腺病毒介导的p16和p53的联合应用对胆管癌细胞QBC939的生长抑制作用

为研究p16和 p5 3基因的联合应用对胆管癌细胞的作用 ,将重组体腺病毒 p16、p5 3、p16联合 p5 3转移到人胆管癌细胞QBC939,对 p16、p5 3基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行了分析。RT PCR显示在胆管癌QBC939细胞系中p16呈低表达 ,p5 3不表达。重组体腺病毒能介导 p16和p5 3等外源基因在胆管癌QBC939细胞系中高效表达 ,两者联合应用能明显抑制QBC939细胞的生长和集落形成。流式细胞计数证实其能诱导QBC939细胞发生明显凋亡并导致其发生G1期阻滞。本研究显示 p16及 p5 3基因通过诱导肿瘤细胞凋亡及G1期阻滞在肿瘤的基因治疗方面发挥作用 。

肝移植对胃粘膜损伤的影响及意义

观察肝移植对肝硬化大鼠受损胃粘膜的影响及引起的与胃粘膜损伤或保护有关指标的变化。制备CCl4中毒性肝硬化大鼠模型 ,采用“二袖套法”进行肝移植 ,利用免疫组织化学的方法观察肝硬化大鼠胃粘膜损伤的情况 ,以及肝移植后受损胃粘膜的改善情况。采用生化法或放射免疫分析法测定肝移植前后大鼠血浆中的超氧化物歧化酶 (SOD) ,丙二醛 (MDA)和白介素 1(IL 1)、前列腺素E2(PGE2 )的变化情况。实施肝移植后 ,肝硬化大鼠胃粘膜病理损害逐渐恢复 ,粘膜损伤指数下降明显 ;血浆中的SOD逐渐升高 ,MDA逐步下降 ;IL 1水平升高明显 ,PGE2 的水平也呈明显升高的趋势。肝移植使肝硬化大鼠受损的胃粘膜得到明显的改善 ,其机制可能与氧自由基代谢和IL 1、PGE2

p16和p53基因及顺铂联用对胆管癌细胞系QBC939的生长抑制作用

目的 :探索 p16基因和 p5 3基因及 p16基因和顺铂(CDDP)联合应用对体内外胆管癌细胞系生长的抑制作用 .方法 将重组体腺病毒 p16 (Ad- p16 )和 Ad- p5 3及 Ad- p16和CDDP联合作用于人胆管癌细胞系 QBC939,观察和分析其对体内外胆管癌细胞生长抑制作用及其机制 .结果 Ad- p16在 QBC939细胞中表达能抑制 QBC939细胞的生长 ,与 p5 3、CDDP联合应用能明显抑制 QBC939细胞的生长 ,p16和 p5 3基因诱导癌细胞发生 G1期阻滞和细胞凋亡 ,CDDP能诱导癌细胞发生 G2期阻滞和细胞凋亡 ;裸鼠皮下移植瘤模型瘤体内注射 Ad- p16及腹腔内注射 CDDP均能抑制 QBC939肿瘤的生长 ,两者联合应用具有协同作用 .结论 p16基因和 p5 3基因及 CDDP联合应用具有协同作用 .

肝移植对肝硬化大鼠胃运动功能的影响

目的 主要了解肝移植前后胃运动功能的变化情况以及与胃运动相关的胃肠道激素或神经肽的变化 .方法 制备 CCl4中毒性肝硬化大鼠模型 ,采用“二袖套法”进行肝移植 ,应用放免分析法 ,以 SPECT显像用的核素 (99Tcm )为标记 ,采取液相胃排空的方法 ,分析肝移植前后大鼠胃排空的情况 ,以及与胃运动有关的胃肠道激素或神经肽的变化 .结果 肝移植前 ,肝硬化大鼠的胃排空率明显降低 [胃排空率从(89.3± 6 .8) %至 (78.2± 6 .5 ) % ,P<0 .0 1],与胃运动相关的胃肠道激素或神经肽水平也有所改变 [胃动素从 (98± 6 )ng· L- 1 至 (5 2± 5 ) ng· L- 1 ,P<0 .0 1,抑胃肽从 (5 4± 4 )ng· L- 1至 (88± 3) ng· L- 1 ,P<0 .0 1,生长抑素从 (2 18±16 ) ng· L- 1 至 (2 84± 12 ) ng· L- 1 ,P<0 .0 1,降钙素基因相关肽从 (134± 18) ng· L- 1至 (184± 2 2 ) ng·L- 1 ,P<0 .0 1].肝移植后 ,随着时间的不断延长 ,大鼠胃排空率明显升高 [胃排空率从 (78.2± 6 .5 ) %至 (88.1± 6 .7) % ,P<0 .0 1],与胃运动相关的胃肠道激素或神经肽水平也发生了相应的变化 [胃动素从 (5 2± 5 ) ng· L- 1 至 (95± 6 ) ng· L- 1 ,P<0 .0 1,抑胃肽从 (88± 3) ng· L- 1 至 (5 6± 6 ) ng· L- 1 ,P<0 .0 1,生长抑素从

经胆道镜钬激光碎石治疗胆总管难取性残留结石

目的探讨经胆道镜钬激光碎石治疗胆总管难取性残留结石的实用性及安全性。方法15例胆道术后胆总管难取性残留结石患者接受经胆道镜钬激光碎石治疗,钬激光波长2.1μm,脉冲能量0.6～1.5J/P,脉冲频率10Hz,脉冲宽度0.25μs,光导纤维直径400μm.观察治疗成功率及患者术后有无胆道出血、胆漏、发热等症状,并进行远期随访。结果经1～2次胆道镜下钬激光碎石治疗,15例患者残石全部取尽,近期未出现并发症。13例获得随访,随访时间6～12个月,无结石复发和钬激光碎石相关的胆管狭窄出现。结论经胆道镜钬激光碎石是治疗胆总管难取性残留结石的一种安全、有效的方法。

耳穴脉冲刺激对Oddi括约肌张力及肌电活动的影响

目的 探讨耳穴脉冲电刺激治疗胆石症 ,胆绞痛的机制 .方法 选用 15条成年杂种犬 ,进行耳穴体表脉冲刺激与缩胆素 (CCK)对在体狗胆囊张力 ,Oddi括约肌张力及肌电活动影响的对比研究 .结果 耳穴脉冲电刺激对胆囊张力无明显影响 [(1.2 7± 0 .2 6 ) k Pa与 (1.2 4± 0 .2 2 ) k Pa,P<0 .0 5 ],CCK注射液能明显提高胆囊张力 [(1.2 7± 0 .2 6 ) k Pa与 (1.91± 0 .39) k Pa,P<0 .0 5 ],CCK注射液能明显降低Oddi括约肌张力 [(2 .2 4± 0 .5 5 ) k Pa与 (1.5 8± 0 .5 6 ) k Pa,P>0 .0 5 ]及肌电活动 .结论 耳穴脉冲电刺激同 CCK一样 ,均对 Oddi括约肌的张力有显著的降低作用 ,并减少 Oddi括约肌的肌电峰电位爆发波的频率与电压值 ,推测其对胆绞痛有治疗作用 ,并有助于胆结石的排石过程 .

胆道镜联合钬激光碎石治疗肝内外胆管难取性残留结石

目的 探讨经胆道镜钬激光碎石治疗肝内、外胆管难取性残留结石的实用性及安全性。方法 观察 18例胆道术后肝内、外胆管难取性残留结石患者接受胆道镜下钬激光碎石治疗的临床效果 ,并进行随访。结果 经 1～ 4次胆道镜下钬激光碎石治疗 ,18例患者残石全部取尽 ,未出现近期并发症。 16例获得随访 ,随访时间 6个月～ 1年 ,无结石复发和钬激光碎石相关的胆管狭窄出现。结论 经胆道镜钬激光碎石是治疗肝内、外胆管难取性残留结石的一种安全。

腺病毒介导的p16和顺铂的联合应用对胆管癌细胞系QBC939的生长抑制作用

目的研究 p16基因和顺铂联合应用对胆管癌细胞的作用.方法将重组体腺病毒 p16(Ad-p16)和顺铂联合作用于人胆管癌细胞 QBC939,对 p16基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析.结果用 Ad-LacZ 进行重组体腺病毒转导效率的检测,发现当MOI 为100以上时,重组体腺病毒可使90%以上的培养的人胆管癌 QBC939细胞被转导.用 RT-PCR 方法检测,在胆管癌QBC939细胞系中 p16呈低表达.重组体腺病毒能介导外源基因 p16在胆管癌 QBC939细胞系中高效表达,重组体腺病毒介导的 p16在 QBC939细胞中表达,能抑制 QBC939细胞的生长和集落形成.其与顺铂联合应用对 QBC939细胞的生长抑制具有明显作用.并显著地抑制该肿瘤细胞的克隆形成能力.流式细胞计数证实 p16能诱导 PBC939细胞发生凋亡并导致其发生 G_1期阻滞,顺铂能诱导 QBC939细胞发生凋亡并导致细胞发生明显的 G_2期阻滞.结论 p16基因能够增加 QBC939细胞对顺铂的敏感性.

抑癌基因p16在胆管癌中表达的意义

目的研究 p16基因产物在人肝外胆管癌中的表达及其意义.方法应用免疫组织化学技术检测51例肝外胆管癌组织中p16表达,并分析其意义.结果 51例肝外胆管腺癌 P16蛋白的阳性率为43.1%,其阳性率在肿瘤的病理分级及神经侵润等方面差异有显著性(P<0.05),中位生存期在 P16蛋白阳性的肿瘤中比阴性的长(23 mo vs 8mo,P<0.05),P16蛋白阳性比 P16阴性肿瘤手术切除率高(52.9% vs 23.5%,P<0.05).结论 p16基因可能在胆管肿瘤的发生、发展中起重要作用,与胆管癌分化不良、神经侵润、生存时间及能否切除有密切关系.

腺病毒介导的p53和顺铂的联合应用对胆管癌细胞系QBC939的生长抑制作用

目的 :研究 p5 3基因和顺铂联合应用对胆管癌细胞的作用。方法 :将重组体腺病毒p5 3和顺铂联合作用于人胆管癌细胞QBC939,对 p5 3基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析。结果 :用Ad -LacZ进行重组腺病毒转导效率的检测 ,发现当MOI为 10 0以上时 ,重组腺病毒可使 90 %以上的培养的人胆管癌QBC939细胞被传导。用RT -PCR方法检测 ,在胆管癌QBC939细胞系中 p5 3无表达。重组体腺病毒能介导外源基因 p5 3在胆管癌QBC939细胞系中高效表达。重组体腺病毒介导的 p5 3在QBC939细胞中表达 ,能抑制QBC939细胞的生长和集落形成。其与顺铂联合应用对QBC939细胞的生长抑制具有明显作用。流式细胞计数证实 p5 3能诱导QBC939细胞发生凋亡并导致其发生G1期阻滞 ,顺铂能诱导QBC939细胞发生凋亡并导致细胞发生明显的G2期阻滞。结论 :p5

TGF_α,EGFR反义寡聚核苷酸抑制人大肠癌细胞的增殖

目的研究ＴＧＦα，ＥＧＦＲ反义寡聚核苷酸抑制大肠癌ＨＲ８３４８细胞株恶性增殖的作用．方法采用２３个碱基组成的ＴＧＦα反义寡聚核苷酸和２１个碱基组成的ＥＧＦＲ反义寡聚核苷酸以及２１个碱基组成的对照寡聚核苷酸作用于人大肠癌ＨＲ８３４８细胞，通过细胞生长抑制实验，３ＨＴｄＲ掺入，ｍＲＮＡ斑点杂交及细胞周期分析以确定其对大肠癌细胞的增殖抑制作用和作用环节．结果ＴＧＦα，ＥＧＦＲ反义寡聚核苷酸与对照寡聚核苷酸相比较，均能有效抑制ＨＲ８３４８细胞的增殖（Ｐ＜００１），ＤＮＡ合成（Ｐ＜００１）和ｍＲＮＡ（Ｐ＜００１）的表达，并能有效地延缓ＨＲ８３４８细胞由Ｇ０／Ｇ１期向Ｓ期的转化。

腺病毒介导的p16对胆管癌细胞的生长抑制作用

目的 研究 p1 6基因对胆管癌细胞的作用 .方法 将重组体腺病毒 p1 6转移到人胆管癌细胞 QBC939,对 p1 6基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析 .结果 用 Ad-Lac Z进行重组体腺病毒转导效率的检测 ,发现当 MOI为 1 0 0以上时 ,重组体腺病毒可使 90 %以上的培养的人胆管癌QBC939细胞被转导 .用 RT-PCR方法检测 ,在胆管癌QBC939细胞系中 p1 6呈低表达 .重组体腺病毒能介导外源基因 p1 6在胆管癌 QBC939细胞系中高效表达 .重组体腺病毒介导的 p1 6在 QBC939细胞中表达 ,能抑制 QBC939细胞的生长和集落形成 .流式细胞计数和细胞 DNA Ladder,证实p1 6能诱导 QBC939细胞发生凋亡并导致其发生 G1期阻滞 .结论 p1 6基因通过诱导肿瘤细胞凋亡及

结肠癌细胞株p16基因甲基化的研究

目的 研究结肠癌中ｐ１６ 基因的失活方式．方法 采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 法鉴定了结肠癌细胞株ＳＷ４８０ ，Ｃｏｌｏｎ２０５ ，ＨＲ８３４８ ，ＨＴ２９ ，Ｃｏｌｏ３２０ ，ＬＳＩＧＴ９６９５ 及１８ 例正常结肠粘膜组织中ｐ１６ 基因的甲基化情况．结果 在６ 株结肠癌细胞株中有５ 株（８３－３ ％ ） ｐ１６ 基因ＣｐＧ岛呈异常甲基化状态，与之相对，１８ 例正常结肠粘膜组织中仅５ 例（２７－８ ％ ） 表现为异常甲基化．结论 在结肠癌中ｐ１６ 基因因异常甲基化而失活，这为结肠癌的基因治疗提供了新策略。

腺病毒介导的p53对胆管癌细胞生长的抑制作用

目的 研究 p5 3基因对胆管癌细胞的作用 .方法 将重组体腺病毒 p5 3转移到人胆管癌细胞 QBC939,用 RT-PCR、克隆形成实验、流式细胞仪、DNA片段化分析等方法对p5 3基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析 .结果 用Ad- L ac Z进行重组体腺病毒转导效率的检测 ,发现当 MOI为10 0以上时 ,重组体腺病毒可使 90 %以上的培养的人胆管癌QBC939细胞被转导 .用 RT- PCR方法检测 ,在胆管癌QBC939细胞系中 p5 3无表达 .重组体腺病毒能介导外源基因 p5 3在胆管癌 QBC939细胞系中高效表达 .重组体腺病毒介导的 p5 3在 QBC939细胞中表达 ,能抑制 QBC939细胞的生长和集落形成 .流式细胞计数和细胞 DNA L adder,证实p5 3能诱导 QBC939细胞发生凋亡并导致其发生 G1期阻滞 .结论 p5 3基因可能通过诱导肿瘤细胞凋亡及