HSP60通过上调TREM2表达改善肺缺血再灌注损伤

目的:探讨热休克蛋白60(HSP60)调控2型髓系细胞触发受体(TREM2)对肺缺血再灌注损伤(LIRI)小鼠的保护作用。方法:将24只C57BL/6小鼠随机分成对照组、HSP60组、LIRI组、LIRI+HSP60组,每组6只。LIRI+HSP60组于术前1 h腹腔注射HSP60(5μg/g)。HSP60组腹腔注射等剂量的HSP60;对照组不做任何处理。LIRI组和LIRI+HSP60组小鼠建立LIRI模型,术后6 h收集左肺组织标本,苏木精-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化,透视电镜观察肺组织超微结构改变,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)的表达,实时荧光定量PCR(qPCR)法与Western blotting检测TREM2 mRNA及TREM2蛋白的相对表达水平。结果:与对照组和HSP60组比较,LIRI组肺组织损伤严重,肺组织结构改变明显,肺损伤评分明显增加(P<0.05),炎症因子IL-1β和IL-18水平均明显升高(均P<0.05),TREM2 mRNA及其蛋白相对表达水平均明显降低(均P<0.05)。与LIRI组比较,LIRI+HSP60组肺组织病理学损伤明显改善,肺损伤评分明显降低(P<0.05),炎症因子IL-1β和IL-18表达明显减少(均P<0.05),TREM2 mRNA及其蛋白的相对表达水平均明显升高(均P<0.05)。与对照组相比较,HSP60组TREM2 mRNA及蛋白的相对表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:HSP60可以减轻LIRI,其机制可能与上调TREM2的表达有关。

半乳凝集素3在小鼠肺缺血再灌注损伤中的表达

目的:探讨半乳凝集素3(Gal3)在小鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)模型中的表达情况。方法:将20只C57BL/6J雄性小鼠随机分为假手术组和4个实验组(即LIRI后2 h组、LIRI后6 h组、LIRI后12 h组、LIRI后24 h组),每组4只。假手术组只开胸不夹闭肺门,实验组夹闭肺门60 min并分别于松开血管夹后2 h、6 h、12 h、24 h收集左肺标本。采用苏木精—伊红(HE)染色法和肺组织湿干重比(W/D)观察肺组织病理学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、western blotting、免疫荧光染色法检测Gal3 mRNA与Gal3蛋白的表达水平。结果:与假手术组相比,LIRI后各实验组出现肺组织损伤,组织结构破坏明显,肺损伤评分和W/D均升高,炎症因子IL-1β和TNF-α水平升高(均P<0.05),在LIRI后6 h肺组织病理学损伤程度和炎性因子水平达到峰值(P<0.05),随后逐渐降低。与假手术组相比,LIRI后各实验组Gal3 mRNA及其蛋白表达水平升高,Gal3免疫荧光染色表达水平升高(P<0.05),均于LIRI后6 h达到高峰(P<0.05),然后逐渐下降。结论:小鼠LIRI后Gal3表达升高,高水平的Gal3可能与LIRI后的肺组织损伤和炎症爆发有关。

2型髓系细胞触发受体在小鼠肺缺血/再灌注损伤中的作用及调控机制

目的探讨2型髓系细胞触发受体(TREM2)在小鼠肺缺血/再灌注损伤(LIRI)中的作用及其可能的调控机制。方法将36只健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成正常对照组及LIRI 2、6、12、24、48 h组,每组6只。采用开胸夹闭左肺肺门法建立LIRI模型。取各组小鼠左肺组织,测定肺湿/干质量比值(W/D),苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理学改变,透射电镜下观察肺组织超微结构改变;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织白细胞介素(IL-1β、IL-18)水平;用聚合酶链反应(PCR)检测肺组织TREM2和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)的mRNA表达;用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肺组织TREM2、caspase-1、细胞焦亡标志成孔蛋白Gasdermin-D(GSDMD)的蛋白表达。结果LIRI后2 h模型小鼠肺组织开始出现损伤,肺超微结构改变,肺组织病理学评分增加;6 h时肺损伤程度最为严重;12 h后肺损伤逐渐减轻,肺组织病理学评分逐渐降低。与正常对照组比较,LIRI 2、6、12、24、48 h组肺W/D比值和肺组织病理学评分均明显增高,差异均有统计学意义〔肺W/D比值:7.06±0.52、8.34±0.17、6.42±0.35、5.34±0.25、5.59±0.45比4.69±0.23,肺组织病理学评分(分):5.50±0.54、9.75±0.89、5.88±0.84、3.63±0.74、4.13±0.64比1.13±0.35,均P<0.05〕。与正常对照组比较,LIRI后2 h肺组织IL-1β、IL-18水平即明显升高,于6 h达峰值〔IL-1β(ng/L):502.76±12.25比56.50±8.07,IL-18(ng/L):414.02±10.75比81.63±5.29,均P<0.05〕,随后逐渐降低,48 h时仍显著高于正常对照组。PCR和Western blotting结果显示,LIRI后2 h模型小鼠TREM2表达即明显低于正常对照组,于6 h达谷值〔TREM2 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.47±0.05比1.02±0.05,TREM2/GAPDH:0.23±0.13比0.48±0.17,均P<0.05〕,随后逐渐升高,于24 h达峰值〔TREM2 mRNA(2^(-ΔΔCt)):3.98±0.15比1.02±0.05,TREM2/GAPDH:0.71±0.17比0.48±0.17,均P<0.05〕;而caspase-1和GSDMD的表达趋势与TREM2相反,呈先升高后降低趋势,均于再灌注后6 h达到高峰〔caspase-1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):2.20±0.13比1.01±0.02,caspase-1/GAPDH:0.64±0.02比0.20±0.06,GSDMD/GAPDH:1.23±0.01比0.87±0.02,均P<0.05〕。结论TREM2可能参与了小鼠LIRI的发生,其机制可能与TREM2影响caspase-1介导的肺内细胞焦亡有关。

“一路三同先锋行”助企业发展促民族团结

近年来,广西交通投资集团柳州高速公路运营有限公司融安分公司党支部(以下简称融安分公司党支部)通过打造“一路三同先锋行”支部特色,以高速公路为纽带,通过“同员工交心”“同企业齐心”“同社会连心”三个维度激发调动员工民族团结意识、奋进向前意识和社会担当意识,把高速公路管养成沿线各民族文化传播交融的同心路、促进沿线地区乡村振兴的致富路和推动各族人民进步的团结路,形成员工、企业、社会互促互进的良性循环。