饲粮粗蛋白质水平对5~9月龄生长水牛生长性能、养分表观消化率和瘤胃发酵参数的影响及其可消化粗蛋白质需要量的预测

本试验旨在研究饲粮粗蛋白质(CP)水平对5~9月龄生长水牛生长性能、养分表观消化率和瘤胃发酵参数的影响,并对其可消化粗蛋白质(DCP)需要量进行预测。选取24头平均体重为(210.61±6.43)kg、体况相近的健康5~9月龄生长水牛,随机分为3组,即低CP水平(12.49%)饲粮组(LP组)、中CP水平(15.64%)饲粮组(MP组)、高CP水平(18.79%)饲粮组(HP组),每组8个重复,每个重复1头牛。预试期15 d,正试期50 d。饲养试验结束后,每组随机选5头牛进行为期5 d的消化试验,采集粪样和饲粮样,根据粪样和饲粮样中CP含量计算DCP采食量(DCPI),通过析因式原理,建立DCP需要量的回归方程。结果显示:1)MP组和HP组生长水牛的平均日增重(ADG)显著高于LP组(P<0.05);MP组和HP组的干物质采食量(DMI)显著高于LP组(P<0.05)。2)MP组的CP和干物质(DM)表观消化率显著高于LP组(P<0.05);MP组和HP组的粗脂肪(EE)表观消化率显著高于LP组(P<0.05);MP组的中性洗涤纤维(NDF)表观消化率显著高于LP组和HP组(P<0.05)。3)HP组的瘤胃液氨态氮(NH3-N)浓度显著高于LH组和MP组(P<0.05);LP组的瘤胃液乙酸浓度显著高于HP组(P<0.05);LP组的瘤胃液异丁酸、异戊酸和戊酸浓度显著高于MP组和HP组(P<0.05),同时MP组的瘤胃液异丁酸、异戊酸和戊酸浓度显著高于HP组(P<0.05);MP组和HP组的瘤胃液丁酸/总挥发性脂肪酸比值显著高于LP组(P<0.05)。4)按照析因法计算得出生长水牛(体重256 kg左右)维持DCP需要量为3.51 g/(kg W^(0.75)·d),每千克增重所需的DCP为266.87 g。综上所述,饲喂CP水平为15.87%的饲粮可以提高5~9月龄生长水牛的DM、CP、EE和NDF表观消化率以及瘤胃液中乙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸的浓度,有利于提高瘤胃中微生物的活性,进而提高饲料转化效率,促进生长水牛对饲粮中养分的消化吸收。5~9月龄生长水牛的DCP需要量模型为:DCP=3.51W^(0.75)+266.87ΔW(式中:DCP为DCP需要量,g/d;W^(0.75)为代谢体重,kg;ΔW为日增重,kg/d)。

水牛早孕诊断方法比较研究

本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛人工授精后8个时间点晨血的血清中孕酮、雌二醇水平;采用牛早孕试纸检测卡检测尾根血清中的早期妊娠相关糖蛋白,以上早孕检测结果均与B超孕检结果进行对比分析。结果发现:配种后前28d观测水牛的眼部未见异常形态;怀孕母牛的孕酮水平均为5.76ng/mL,自16d开始保持在4.9~8.43ng/mL,至24d有小幅度升高,而未怀孕母牛的孕酮水平则表现下降趋势;配种后28d时采用牛早孕试纸检测卡检测发现有4头水牛怀孕,与B超孕检结果相一致。可以得出,配种后前28d形态学观察法不适用于水牛早期的妊娠诊断;孕牛与未孕母牛的孕酮激素水平变化规律存在差异,可为今后建立水牛早孕诊断方法提供技术支撑;牛早孕试纸检测卡在28d后获得较高的准确率,可应用于水牛早期妊娠诊断。该试验的开展可为今后水牛早期妊娠诊断研究提供参考,同时对促进水牛产业的健康发展具有重要的意义。

奶水牛同期发情效果的影响因素研究

本实验旨在探讨不同药物处理、季节和生产阶段对奶水牛同期发情效果的影响,为进一步优化并提高同期发情效果提供依据。选择2~8岁、体重350~700 kg的本地奶水牛90头(后备牛40头、经产牛50头)。试验一:选取33头后备牛,随机分为2组,采用GnRH+PGF_(2α)+GnRH法(GnRH组)和CIDR+PGF_(2α)法(CIDR组)处理,在秋季观察其同期发情效果;试验二:选取40头后备牛,采用GnRH+PGF_(2α)+GnRH法处理,观察春季、秋季和冬季奶水牛同期发情效果;试验三:选用17头后备牛和50头经产牛,采用GnRH+PGF_(2α)+GnRH法处理,观察不同生产阶段奶水牛同期发情效果。结果表明:GnRH组和CIDR组的发情率、排卵率分别为94.12%、81.25%和81.25%、76.92%;冬季、秋季发情率(100.00%、94.12%)均高于春季(58.33%)(P<0.01),秋、冬两季差异不显著;排卵率由高到低依次为冬季(90.91%)、秋季(81.25%)、春季(57.14%)(P>0.05);后备牛和经产牛的发情率分别为94.12%和96.00%(P>0.05),排卵率分别为81.25%和97.92%(P<0.05)。可见,GnRH组和CIDR组的同期发情效果无显著差异;季节会影响奶水牛的同期发情效果,秋、冬季进行同期发情较为适宜;经产牛的同期发情效果比后备牛好,可能是后备牛生殖系统还未发育成熟,一定程度上影响其排卵。

影响水牛活体采卵效果的因素研究

为探讨不同采卵季节、供体牛年龄和连续采卵时间3个因素对水牛活体采卵效果的影响,本实验选择3~12岁、体重400~700 kg的尼里拉菲水牛52头(其中3~7岁40头、8~12岁12头),根据单因子完全随机试验设计进行分组,分别观察不同采卵季节、供体牛年龄、连续采卵3个月以下(包含3个月)和3~9个月时间对活体采卵效果的影响。结果表明:冬季的头均卵母细胞数、头均可用卵母细胞数均高于春季(P<0.05)和夏季(P<0.01),且夏季的头均卵母细胞数、头均可用卵母细胞数均低于其他季节(P<0.01);3~7岁牛的头均可用卵母细胞数比8~12岁牛的多1.78枚(P<0.05);活体连续采卵时间在3个月以下(包含3个月)的卵母细胞可用率比连续采卵3~9个月的多8.03(P<0.01)。可见,一年四季都可进行水牛活体采卵,但秋、冬季进行活体采卵较为适宜;3~7岁年龄段牛做供体的活体采卵效果更佳;卵母细胞可用率会随着连续采卵时间延长而明显下降,建议同一批牛连续采卵不超3个月。

基于GEO数据库筛选与水牛肌内脂肪沉积相关的候选基因及生物信息学分析

【目的】筛选与水牛肌内脂肪沉积相关的关键基因,为挖掘改善水牛肌内脂肪沉积的分子标记提供参考。【方法】通过GEO数据库下载GSE19586数据集,使用limma R语言程序包筛选广西水牛和青海牦牛36月龄背最长肌的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),使用clusterProfiler R语言程序包分别对上调、下调的DEGs进行GO功能和KEGG通路富集分析,使用STRING在线软件对DEGs进行蛋白互作(PPI)网络分析,并使用Cytoscape 3.9.1软件对其结果进行可视化,筛选排名前二十的枢纽基因。【结果】本研究共筛选出254个DEGs,其中61个上调,193个下调。GO功能富集结果显示,上调DEGs主要富集于肌动蛋白-肌球蛋白细丝滑动、肌球蛋白复合体、肌球蛋白结合、甘油三酯代谢、酰基甘油代谢、中性脂代谢、细胞凋亡信号通路调控等过程;下调DEGs主要富集于短链脂肪酸代谢、不饱和脂肪酸代谢、细胞对酮的反应、细胞基质连接、脂蛋白合成及蛋白质的成熟、加工、聚合等过程。KEGG通路富集结果显示,上调DEGs主要参与代谢途径、脂肪细胞因子、胰岛素抵抗、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、甲状腺激素信号转导途径和碳水化合物消化吸收等信号通路;下调DEGs主要参与代谢途径、吞噬体、溶酶体、黏着斑和细胞凋亡等信号通路。PPI网络中共有116个节点和205条连线,其中上调蛋白26个,下调蛋白90个;筛选出的前20个枢纽基因分别为ACTB、PPARGC 1、NR3C 1、FOS、GOT 2、SERPINE 1、RAC 1、LEP、STAT 5 B、HPRT 1、DDC、FABP 1、HDAC 1、RHOA、EEF 1 A 1、PCK 1、SOD 2、PRKCB、GPX 1和CTGF。【结论】本研究共筛选出广西水牛和青海牦牛36月龄背最长肌DEGs 254个,挖掘到可能与水牛肌内脂肪沉积相关的候选基因MYH 3、GPX 1、LDLR、LEP和PCK 1,为寻找改善水牛肌内脂肪沉积的分子标记提供了理论基础。

水牛ACSL基因家族全基因组及表达分析

为鉴定水牛长链脂酞辅酶A合成酶(long-chain fatty Acyl-CoA synthetases,ACSLs)的家族成员并探究该基因家族在泌乳方面的功能,通过生物信息学技术对水牛ACSL基因家族进行了motif、基因结构分析、共线性分析、不同物种系统进化分析,运用qPCR技术检测ACSLs在不同组织的mRNA表达量。结果表明:水牛ACSL基因家族共有5个家族成员并分别命名为bbu.ACSL1、bbu.ACSL3、bbu.ACSL4、bbu.ACSL5和bbu.ACSL6。染色体分布情况结果显示:bbu.ACSL1位于1号染色体,bbu.ACSL3位于2号染色体,bbu.ACSL4位于25号染色体,bbu.ACSL5位于23号染色体,bbu.ACSL6位于9号染色体。这5个ACSL氨基酸数在699~722 aa,所有蛋白的等电点除ACSL6外均大于7.00。Motif分析发现,除ACSL3和ACSL4缺少motif8外,其余均含有预测出的Motif 1~10,且排序相同。物种内共线性分析结果显示,水牛和普通牛中均不存在串联重复和片段重复,种间共线性分析结果显示,水牛ACSL与普通牛ACSL存在4对片段重复基因。不同物种ACSL系统发育分析显示,ACSL基因家族具有较高的保守性,其中水牛与普通牛和牦牛的聚类更为相近。不同组织表达量分析发现ACSL1、ACSL3在乳腺组织的mRNA表达量高于其他组织,ACSL6在大脑的mRNA表达量高于其他组织,ACSL4在肺部的mRNA表达量高于其他组织,ACSL5在肝的mRNA表达量高于其他组织。根据RNA-seq测序结果分析不同泌乳时期表达量结果显示,ACSL1在整个泌乳期均有高表达量,尤其是在泌乳第50、140和280天。ACSL3和ACSL5在泌乳第7天和第50天高表达,但随着泌乳天数增加,表达量降低。ACSL4和ACSL6在泌乳第7天表达量最高,但在整个泌乳期的表达量均远低于该家族的其他3个成员。

三头摩拉水牛公牛冻精后代初生重与繁殖性能分析

本研究收集了三头摩拉水牛公牛冻精2000-2015年间所有雌性后代F1、F2代的活力、初生重、初产月龄、不同胎次产犊间隔数据,对其进行比较分析,以期为公牛选育和配种计划制定提供数据参考。结果显示,三头公牛后代活力、产犊间隔差异不显著,F1代初生重、初产月龄差异显著,其中B50后代初生重显著高于其他公牛,B36后代初产月龄显著小于其他公牛,B40后代初生重显著低于其他两头公牛,初产月龄显著大于其他两头公牛。可以得出,公牛B50后代初生重较高、初产月龄小,可以作为配种首选。

连续活体采卵对水牛卵母质量的影响

本研究旨在探讨连续活体采卵(OPU)对水牛卵母细胞质量的影响,为建立高效的水牛胚胎体外培养体系奠定基础。实验选择4~12岁、体重580~700 kg的92头水牛(摩拉27头、尼里-拉菲30头、杂交水牛35头),每隔3d进行1次OPU,连续5次OPU。供体不用激素处理,收集的卵母细胞分为A、B、C和D级,计算各级卵母细胞百分率、优质卵母细胞百分率、卵母细胞回收率。结果表明:连续5次OPU时,卵母细胞回收率分别为65.91%、48.16%、43.54%、50.77%和47.31%,第1次OPU时卵母细胞回收率显著高于第2~5次,而第2、3、4、5次之间差异不显著;优质卵母细胞(A+B级)在第1~2次OPU的百分率比第3、4、5次效果差(P<0.05);C级卵母细胞在第1次OPU时的百分率与第2、3、4、5次差异极显著;尼里-拉菲水牛第1次OPU时,C级卵母细胞百分率显著高于与第2、3、4、5次;第1次OPU时的优质卵母细胞百分率显著低于第2、3、5次;摩拉水牛第1次OPU时,C级卵母细胞百分率显著高于第2~5次,第1次卵母细胞百分率显著高于第2~5次,第1次的优质卵母细胞百分率显著低于第4、5次OPU;杂交水牛第1次OPU时的卵母细胞百分率显著高于第2~5次。综上,杂交水牛的优质卵母细胞百分率比尼里-拉菲和摩拉水牛好,并且效果相对稳定。

用B型超声波导引活体采集奶水牛的卵母细胞

本试验利用B型超声波导引活体采集42头奶水牛的卵母细胞,每头牛每周采卵2次,共采卵96次,卵母细胞回收率67%,可用卵母细胞数平均为3.1,成熟培养的囊胚率平均为24.7%。对水牛的卵巢观察结果表明活采对水牛的健康及生殖机能不产生影响。

两种同期发情方法对河流型水牛血液生殖激素的影响

为了解同期发情处理的河流型水牛血液激素变化情况,本试验在夏季选用2种同期发情方案,分别为Ovsynch法(GnRH/PGF/GnRH)和CIDR-Ovsynch法(CIDR/GnRH/PGF/GnRH),对22头健康河流型水牛(摩拉和尼里-拉菲水牛各11头)进行同期发情处理,然后用B型超声波对卵泡发育和排卵进行监测并采集血液测定生殖激素含量。结果显示:Ovsynch法的发情率为91.67%(11/12),排卵率为75.00%(9/12);CIDR法的发情率为100%(10/10),排卵率为40.00%(4/10);摩拉水牛的发情率和排卵率(100%和81.82%)均高于尼里-拉菲水牛(90.91%和36.36%);在不同时间段中,2种方法处理后排卵和不排卵的水牛生殖激素均有一定差异,排卵水牛促卵泡素(FSH)在9~11 d呈逐渐下降趋势,且第11天浓度小于不排卵水牛,雌二醇(E_(2))浓度在7~12 d呈逐渐上升趋势,且第10~11天浓度大幅上升并高于不排卵水牛,胰岛素样生长因子1(IGF-1)浓度总体呈逐渐上升趋势,且第10~12天的浓度高于不排卵水牛;不排卵水牛FSH浓度在9~12 d呈小幅度波动变化,E_(2)浓度在10~12 d呈小幅度波动上升,IGF-1浓度在7~12 d呈波动上升趋势。综上所述,河流型水牛用Ovsynch法比CIDR法的发情排卵效果好,摩拉水牛的同期发情排卵效果优于尼里-拉菲水牛;同期发情处理后正常排卵的河流型水牛在排卵前具有明显的FSH浓度下降以及E_(2)、IGF-1浓度上升规律。

地中海水牛杂交后代生长性能测定初报

[目的]为了解地中海水牛引进我国后,在广西地区的气候适应性及其生长发育情况。[方法]本试验选取地中海杂交后代水牛32头,对其生长发育前期阶段(0～12月龄)的体重、体斜长、体高、胸围、腹围等参数进行连续跟踪测定,并对其的生理生化相关指标进行了测定。[结果]地中海水牛及其杂交后代水牛之间的体温、呼吸、脉搏等生理数值和各项血液生化指标没有差异(P>0.05),并与先前引进的摩拉、尼里及其杂交水牛数值相似;地中海水牛与摩拉、尼里和本地的杂交后代初生重是差异不显著的(P>0.05),随着月龄的增长,地中海水牛与摩拉、尼里杂交后代的各月龄体重增长速度比地中海—本地杂交水牛高,但差异不显著(P>0.05),而地×摩、地×尼杂交水牛在0～12月龄之间的生长速度基本相同;地×摩、地×尼和地×本的杂交水牛1～12月龄的体高、体斜长、胸围和腹围变化趋势大体一致。[结论]地中海水牛引进我国后,不仅能够完全适应我国南方地区尤其广西的环境气候条件,而且表现出良好的生长优势。

水牛同期发情技术的研究进展

水牛发情不明显和产犊间隔长阻碍了水牛的繁殖效率。为了提高水牛的繁殖效率,可通过同期发情技术来实现。本文对应用PGF2α、GnRH、FSH、LH、eCG、hCG、孕酮、雌二醇等激素同期发情方法进行了评价,综述了不同同期发情和排卵方法对水牛繁殖的影响。

地中海水牛人工授精效果研究

[目的]为了解意大利地中海水牛冻精的授精效果及其在我国生长适应情况。[方法]利用国内首次引进意大利地中海水牛冻精与我国现有的摩拉、尼里——拉菲和本地水牛进行人工授精,试验选取自然发情的摩拉水牛20头,尼里水牛16头,本地水牛32头,年龄在2.5~9岁之间,采用直肠把握子宫角深部输精法,配种后40 d应用B超进行早期妊娠诊断怀孕情况。[结果]：摩拉、尼里——拉菲和本地水牛受胎率分别为50.00%、75.00%、56.25%,平均人工授精配种受胎率为58.82%,品种间人工授精受胎率差异不显著（P〉0.1）。[结论]表明引进地中海水牛冻精开展杂交组合,改良我国现有的水牛品种,提高其生产性能是切实可行的。

B超在水牛繁殖中的应用

在畜牧生产上,国外起步较早,B超已广泛应用到早期妊娠诊断、胎儿性别鉴定及对胎儿状况、产后子宫恢复状况、卵巢状况的监测,还用于MOET受体的黄体检查和持久黄体鉴定及AI合适时间的建立与活体采卵等方面[1~3]。在国内由于经济上和技术上的原因,兽用B超诊断仪并没有得到普遍应用,B超诊断仪只限于几所院校和某些公司拥有,

水牛同期发情技术的研究进展

水牛发情不明显和产犊间隔长阻碍了水牛的繁殖效率提高。水牛发情观察困难,所以受胎率也下降。为了提高水牛的繁殖效率,可通过同期发情技术来实现。主要是通过调控黄体(CL)的基础来实现,要么利用前列腺素(PG)诱导未成熟的黄体溶解,或者通过利用孕酮来延长黄体期。本文就应用GnRH、FSH、LH、eCG、hCG、孕酮、雌二醇等激素同期发情方法进行评价,综述了不同同期发情和排卵方法对水牛繁殖的影响。