细胞因子rhIL—1β、rhIL—2及rhIL—6对大鼠海马神经元营养作用的研究

本工作采用显微测量、图像分析和流式细胞分析方法，研究了细胞因子ｒｈＩＬ—１β、ｒｈＩＬ－２及ｒｈＩＬ—６对新生大鼠海马培养神经元突起生长发育、胞体生长状态、神经元存活数及培养过程中蛋白总量影响。结果显示，这３种细胞因子均对海马培养神经元的突起生长，胞体发育以及发育过程中神经元的蛋白质合成具有明显的促进作用，并且在提高海马培养神经元存活、延长存活时间方面有较为显著的效应。提示白介素类细胞因子ｒｈＩＬ—１β、ｒｈＩＬ－２及ｒｈＩＬ—６对海马神经元具有营养作用。

γ-氨基丁酸抑制缺氧所致神经元钙超载

本文以体外分散培养的新生大鼠海马ＣＡ１区神经细胞为标本，分别采用激光扫描共聚焦显微镜动态监测单个细胞［Ｃａ２＋］ｉ和膜片箝全细胞记录的电生理技术检测细胞的ＮＭＤＡ电流和电压依赖性Ｃａ２＋电流等方法，较为深入地研究了抑制性神经递质γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）及ＧＡＢＡ－Ａ受体激动剂蝇蕈醇（Ｍｕｓｃｉｍｏｌ）对急性缺氧时海马ＣＡ１神经元［Ｃａ２＋］ｉ升高过程的影响方式及其作用机制。结果表明：对照组细胞缺氧后比缺氧前［Ｃａ２＋］ｉ升高２６８％±６８％（ｎ＝５）；而以２０μｍｏｌ／ＬＧＡＢＡ或２０μｍｏｌ／ＬＭｕｓｃｉｍｏｌ作用的细胞在缺氧后［Ｃａ２＋］ｉ升高仅分别为２６％±９％（ｎ＝５）和４０％±１５％（ｎ＝５），与对照组相比均有极显著差异（Ｐ＜０．００１）。说明它们具有抑制缺氧引起的神经元［Ｃａ２＋］ｉ升高的作用。在膜片箝的全细胞记录实验中，观察到２０μｍｏｌ／ＬＧＡＢＡ能够抑制ＮＭＤＡ电流，对其幅度的抑制率为６３．３±１１．６％（ｎ＝５）；别外，２０μｍｏｌ／ＬＧＡＢＡ对由－９０－０ｍＶ脉冲电压诱发的Ｃａ２＋电流最大峰值的抑制率为５４．８％±１０．７％（ｎ＝５）。以往的实验证据揭示，ＮＭＤＡ受体耦联的离子通道和电?

GABA减缓缺氧引起的神经营养素mRNA表达量的变化

γ－氨基丁酸是中枢神经系统中的一种内源性抑制递质。近年已有实验证据揭示ＧＡＢＡ具有抵抗中枢神经元缺氧或缺血损伤的作用，但其机制尚不清楚。脑源性神经营养因子ＢＤＮＦ，神经生长因子ＮＧＦ和神经营养素－３是同一家族的成员，它们在海马脑区均有表达。为研究ＧＡＢＡ抗缺氧作用的机制，我们以培养的海马ＣＡ１神经元为材料，采用原位杂交的方法检测了缺氧后ＢＤＮＦｍＲＮＡ，ＮＧＦｍＲＮＡ和ＮＴ－３ｍＲＮＡ表达量的变化以及ＧＡＢＡ对这种变化的影响。结果显示，缺氧使ＮＧＦｍＲＮＡ和ＢＤＮＦｍＲＮＡ的表达量迅速上调且前者的变化极为剧烈，而ＮＴ－３ｍＲＮＡ的表达量显著下降；用２０μＭ的ＧＡＢＡ处理细胞后，上述缺氧引起的神经营养因子ｍＲＮＡ表达量的上升或下降幅度均被减缓，其中对ＮＧＦｍＲＮＡ表达量变化的影响最为显著。这些结果表明，ＧＡＢＡ具有稳定缺氧后ＢＤＮＦｍＲＮＡ，ＮＧＦｍＲＮＡ和ＮＴ－３ｍＲＮＡ表达水平的作用。推测这种作用与ＧＡＢＡ增加氯电导。

白细胞介素对大鼠海马培养神经元膜电特性的影响

用细胞内微电极记录方法研究了重组人白细胞介素－１β（ｒｈＩＬ－１β）和重组人白细胞介素－２（ｒｈｉＬ－２）对分散培养的新生大鼠海马神经元膜电性质的影响。采用压力脉冲微量给药技术将白介素施加于所记录的细胞表面。结果发现：１００Ｕ／ｍｌ浓度的ｒｈＩＬ－１β使受作用的海马神经元超极化４．２０±１．８６ｍＶ；１００Ｕ／ｍｌ浓度的ｒｈＩＬ－２使５０％受作用的海马神经元去极化１１．１２±３．７１ｍＶ，并伴有强烈的自发放电反应，而１０００Ｕ／ｍｌ浓度的ｒｈＩＬ－２使１００％受作用的神经元超极化３．２５±０．６３ｍＶ，这些神经元的膜阻抗均无明显变化。本实验结果提示ｒｈＩＬ－１β和ｒｈＩＬ－２可显著影响体外培养海马神经元的膜兴奋性。

新生大鼠海马分区培养神经元对缺氧反应的差异

本文以混合培养海马神经元技术为基础，通过改进解剖方法、摸索鼠龄与存活率之间的关系，成功地进行了海马神经元的分区培养。同时采用同视野跟踪记数法、激光扫描共聚焦显微镜测钙和原位杂交等技术，研究了缺氧条件下培养的海马CA1和DG神经元在存活率、细胞内游离钙和脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA表达水平等指标上变化的差异。结果表明，在相同的缺氧条件下，DG细胞比CAl细胞损伤轻微并且具有比CAl细胞更强的维持细胞内Ca2＋稳态和表达BDNFmPNA．的能力。

细胞因子对中枢神经系统海马脑区的作用

细胞因子是一组多肽蛋白，一般认为其主要功能是介导非特异性免疫反应、促进未成熟白细胞增殖、分化和生长等。但近年来的研究表明，这些在免疫系统中起重要作用的调节因子及其受体也存在于中枢神经系统（ＣＮＳ）中，并发现它们对ＣＮＳ中某些神经元和胶质细胞的生理功能有调控作用。本文综述细胞因子白细胞介素１（ＩＬ－１）、白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素６（ＩＬ－６）对ＣＮＳ海马脑区作用的研究进展。

新生大鼠海马培养神经元电生理参数测定及神经递质的作用观察

采用微电极技术对分散培养的新生大鼠海马神经元进行细胞内记录，对其被动膜电性质、Ⅰ－Ｖ关系曲线、动作电位等进行了观察。测得静息电位为－６４±１１ｍＶ（ｎ＝９６），膜阻抗为８０±２０ＭΩ，时间常数５．６±１．４ｍｓ，动作电位幅度６９±７ｍＶ（ｎ＝１５），阈电位－４８±８ｍＶ，超射值７±３ｍＶ。利用压力脉冲微量给药技术将乙酰胆碱或谷氨酸钠施加于所观察的细胞表面，发现二者均引起神经元去极化，并伴有强烈的放电反应。证明新生大鼠海马培养神经元细胞内记录是一种稳定可靠的电生理学研究方法。

白介素－2对海马神经细胞的功能调控

采用形态学、电生理学和生物化学等方法，研究了重组人白介素－２（ｒｈＩＬ－２）对新生大鼠海马培养神经元生长发育、平均蛋白总量、膜电活动以及细胞内游离钙离子浓度的影响。结果显示，ｒｈＩＬ－２对海马培养神经元的突起生长、胞体发育以及发育过程中神经元的蛋白质合成具有明显的促进作用，并且在提高海马培养神经元存活、延长存活时间方面有较为显著的效应。细胞内记录结果显示，ｒｈＩＬ－２可改变海马神经元的膜兴奋性，该作用可被纳洛酮减弱。提示阿片受体可能参与介导ｒｈＩＬ－２的作用过程。另外，采用ｆｕｒａ－２荧光探针标记法发现，ｒｈＩＬ－２能够通过胞外钙离子的流入和胞内钙库的释放提高海马神经元胞浆内游离钙离子的浓度。上述研究结果初步表明，细胞因子ｒｈＩＬ－２能够调控海马神经元的功能活动。

高压直流输电的介入对交流电网的影响

近年来我国西电东送、南北互供的电网发展战略会使得高压直流输电更为普遍,讨论了交流电网目前的状态及高压直流输电带来的一些影响,说明了高压直流输电对交流电网的发展具有重要意义。

智能算法优化神经网络在变压器故障诊断中的应用

传统的电力变压器故障诊断方法存在着识别精度低的局限性,不能有效地进行数据分析,导致无法正确诊断故障类型甚至误诊。为此,神经网络和人工群智能算法的提出,及其在电力变压器故障诊断中的应用,大大提高了故障诊断的时效性和准确性。该类方法以传统的变压器溶解气体分析(DGA)作为数据采集基础,利用神经网络良好的非线性逼近能力,同时采用群智能算法的自组织、分布式和并行性等良好性能优化神经网络参数(权值和阀值),使得神经网络的快速收敛及精确程度大幅提高,进而用优化过的神经网络对变压器溶解气体数据分析并故障分类。最后通过实例验证表明:该类方法能够有效地对故障气体样本进行离散和约简化分析,与传统方法相比,提高了故障诊断的效率和正确率。

降钙素基因相关肽对缺氧时海马细胞内游离Ca^（2＋）的影响

本实验用Ｆｕｒａ－２荧光测定技术直接监测了缺氧时大鼠海马细胞内游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化，并观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对这种变化的影响。结果发现，缺氧可使海马细胞［Ｃａ２＋］ｉ显著增高；４或８ｎｍｏｌ／ＬＣＧＲＰ能明显地降低缺氧引起的［Ｃａ２＋］ｉ增高，但在无胞外Ｃａ２＋的情况下，ＣＧＲＰ的作用消失。结果表明，ＣＧＲＰ的降钙作用是通过抑制缺氧时胞外Ｃａ２＋的内流来实现的。

GABA对大鼠海马脑片缺氧损伤的保护作用

目的 :研究GABA对大鼠海马脑片急性缺氧损伤的保护机制。方法 :采用成年大鼠离体海马脑片 ,用胞外记录的电生理技术 ,观察GABA对急性缺氧后海马脑片诱发电位的影响。结果 :①GABA可明显延迟PV的消失 ,但对PS却无影响 ;②给予GABAA 受体拮抗剂荷包牡丹碱 (bicuculine)以及Cl 通道阻抗剂NPPB可阻断GABA的保护作用。结论 :GABA可提高海马脑片耐缺氧妮力 ,其机制可能与GABA通过GABAA 受体提高Cl

基于小波多尺度分析和Kalman滤波的微机保护算法

提出了一种新的微机保护算法。采用小波多尺度变换对采集信号进行分解得到平滑信号和细节信号,在细节信号上利用模极大值法确定异常发生与否及其产生时刻。异常产生后进入故障处理程序,启动Kalman滤波器。利用平滑信号更新滤波器的观测值,减少故障信号暂态噪声的干扰,提高了滤波算法的收敛速度;利用细节信号实时在线计算测量噪声的方差,提高了滤波算法的收敛精度;小波分析对故障进行初次检测和判断,而滤波器估计出故障信号基波分量结合继电保护原理对故障进行再次判断,提高了保护算法的可靠性。在Matlab/Simulink环境下搭建仿真模型对算法进行验证与测试,仿真结果证实了算法的可行性和有效性。

钙离子在海马脑片缺氧损伤中的作用

本工作用海马脑片缺氧模型，观察了无钙、高镁人工脑脊液以及钙通道阻断剂尼莫地平对缺氧后海马脑片ＣＡ１区锥体细胞诱发群锋电位（ＰＳ）的影响。发现用无钙与高镁人工脑脊液灌流脑片，可显著促进脑片缺氧后ＰＳ的恢复，而尼莫地平对缺氧脑片ＰＳ的恢复则无明显促进作用。结果表明：钙离子参与海马脑片缺氧后神经元及其突触传递的损伤过程，而电压敏感性钙通道Ｌ亚型在缺氧损伤中可能不起主要作用。

基于无迹Kalman滤波的基波分量提取

针对全波Fourier和Kalman滤波算法在提取基波分量时对频率偏移敏感和直流偏移量抑制能力差的缺点,提出了一种新的基波分量提取算法。首先以故障信号的直流偏移量、基波角频率和基波分量作为状态变量,建立信号的非线性状态空间模型。然后采用无迹Kalman滤波(Unscented Kalman Filter,UKF)在信号的非线性模型基础上估计出基波分量。此外,滤波算法还能够实时估计出信号的直流偏移量和基波频率。通过多个算例仿真对算法进行验证与测试,仿真结果证实了算法的可行性和有效性。仿真结果表明,算法对频率突变和直流偏移量突变具有良好的适应性,能快速准确地提取出基波分量。

维生素C对海马神经细胞生长影响的研究

本研究用新生大鼠脑海马区细胞进行体外培养，观察不同浓度（１０－３～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）维生素Ｃ（ＶＣ）对海马细胞生长的影响。结果表明，培养１４天的细胞存活数在１０－６ｍｏｌ／Ｌ和１０－５ｍｏｌ／ＬＶＣ组与对照组（培养液中不加ＶＣ）之间无明显差别，１０－４ｍｏｌ／ＬＶＣ组明显高于对照组，而１０－３ｍｏｌ／ＬＶＣ组存活细胞很少。进一步观察可见１０－４ｍｏｌ／ＬＶＣ组细胞突起数目、长度、胞体面积和周长均高于对照组（Ｐ＜０．０５），细胞总蛋白相对含量明显增加。结果提示，１０－４ｍｏｌ／ＬＶＣ对体外培养海马神经细胞的生长有一定促进作用。

用Fura-2测定缺氧时海马细胞内游离钙离子浓度的变化

本文用Fura-2荧光测定技术直接监测了缺氧时大鼠海马细胞内游离钙离子浓度[Ca^(2+)]_1的变化。实验发现,缺氧可使海马细胞[Ca^(2+)]_1显著增高,并且在缺氧过程中其增高呈现明显的时相性变化。在去除细胞外钙的情况下,缺氧仍能使[Ca^(2+)]_1增高,仅增高幅度有所降低;另外[Ca^(2+)]_1不再出现时相性变化特征。结果提示,胞外Ca^(2+)的内流以及内源Ca^(2+)的释放均参与了缺氧所致海马细胞[Ca^(2+)]_1的增高过程,缺氧时[Ca^(2+)]_1升高的时相性变化为胞外Ca^(2+)内流引起。

rhIL-1β、rhIL-2和rhIL-6对体外培养海马神经胶质细胞c-fos表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了重组人白细胞介素-1β、重组人白细胞介素-2和重组人白细胞介素-6对体外培养大鼠海马神经胶质细胞c-fos表达的影响。结果证明，培养12d的海马神经胶质细胞与重组人白细胞介素-1β（100U／ml）、重组人白细胞介素-2（200U／ml）和重组人白细胞介素-（200U／ml）一起孵育2h后出现FOS-免疫反应阳性的细胞核，随着所给剂量的逐渐加大，FOS反应阳性胞核数量也逐渐增多．图象分析的结果显示，FOS反应阳性胞核的平均光密度亦随剂量的逐渐加大而逐渐增加．本研究的结果提示：重组人白细胞介素-1β、-2及-6均能诱导体外培养大鼠海马神经胶质细胞c-fos的表达。说明三者对体外培养的海马神经胶质细胞具有生物学作用。推测c－fos表达可能是这些细胞因子发挥生物效应的重要中间途径。

基于多尺度形态学和Kalman滤波的基波分量提取

针对Kalman滤波在提取基波分量时存在暂态噪声抑制能力差和噪声统计特性不精确的缺点,提出了一种新的基波分量提取算法。采用改进的数学形态滤波器对采集信号进行多尺度分析得到平滑信号和细节信号,改进的滤波器使用不同形状的结构元素,有效地提高噪声抑制能力。利用平滑信号更新Kalman滤波器的观测值,减少故障信号暂态噪声的干扰,提高了滤波算法的收敛速度;利用细节信号实时在线计算测量噪声的方差,提高了滤波算法的收敛精度。在Matlab/Simulink环境下搭建仿真模型对算法进行验证与测试,仿真结果证实了算法的可行性和有效性。

腺苷对缺氧时海马神经元内游离Ca^(2+)的影响

实验用Fluo-3负载细胞，在激光扫描共聚焦显微镜下直接监测缺氧后分散培养的大鼠海马CA1区神经元内游离Ca2+浓度（［Ca2+］i）的变化，观察腺苷对这种变化的影响并初步探讨其作用机制。结果发现，急性缺氧使海马神经元［Ca2+］i显著升高；腺苷（100μmol/L）明显抑制缺氧引起的［Ca2+］i增高，腺苷A1受体拮抗剂CPT以及K+通道阻断剂4-AP和ATP敏感性K+通道阻断glipizide均可拮抗腺苷的抑制作用。结果表明，腺苷通过其A1受体介导，可能激活4-AP和／或ATP敏感性K+通道，从而抑制缺氧引起的海马神经元胞内Ca2+升高。