蛋白免疫印迹检测M1型小胶质细胞标志物肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6),M2型小胶质细胞标志物脑源性神经营养因子(brai n-derived neurotrophic factor,BDNF)、胰岛素样生长因子1(insulinlike growth factor 1,IGF-1)的含量;采用免疫荧光染色标记小胶质细胞M1型(Iba1+CD80)、M2型(Iba1+CD206),评价出血后血肿周围组织小胶质细胞活化状态。结果脑出血组1 d、3 d、7 d各时间点Garci a评分均较假手术组低,TNF-α、IL-6、BDNF及I GF-1的蛋白表达量均较假手术组增多(均P<0.01)。脑出血后1 d时M1型高于M2型小胶质细胞数量(38.33±1.53 vs 23.00±3.00,P=0.01);3 d时M1型同样高于M2型(66.33±3.06 vs 57.33±2.52,P=0.02);7 d时M1型低于M2型(33.67±1.15 vs 52.33±0.58,P<0.01)。结论脑出血急性期(1~3 d)以M1型小胶质细胞为主,脑出血亚急性期(7 d)以M2型小胶质细胞为主。

Nrf2调控小胶质细胞功能转化在脑出血后血肿清除中的作用机制

目的探讨核因子红系相关因子2(Nrf2)介导的小胶质细胞功能转化在脑出血后血肿清除和功能恢复中的作用机制。方法通过注射Ⅳ型胶原酶复制小鼠脑出血模型。C57BL/6小鼠34只,随机分为对照组、脑出血组、脑出血+红曲素组、脑出血+血脂康组;雄性Nrf2基因敲除小鼠(Nrf2^(-/-))C57BL/6小鼠8只,为脑出血+Nrf2^(-/-)组。采用改良Garcia评分评价神经功能;检测血红蛋白水平;采用Western blotting测定Nrf2、CD80、CD206、促炎因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、髓样细胞上表达的Ⅰ型受体(Trem1)和抗炎因子脑源性神经营养因子(BDNF)、髓样细胞上表达的Ⅱ型受体(Trem2)表达,采用免疫荧光测定Nrf2、CD80、CD206、Trem1和Trem2;采用Pearson法对Trem1、Trem2与改良Garcia评分,Trem2与血红蛋白进行相关性分析。结果与脑出血组比较,脑出血+红曲素组及脑出血+血脂康组的血红蛋白水平降低(P<0.05),改良Garcia评分增加(P<0.05),Trem2、CD206、BDNF相对表达量增加(P<0.05),Trem1、CD80、TNF-α相对表达量下降(P<0.05);脑出血+Nrf2^(-/-)组血红蛋白水平升高(P<0.05),改良Garcia评分降低(P<0.05),Trem2、CD206、BDNF相对表达量降低(P<0.05),Trem1、CD80、TNF-α相对表达量升高(P<0.05)。Trem1蛋白表达与改良Garcia评分呈负相关(r=-0.956,P<0.05),Trem2蛋白表达与改良Garcia评分呈正相关(r=0.936,P<0.05)。Trem2蛋白表达与血红蛋白呈负相关(r=-0.473,P<0.05)。结论Nrf2可通过调控小胶质细胞的功能转化,影响脑出血后血肿清除;Nrf2激动剂——红曲素及血脂康可通过上调Trem2、CD206、BDNF的表达强化小胶质细胞的吞噬功能,促进血肿产物的清除并促进神经修复;同时可下调Trem1及CD80、TNF-α的表达,抑制小胶质细胞的炎症反应,减轻出血后血肿及神经毒性而发挥神经保护作用。