静注人免疫球蛋白对奥沙利铂诱导小鼠脾脏/肠道损伤的救治作用

目的探讨静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobuin,IVIG)对奥沙利铂诱导的化疗损伤小鼠的救治效果。方法将6~8周龄的野生型雄性BALB/c小鼠51只,随机均分为:1)空白对照组;2)化疗组(腹腔注射奥沙利铂);3)干预组(注射奥沙利铂后给予IVIG)。通过外周血细胞计数、解剖学、HE(苏木精-伊红)染色、PAS(过碘酸雪夫)染色及Luminex等方法研究各组小鼠的外周血细胞组成、脾指数、脾脏和肠道的病理学特征、结肠炎症因子水平等,分析IVIG对奥沙利铂诱导的化疗损伤的救治效果。结果与空白对照组相比,化疗组小鼠外周血中的白细胞数量(109/L)(2.45±0.51 vs 0.75±0.27,P<0.0001)和血小板数量(109/L)(1249.00±100.04 vs 347.55±110.33,P<0.0001)显著减少,淋巴细胞比例(75.37%±7.30%vs 62.57%±12.09%,P<0.001)明显下降,脾指数显著降低(P<0.0001),结肠中的杯状细胞减少(P<0.05)、促炎因子TNF-α和IFN-γ(P<0.01)升高、抗炎因子IL-10和IL-13(P<0.05)降低。与化疗组相比,IVIG干预则明显增加了小鼠外周血中的白细胞数量(109/L)(0.75±0.27 vs 1.11±0.30,P<0.05)和血小板数量(109/L)(347.55±110.33 vs 698.49±182.86,P<0.0001),提高了淋巴细胞比例(62.57%±12.09%vs 71.40%±9.08%,P<0.05),脾指数也明显升高(P<0.0001),增加了小鼠结肠中杯状细胞的数量(P<0.01),降低促炎因子TNF-α的水平(P<0.05)、升高抗炎因子IL-10和IL-13(P<0.05)的水平。结论在奥沙利铂诱导的化疗损伤小鼠中,IVIG能够减轻小鼠的造血系统、脾脏和肠道损伤,提示IVIG可用于改善奥沙利铂在肿瘤患者化疗中引起的机体损伤。

IVIG中IgG片段对巨噬细胞吞噬致敏红细胞功能的影响

目的 研究静注人免疫球蛋白(pH4)(human immunoglobulin for intravenous injection, IVIG)中主要成分免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG) Fab段、以及F(ab′)2段及Fc段对THP-1来源的巨噬细胞吞噬致敏红细胞吞噬功能的影响。方法 首先利用蛋白酶切技术和分离纯化技术,从IVIG中制备IgG Fc段、Fab段以及F(ab′)2段,并采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)进行鉴定;其次,使用佛波酯诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞;使荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记致敏红细胞,采用流式细胞术检测上述各组分对M0型巨噬细胞吞噬致敏红细胞的吞噬能力的影响。结果 SDS-PAGE结果显示,所制备的IgG各片段均满足后续试验要求。流式结果表明,已成功建立M0型巨噬细胞吞噬致敏红细胞的吞噬模型。将IVIG中IgG各片段分别作用于M0型巨噬细胞吞噬致敏红细胞,当IgG Fc段蛋白浓度从0.1μg/mL增加至10μg/mL时,其对M0型巨噬细胞吞噬致敏红细胞的吞噬率从(24.21±0.58)%降至(12.27±0.19)%;当IVIG蛋白浓度从0.1μg/mL增加至10μg/mL,其吞噬率从(20.57±0.39)%下降至(0.20±0.03)%。当蛋白浓度相同时(10μg/mL),IgG Fc段对吞噬作用的抑制作用仅为IVIG的一半。此外,IgG Fab片段、F(ab′)2以及人血清白蛋白均不能抑制M0型巨噬细胞的吞噬作用。结论 IVIG可以有效地抑制THP-1来源的M0型巨噬细胞的吞噬作用,这种抑制作用主要依赖于IgG Fc段,而与IgG Fab段和F(ab′)2无关。