DNA损伤修复因子WDR70的生物学功能及其在人卵巢癌中的突变研究

目的在细胞水平上分析新发现的DNA损伤修复因子WDR70的生物学功能,确定WDR70基因在人卵巢癌中的突变发生情况,以验证该基因的功能丢失是否与卵巢癌关联。方法在人细胞中用siRNA干扰WDR70基因表达,或用慢病毒和质粒过表达WDR70的野生型和突变体,通过免疫印迹和免疫荧光等方法研究该基因在DNA损伤后的亚细胞定位和DNA损伤信号通路中的作用;此外,抽提1例正常卵巢组织和16例卵巢癌标本的mRNA进行半定量RT-PCR扩增,对这些标本中的WDR70基因进行测序分析。结果 WDR70基因沉默和过表达其突变体导致同源重组功能蛋白——DNA复制蛋白A(RPA32)磷酸化修饰水平降低和重组酶——重组蛋白A(RAD51)向DNA损伤位点招募的能力减低;WDR70的功能障碍还导致染色体的断裂增多;同时,卵巢癌样本中发现多例WDR70突变型别。结论在体外系统中,WDR70参与DNA损伤修复过程,沉默或过表达其突变体将导致同源重组修复缺陷和染色体结构的不稳定;在卵巢癌基因组中,WDR70基因频繁出现突变,可能导致相应的DNA修复缺陷和基因组不稳定性的发生。因此,WDR70是一个潜在的卵巢癌抗癌基因。

新型降糖中空俄色总黄酮生物黏附缓释肛门栓的制备研究

目的探讨新型降糖中空俄色总黄酮(ESF)原位凝胶栓剂的制备工艺并建立其质量控制方法。方法采用单因素考察栓剂基质、注模温度以及ESF原位凝胶最佳注入量;对优选后制备工艺所制栓剂的pH、硬度、重量差异、融变时限及ESF的含量及体外释放度进行考察以建立其质量控制方法。结果所制栓剂的pH为6.95,粒度、重量差异、融变时限均符合药典规定;在建立了可行的质量评价方法后,测得ESF的平均含量为80.86 mg/ml,释药时间在12 h以上。结论优选出的制备工艺合理、可行,所制制剂符合栓剂的质量要求。