中药熏洗方对奥沙利铂周围神经毒性减毒作用的临床研究

目的:针对接受奥沙利铂化疗后出现的周围神经毒性,从临床角度观察中药熏洗方对FOLFOX改良方案治疗胃肠道恶性肿瘤时产生的周围神经毒性的减毒作用,并探讨其可能的作用机制。方法:选择2011年3月-2012年1月武汉市第一医院肿瘤科使用FOLFOX改良方案化疗的胃肠道恶性肿瘤初治患者75例。采用随机、对照的临床研究方法,将患者分成治疗组37例和对照组38例。对照组接受单纯化疗,治疗组在对照组的基础上,自化疗前1天开始使用中药熏洗方熏蒸/浸泡四肢,每日1次,连用8天。两组均以21天为1个观察周期,连续观察2个周期,第二周期观察结束后,评价两组周围神经毒性、其他毒副反应的发生情况以及肿瘤标志物CEA、CA724的变化情况。治疗2个周期后,将对照组中出现周围神经毒性反应的27名患者在其第三周期、第四周期化疗期间给予中药熏洗治疗。第四周期观察结束后,评价其周围神经毒性在用药前后的变化情况。结果:治疗组和对照组患者在第一周期和第二周期的研究中,周围神经毒性发生率和严重程度方面均具有非常显著性差异(P<0.01),治疗组均显著低于对照组。两组在其他毒副反应的发生以及肿瘤标志物CEA、CA724的变化方面均无显著性差异(P>0.05)。在对照组第三周期和第四周期治疗中,接受中药熏洗治疗前与治疗后周围神经毒性严重程度具有非常显著性差异(P<0.01),治疗后毒性反应明显改善。在安全性方面,2例出现明显的皮肤过敏反应,但在停药后症状自行缓解。研究中未见患者皮肤出现破溃。结论:中药熏洗方对于奥沙利铂周围神经毒性具有明显的减毒作用,安全性高。

电针联合氟西汀片对骨癌痛大鼠抑郁样行为改善作用的研究

目的:观察电针联合氟西汀片对骨癌痛大鼠抑郁样行为的改善作用。方法:雄性SPF级SD大鼠,参照Medhurst的方法建立大鼠胫骨癌痛模型,挑选表现有抑郁样行为的大鼠48只,随机分为模型对照组(模型组)、电针治疗组(电针组)、氟西汀片治疗组(氟西汀组)和电针联合氟西汀片治疗组(联合治疗组)4组;另设空白对照组(空白组)大鼠12只。造模成功后给予相应干预12天。采用旷场试验、悬尾试验和强迫游泳试验观察胫骨癌痛模型大鼠抑郁样行为学的改变。结果:旷场试验中模型组大鼠的活动里程低于空白组,而悬尾试验、强迫游泳试验中模型组大鼠的不动时间均高于空白组(P<0.01)。旷场试验中3组治疗组大鼠的活动里程均高于模型组,而悬尾试验、强迫游泳试验中3组治疗组大鼠的不动时间均低于模型组。结论:胫骨癌痛模型大鼠存在抑郁样行为学改变,电针联合氟西汀片治疗可以改善胫骨癌痛模型大鼠的抑郁样行为,其疗效优于单纯的电针治疗或氟西汀片治疗。

电针联合疼痛贴对骨癌痛大鼠的抗抑郁作用机制

目的观察电针联合疼痛贴对骨癌痛大鼠的抗抑郁作用并探讨其可能的机制。方法建立大鼠胫骨癌痛模型,随机分为模型组、电针治疗组、疼痛贴治疗组、电针联合疼痛贴治疗组,另设空白组。造模成功后给予对应干预,观察胫骨癌痛模型大鼠行为学的改变。采用HPLC检测基底杏仁核脑组织中单胺类神经递质的变化、Elisa检测氧化应激水平的变化,Westernblot检测凋亡蛋白的表达。结果旷场实验中模型组大鼠的活动里程低于空白组,悬尾实验、强迫游泳实验中模型组大鼠的不动时间均高于空白组(P<0.01)。模型组5-HT、NE、DA含量均低于空白组(P<0.01),MDA含量和Caspase-3表达均高于空白组、CAT活性和Bcl-2表达均低于空白组(P<0.01)。旷场实验中三组治疗组的大鼠活动里程均高于模型组,悬尾实验、强迫游泳实验中三组治疗组的大鼠不动时间均低于模型组;三组治疗组的5-HT、NE、DA含量均明显高于模型组,MDA含量和Caspase-3表达均低于模型组,CAT活性和Bcl-2表达均高于模型组(P<0.01)。结论电针治疗、疼痛贴治疗以及联合治疗可以改善胫骨癌痛模型大鼠的抑郁样行为学改变,其机制与缓解疼痛纠正脑内单胺类神经递质平衡失调、抗氧化应激和减轻神经细胞凋亡有关。

骨肉瘤组织中微小RNA-508-5p的表达及临床意义

目的探讨骨肉瘤组织中微小RNA-508-5p(miR-508-5p)的表达及临床意义。方法收集2013年1月至2017年12月手术切除的66例骨肉瘤组织和31例骨软骨瘤组织,采用实时定量PCR(QPCR)检测上述组织中miR-508-5p的表达水平,比较骨肉瘤组织和骨软骨瘤组织中miR-508-5p的水平差异;以骨肉瘤组织中miR-508-5p水平的中位数为参考分为低表达(≤中位数)和高表达(>中位数),进一步分析骨肉瘤组织miR-508-5p水平与临床病理特征[性别、年龄、肿瘤部位、Enneking分期、病理亚型和碱性磷酸酶(AKP)水平]的关系;根据随访数据分析不同miR-508-5p水平患者的预后情况。结果QPCR检测结果显示,66例骨肉瘤组织中miR-508-5p的表达水平为0.399±0.167,低于31例骨软骨瘤组织的1.232±0.550(P<0.05)。以66例骨肉瘤组织miR-508-5p水平的中位数0.371为界值分为低表达(≤0.371)和高表达(>0.371)各33例,分析发现miR-508-5p水平与性别、年龄、肿瘤部位和病理亚型均无关(P>0.05),而与Enneking分期和AKP水平有关,其中ⅡB、Ⅲ期miR-508-5p水平低于Ⅰ、ⅡA期,AKP升高者miR-508-5p水平低于AKP正常者,差异有统计学意义(P<0.05)。全组随访15~60个月,中位随访29.0个月。66例骨肉瘤患者的中位总生存期(OS)为30.0个月,其中miR-508-5p低表达患者的中位OS为27.0个月,短于高表达者的54.0个月,差异有统计学意义(HR=3.255,95%CI:1.791~5.915,P<0.001)。结论骨肉瘤组织中miR-508-5p表达降低且与Enneking分期和AKP水平有关,可能与骨肉瘤的发生、发展有关,在骨肉瘤诊断及病情评估方面有一定价值。

肺癌合剂联合吉非替尼治疗EGFR敏感突变的非小细胞肺癌的疗效及安全性评价

目的研究肺癌合剂联合吉非替尼治疗表皮生长因子受体(EGFR)敏感突变的非小细胞肺癌的疗效及安全性。方法回顾性选取2018年1月至2020年1月武汉市第一医院收治的80例EGFR敏感突变的非小细胞肺癌患者为研究对象,根据不同用药方式分为研究组(n=40)与对照组(n=40)。对照组单用吉非替尼治疗,研究组联用吉非替尼与肺癌合剂治疗。比较2组治疗前、治疗4周后T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))含量、血清肿瘤标志物(神经元特异性烯醇化酶、癌胚抗原、血清癌抗原125、血清细胞角蛋白19片段)水平以及治疗总有效率、不良反应发生率(恶心呕吐、贫血、高血压、皮疹、手足综合征)。结果治疗4周后,2组患者CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平较治疗前更高,CD8^(+)含量与血清神经元特异性烯醇化酶、癌胚抗原、血清癌抗原125、血清细胞角蛋白19片段水平较治疗前更低,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗4周后,研究组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)含量[(63.08±5.23)%、(37.52±4.26)%、1.32±0.25]较对照组[(30.03±3.56)%、(37.52±4.26)%、0.84±0.22]更高,CD8^(+)含量与血清神经元特异性烯醇化酶、癌胚抗原、血清癌抗原125、血清细胞角蛋白19片段水平[(53.42±4.38)%、(16.12±3.93)ng/mL、(30.24±4.38)ng/mL、(50.23±6.48)U/mL、(6.52±3.09)ng/mL]较对照组[(33.28±4.76)%、(21.06±3.86)ng/mL、(59.81±5.18)ng/mL、(78.69±6.76)U/mL、(10.86±3.14)ng/mL]更低,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组总有效率(87.50%)明显高于对照组(65.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组不良反应发生率(10.00%)与对照组(12.50%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌合剂联合吉非替尼治疗EGFR敏感突变的非小细胞肺癌的疗效显著,可提升患者免疫功能与改善肿瘤标志物水平,且不良反应少,安全性高。

5种不同治法中药对人肺癌A549细胞增殖的影响

目的:探讨益气类、养阴类、清热解毒类、活血化瘀类、化痰类等5种不同治法中药对人肺癌A549细胞的影响及其机制。方法:将30只雌性SD大鼠随机分为6组(5组中药组和1组空白组),分别灌服生药浓度为2 g/mL的五种中药溶液及等量生理盐水,灌胃2次/d,在第7 d最后1次灌胃后2 h取血清;A549细胞株随机分为7组(5组中药组,1组空白血清组,1组生理盐水组),分别加用5种中药,空白血清,生理盐水,48 h后采用MTT法测定对细胞增殖的抑制率;流式细胞法测定细胞周期。结果:5种中药对A549细胞株均有不同程度的抑制作用,其中清热解毒药和活血化瘀药组相较于其它3组具有明显的抑制作用。清热解毒药类和活血化瘀类中药可诱导细胞凋亡。结论:不同治法中药对人肺癌A549细胞株抑制作用不一,其中清热解毒类和活血化瘀类中药抑制作用较明显,其抑制机制之一可能与其诱导细胞凋亡相关。

清热解毒类与活血化瘀类中药对肺癌A549细胞增殖抑制的机制研究

目的探讨清热解毒类与活血化瘀类中药对肺癌A549细胞抑制增殖的可能机制。方法利用动物含药血清技术平台获得清热解毒类、活血化瘀类中药及正常血清。对数期A549细胞株随机分为3组(清热解毒药组、活血化瘀药组、正常血清组),将相对应的血清分别作用48h后,WB法检测CyclinD1、P53、PCNA、TNF-α、IL-1、CD4、CD8、BCL-2、Bax、VEGF,RT-PCR法检测BAX、bcl-2、VEGF,ELISA法检测TNF-α、IL-1。结果清热解毒药组与空白组相比,CyclinD1、PCNA表达明显下降(P<0.01),TNF-α、IL-1,CD4、CD8表达明显升高(P<0.01),CD4/CD8升高;P53、Bcl-2、Bax、VEGF无明显变化(P>0.05)。活血化瘀组与空白组相比,PCNA、BCL-2、VEGF表达明显下降(P<0.01),P53、Bax表达明显上升(P<0.01),CyclinD1、TNF-α、IL-1,CD4、CD8表达无明显差异(P>0.05)。结论清热解毒药与活血化瘀药既有共同的抗肿瘤机制,也有各自不同的抗肿瘤机制。清热解毒药的抗肿瘤机制体现在抑制增殖,诱生细胞因子,增强免疫活性方面,而活血化瘀类中药的抗肿瘤机制具体体现在抑制增殖,促进凋亡,抑制血管生成方面。

张赤志教授治疗早期非酒精性脂肪性肝病经验

张赤志教授系湖北省中医院肝病科主任医师，博士生导师，湖北省知名中医，中华中医肝病专业委员会委员，从事肝病临床、教学、科研工作40余年，学验俱丰，擅长中西医结合诊疗肝病。笔者有幸侍诊于侧，受其教诲，获益良多。现在将其治疗非酒精性脂肪肝经验总结于下：

癌痛方正丁醇提取物抑制癌性疼痛的分子机制

目的探讨癌痛方正丁醇提取物(BTE)对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞凋亡、增殖及降钙素基因相关肽(CGRP)/磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)信号通路的影响。方法以皮下注射肿瘤细胞的方法建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,共20只,随机分为模型对照组及BTE组,每组10只。模型对照组给予0.9%氯化钠溶液灌胃,BTE组给予BTE1.97 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,连续14 d,处死动物,剥离肿瘤组织。检测两组肿瘤质量、体积改变,苏木精-伊红(HE)染色法分析肿瘤组织形态改变,免疫荧光法检测5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BRDU)阳性细胞比例及TUNEL阳性细胞数比例,Western blotting法分析CGRP/p-CREB信号通路改变。结果模型对照组和BTE组肿瘤质量分别为(2.20±0.82),(1.38±0.41)g;体积分别为(3.34±1.35),(1.35±0.34)cm^(3)(均P<0.05)。BTE组肿瘤组织部分细胞肿胀及细胞核固缩,BRDU阳性细胞比例显著降低(P<0.01),TUNEL阳性细胞数比例显著升高(P<0.01),CGRP及p-CREB蛋白表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论BTE能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞增殖,促进其凋亡,具有抗肿瘤及镇痛作用,其作用机制可能为抑制CGRP/p-CREB信号通路。

核糖体蛋白25(RPS25)通过调节c-Myc促进肾透明细胞癌的发生发展

目的探讨核糖体蛋白25(RPS25)基因在肾透明细胞癌(ccRCC)中的作用。方法利用定量PCR、Western blot和双荧光素酶报告系统检测RPS25基因在ccRCC组织和肾癌细胞系中的表达以及c-Myc基因启动子活性;通过MTS实验和Transwell实验研究RPS25及其下游基因的过表达或干扰对肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭等功能的影响;利用Kaplan-Meier法分析TCGA数据库中ccRCC患者中RPS25的表达与预后的关系。结果定量PCR检测发现RPS25在肾癌细胞系和ccRCC组织中的表达上调(P<0.05)。RPS25的下调可抑制肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.001)。在肾癌细胞中过表达RPS25可通过翻译和转录途径增加c-Myc的表达,且共表达c-Myc能够降低由RPS25干扰导致的肿瘤抑制作用(P<0.01)。Kaplan-Meier曲线显示RPS25的高表达与ccRCC患者的不良预后相关(P<0.01)。结论RPS25作为一个癌基因在ccRCC中发挥功能,对ccRCC的临床诊疗和预后评估具有重要价值。

DAAM2促进VHL的泛素化在肾癌发生发展中的作用

目的探讨蓬乱蛋白相关形态形成活化因子(DAAM2)在肾癌发生发展中的作用。方法采用定量PCR、Western blot、免疫共沉淀等技术系统研究DAAM2基因在肾癌组织中的表达及其对VHL(Von Hippel-Lindau)蛋白稳定性的调节作用;通过CCK8实验和Transwell实验研究DAAM2的过表达或干扰对肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭等功能的影响;利用Kaplan-Meier法分析TCGA数据库中肾癌患者肾脏肿瘤组织DAAM2的表达与患者预后的关系。结果定量PCR结果显示DAAM2在肾癌细胞系以及肾癌组织中高表达。体外实验证实DAAM2的过表达促进肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭,而抑制DAAM2的表达则产生相反的效应。进一步机制研究表明,在肾癌细胞中DAAM2与VHL相互作用,并促进VHL的泛素化降解;在肾癌细胞中共表达VHL能部分逆转DAAM2的作用。Kaplan-Meier曲线提示DAAM2的高表达与肾癌患者的不良预后相关。结论 DAAM2可能通过促进VHL降解在肾癌发生发展中发挥作用。

不分泌型多发性骨髓瘤并间变性浆细胞瘤1例

不分泌型多发性骨髓瘤(non-secretory multiplemyeloma, NSMM)是以恶性浆细胞增生伴血和尿中缺乏可检测的单克隆免疫球蛋白(M-成分)为特征,占骨髓瘤的1%~5%,临床罕见,诊断困难,易漏诊或误诊。本文报道不分泌型多发性骨髓瘤并间变性浆细胞瘤1 例,以期提高对该病的认识。

基于降低TLR9表达的电针联合疼痛贴对骨癌痛大鼠的镇痛作用研究

目的研究电针联合疼痛贴对骨癌痛大鼠的镇痛作用及对脊髓Toll样受体9(TLR9)表达的影响。方法选用雄性SPF级SD大鼠84只,建立大鼠胫骨癌痛模型。将大鼠分为7组,每组12只:模型组、针刺安慰组、胶布安慰组、联合安慰组、电针组、疼痛贴组、联合组。另有空白组大鼠12只。造模成功后给予对应干预12d,进行自发性疼痛评分测定、热痛觉过敏测定、机械性痛觉超敏测定。处死动物,留取腰椎膨大部位冻存,PCR和Western blot检测TLR9的表达。结果空白组的自发性疼痛评分结果低于模型组、缩爪潜伏期(PWL)时间、机械性痛阈值高于模型组(P<0.01)。疼痛贴组、联合组的自发性疼痛评分结果低于模型组、PWL时间高于模型组(P<0.05)。电针组、疼痛贴组、联合组的机械性痛阈值高于模型组(P<0.01)。模型组大鼠脊髓内的TLR9mRNA与蛋白水平明显升高,电针组、疼痛贴组、联合组的TLR9mRNA与蛋白表达水平较模型组均明显下降(P<0.01)。结论疼痛贴联合电针治疗具有缓解骨癌痛大鼠疼痛的作用,其机制与降低TLR9表达有关。

江边一碗水的化学成分研究

目的研究"江边一碗水"的化学成分。方法运用系统溶剂法、正反向硅胶色谱柱法及制备型高效液相法对江边一碗水的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质及波普数据鉴定其结构。结果从江边一碗水95%乙醇提取物的乙酸乙酯及正丁醇部位分离得到了12个化合物,其中木脂素类化合物6个,黄酮类化合物5个,甾醇类化合物1个,分别为:鬼臼毒素,苦鬼臼毒素,山荷叶素葡萄糖苷,山奈酚,槲皮素,β-谷甾醇,去氢鬼臼毒素,槲皮苷,芦丁,苦鬼臼毒素葡萄糖苷,4'-去甲基去氢鬼臼毒素,3-O-甲基槲皮素。结论化合物12为首次从该植物中分离得到。