小干扰RNA靶向抑制DcR3基因对肝癌细胞凋亡和迁移的影响

目的:应用RNA干扰技术抑制人肝细胞癌细胞系HepG2细胞DcR3表达,并研究DcR3基因沉默后对HepG2细胞凋亡和迁移能力的影响.方法:设计并合成特异性DcR3-siRNA 4条和阴性对照siRNA 1条,转染HepG2细胞,通过半定量反转录-PCR(RT-PCR)及免疫细胞化学方法检测其对DcR3表达的抑制作用并筛选出干扰效果最强的siRNA,应用流式细胞仪、DNA ladder方法检测细胞的凋亡情况,应用划痕实验检测细胞体外迁移能力的变化.结果:各特异性DcR3-siRNA均能抑制DcR3mRNA表达(P<0.05),其中以DcR3-siRNA4的抑制作用最明显,抑制作用达62.9%;将DcR3-siRNA4转染HepG2细胞能明显抑制HepG2细胞DcR3蛋白的表达(P<0.01).流式细胞仪检测结果显示,特异性DcR3-siRNA转染组细胞的凋亡率(22.97%±2.10%)明显高于空白对照组(1.17%±0.32%)、脂质体转染组(1.44%±0.43%)和非特异性siRNA转染组(1.22%±0.40%)(均P<0.001);DNA ladder实验发现特异性DcR3-siRNA转染组出现DNAladder,而空白对照组、脂质体转染组和非特异性siRNA转染组均未出现DNA ladder.划痕实验结果显示,转染后24、48和72 h,特异性DcR3-siRNA转染组细胞的相对迁移率均低于空白对照组、脂质体转染组和非特异性siRNA转染组.结论:DcR3在肝癌细胞的凋亡及迁移中发挥重要作用,抑制DcR3的表达能诱导肝癌细胞凋亡并降低肝癌细胞的迁移能力.

进展期远端胃癌淋巴结转移特点与D2术式的应用

目的探讨进展期远端胃癌淋巴结转移特点,以指导进展期远端胃癌淋巴结的清扫范围。方法收集D2或D2以上、清扫淋巴结在15枚以上的根治性手术治疗的51例进展期远端胃癌临床病理资料,分析其淋巴结转移特点及其与根治性手术关系。结果51例进展期远端胃癌总的淋巴结转移率为72.6%(37/51),其中第Ⅰ站有转移而无第Ⅱ、Ⅲ站及远处淋巴结转移的淋巴结转移率为35.3%(18/51),第Ⅰ、第Ⅱ站有转移而无第Ⅲ站和远处淋巴结转移的淋巴结转移率为66.7%(34/51);第Ⅲ站淋巴结有转移的转移率为3.9%(2/51),远处淋巴结有转移的转移率为2.0%(1/51)。第Ⅰ站No.6淋巴结转移率最高为37.3%(19/51),第Ⅱ站No.8 a+No.12 a转移率明显高于No.1+No.14v、No.1+No.11p,No.7+No.14v、No.7+No.11p,No.9+No.14v、No.9+No.11p(P<0.01)。No.8 a+No.12 a转移率与No.8 a+No.14v、No.8 a+No.11p比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论大部分进展期远端胃癌外科治疗以D2术式淋巴结清扫范围较合理,部分进展期远端胃癌的术式选择与淋巴结清扫范围有待进一步研究。

医用生物蛋白胶对乳腺癌术后皮下积液的预防作用

目的探讨医用生物蛋白胶对乳腺癌改良根治术后皮下积液的预防效果。方法51例乳腺癌患者分为两组,采用医用生物蛋白胶组25例行乳腺癌改良根治术时在手术创面使用生物蛋白胶,未用医用生物蛋白胶组26例行乳腺癌改良根治术时不使用生物蛋白胶,观察术后第1天引流量、术后总引流量、皮下积液情况,以确定医用生物蛋白胶对乳腺癌改良根治术后皮下积液的预防效果。结果采用医用生物蛋白胶组的第1天引流量和总的引流量分别为(115.04±50.33)ml和(185.20±65.14)ml,与未采用医用生物蛋白胶组的(167.31±77.05)ml和(281.54±106.21)ml比较,差异有统计学意义(P<0.01)。采用医用生物蛋白胶组患者皮下积液发生率为8.00%(2/25)明显低于未采用医用生物蛋白胶组的34.62%(9/26)(P<0.05)。结论乳腺癌改良根治术中应用医用生物蛋白胶能有效减少创面引流量,降低皮下积液,起到预防术后皮下积液的作用,有利于切口愈合。

ARF-BP1基因对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及其机制探讨

目的观察ARF-BP1基因对肝癌HepG2细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期的HepG2细胞,随机分为4组。转染组采用脂质体LipofectamineTM2000包裹技术将100 nmol/L ARF-BP1 siRNA瞬时转染HepG2细胞;脂质体对照组只加脂质体,不加siRNA片段;阴性对照组转染阴性siRNA片段;空白对照组不加siRNA片段及脂质体,仅加等量培养基。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,RT-PCR法检测转染组和空白对照组p53、Mcl-1 mRNA相对表达。结果转染组、脂质体对照组、阴性对照组和空白对照组的细胞凋亡率分别为27.90%±1.40%、3.33%±0.66%、3.05%±0.73%和1.64%±0.12%;转染组与其他组比较,P均<0.01;阴性对照组、脂质体对照组与空白对照组比较,P均<0.05。转染72 h后,转染组p53、Mcl-1 mRNA相对表达分别为0.29±0.08和0.23±0.04,均低于空白对照组的0.63±0.07和0.34±0.02,P<0.01、0.05。结论降低肝癌HepG2细胞ARF-BP1基因表达会促进肿瘤细胞凋亡,可能与其抑制p53、Mcl-1基因表达有关。

超声刀在胃癌根治术中的应用

目的:探讨超声刀在胃癌根治术中的应用价值。方法:收集2009年3月至2011年3月于广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科由同一手术者进行开腹胃癌D_2根治术的106例患者,将其分为超声刀手术组50例和电刀手术组56例,分别进行超声刀开腹手术及电刀开腹手术,比较两手术组平均手术时间、术中出血量、清扫淋巴结枚数、术后3天引流量、术后住院天数、住院总费用。结果:超声刀手术组平均手术时间、术中出血量、术后住院天数均明显少于电刀手术组(P<0.05),淋巴结清扫枚数明显高于电刀手术组(P<0.05);术后3天引流量、住院总费用两组间比较无明显差异(P>0.05);在并发粥样硬化的患者中,超声刀手术组平均手术时间、术中出血量均明显少于电刀手术组(P<0.05)。结论:将超声刀应用于胃癌根治术可获得较好的效果,更加符合精准外科发展的要求。

p14^(ARF)、ARF-BP1及c-myc mRNA在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨肝细胞癌组织中p14ARF、ARF-BP1及c-myc的mRNA表达及其与临床参数关系.方法:采用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,对52例HCC组织及其中45例相应癌旁组织p14ARF、ARF-BP1及c-myc的mRNA表达丰度进行检测并分析他们之间的关系及其与临床参数的关系.结果:在52例HCC组织中p14ARF、ARF-BP1及c-myc的mRNA各表达77.0%、77.0%和75.0%,与45例相应癌旁组织(11.1%、20.0%、53.3%)比较,呈高表达.p14ARF、ARF-BP1mRNA的表达与肿瘤大小有关(t=2.169,2.087,均P<0.05);而c-mycmRNA表达与肿瘤大小无关.p14ARF、ARF-BP1及c-myc的mRNA表达在性别、年龄、AFP、临床病理分级、浸润转移、HBV、包膜等无统计学差异.p14ARF与ARF-BP1、p14ARF与c-myc及ARF-BP1与c-myc的mRNA表达两两成正相关(r=0.565,0.436,0.584,均P<0.01).结论:p14ARF、ARF-BP1、c-myc过度表达可能是HCC发生的早期指标;ARF-BP1过度表达可能是影响HCC发生、发展的关键,干预ARF-BP1可能是治疗HCC的新途径.

RCAS1基因与乳腺癌相关性分析

目的分析RCAS1基因表达与乳腺癌的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测105例乳腺浸润性导管癌组织及相应癌旁组织的RCAS1基因表达,结合临床病理资料分析RCAS1基因表达与乳腺癌相关性。结果 RCAS1基因在乳腺癌组织表达率为84%(88/105)、癌旁组织表达率为17%(18/105),两者差异有统计学意义(P<0.05)。RCAS1蛋白表达以病人的年龄、肿瘤大小、病理组织学分级、淋巴结转移等方面比较,差异无统计学意义。结论 RCAS1基因表达可能与乳腺癌发生密切相关,可能有潜在的应用价值,值得进一步研究。

机器人与腹腔镜下远端T1期胃癌根治术的临床疗效对比

目的:探讨机器人远端T1期胃癌根治术的可行性。方法:回顾性分析2016年1月~2020年1月广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科收治的行远端T1期胃癌根治术的63例患者的临床资料,其中机器人组37例,腹腔镜组26例。对比两组患者临床病理资料、术中指标及术后恢复指标。结果:两组患者资料有可比性。与腹腔镜组相比,机器人组手术时间更长([324.41±56.27)min Vs(284.19±47.56)min,P=0.004];而术中失血量(P=0.742)、淋巴结清扫数(P=0.696)、引流管拔除时间(P=0.851)、经口进食时间(P=0.483)、首次下床活动时间(P=0.335)、首次肛门排气时间(P=0.872),以及术后6h、24h、48h、72h、96h数字疼痛评分(P=0.175、P=0.753、P=0.503、P=0.632、P=0.406)、术后住院天数(P=0.108)和术后2周内并发症(P=1.000)等未见明显差异。结论:机器人应用于远端T1期胃癌根治术是安全、可行的。

p14^(ARF)、ARF-BP1、c-myc在肝细胞癌中的表达及意义

目的:探讨肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)组织及其癌旁肝组织中p14ARF、ARF-BP1、c-myc的表达及意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、免疫组化技术对45例HCC组织及其癌旁肝组织中p14ARF、ARF-BP1、c-myc的mRNA表达和p14ARF、c-myc蛋白表达情况进行检测。结果:p14ARF、ARF-BP1、c-myc的mRNA在HCC组织中阳性表达分别为80.00%、86.67%、84.44%,在癌旁肝组织中分别为11.11%、20.00%、53.33%,三者的mRNA在癌组织中呈过表达,明显高于癌旁肝组织(P<0.01)。p14ARF、c-myc蛋白在HCC组织中表达分别为78.38%、75.68%,明显高于癌旁肝组织的13.51%(P<0.01)和51.35%(P<0.05)。结论:p14ARF、ARF-BP1、c-myc在HCC组织中高表达,这种高表达可能与HCC的发生有相关性。

肿瘤坏死因子基因转导的肿瘤疫苗对小鼠机体免疫的影响

目的 :用肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞作为肿瘤疫苗 ,研究其对小鼠机体免疫活性的影响。方法 :小鼠分 5组 ,采用经 6 0 Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癌细胞 (BEL- 74 0 4 - TNF- 6 0 Co)、未经 6 0 Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癌细胞 (BEL- 74 0 4 - TNF)、经 6 0 Co照射的人肝癌细胞 (BEL- 74 0 4 - 6 0 Co)、未经 6 0 Co照射的人肝癌细胞 (BEL- 74 0 4 )和生理盐水分别接种小鼠 ,用 MTT法检测各组小鼠脾脏 NK细胞活性 ,用 SABC免疫组化法检测 T淋巴细胞亚群。结果 :肿瘤疫苗接种小鼠后 ,BEL- 74 0 4 - TNF- 6 0 Co组小鼠脾脏 NK细胞活性及 T淋巴细胞亚群 CD+ 4、CD+ 8增高 ,与 BEL- 74 0 4组、BEL- 74 0 4 - 6 0 Co组、生理盐水组相比差异有显著意义 (P <0 .0 5、P<0 .0 1)。BEL- 74 0 4 - TNF- 6 0 Co组和 BEL- 74 0 4 - TNF组相比 ,NK细胞活性、T淋巴细胞亚群 CD+ 4、CD+ 8均无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论

进展期胃癌淋巴结转移影响因素的分析

目的探讨影响进展期胃癌淋巴结转移的因素,指导选择合适的治疗方案。方法回顾性分析96例进展期胃癌患者临床病理资料与淋巴结转移的关系。结果肿瘤直径>5cm、3cm<肿瘤直径≤5cm的淋巴结转移率分别为90.5%(38/42)、78.4%(29/37)明显高于肿瘤直径≤3cm的29.4%(5/17)(P<0.01);侵及邻近组织和器官、穿透浆膜层而未侵及邻近组织及器官、侵及浆膜层的淋巴结转移率分别为91.7%(11/12)、77.8%(21/27)、89.7%(26/29),高于侵及肌层的50.0%(14/28)(P<0.01或P<0.05)。性别、年龄、肿瘤部位以及组织学类型间的淋巴结转移率没有显著差异。结论肿瘤大小、浸润深度是影响进展期胃癌淋巴结转移的因素,应根据肿瘤大小和浸润深度选择合适的治疗方案。

减肥手术治疗2型糖尿病的进展

全球糖尿病发病率逐年增高,但其治疗效果并不理想,近年来的研究表明,减肥手术可以缓解或改善糖尿病,给糖尿病患者带来希望。本文拟对减肥手术治疗2型糖尿病的进展作一综述。

超声内镜引导下无水乙醇注射法与外科手术法治疗良性胰岛素瘤的对比研究

目的评估超声内镜(EUS)引导下无水乙醇注射法治疗良性胰岛素瘤的疗效与安全性,并与外科手术治疗法相比较。方法回顾性分析2011年4月-2016年2月在广西医科大学第一附属医院经EUS引导下无水乙醇注射法治疗或外科手术法治疗的38例良性胰岛素瘤临床资料。结果 97.4%(37/38)的患者有典型的Whipple三联征,82.9%(29/35)患者低血糖发作时胰岛素释放指数(I/G)>0.3。术前B超、CT、磁共振成像(MRI)、正电子发射计算机断层显像(PET/CT)和EUS定位诊断胰岛素瘤阳性率分别为50.0%、67.6%、66.7%、75.0%和89.7%。18例行EUS引导下无水乙醇注射治疗(EUS-FNI组),20例行外科手术治疗(外科手术组),EUS-FNI组术后均无并发症发生,外科手术组中40.0%(8/20)患者出现并发症。与外科手术组相比,EUS-FNI组在手术时间、术中出血、术后并发症、术后住院时间和住院总费用上均明显降低(P<0.05)。所有患者均得到随访,EUS-FNI组最后一次无水乙醇注射治疗后所有患者血糖平稳在正常范围;外科手术组20例患者中,90.0%(18/20)患者术后无低血糖症状再发作,监测血糖在正常范围,10.0%(2/20)患者术后低血糖症状发作较术前减少。结论 EUS引导下无水乙醇注射法治疗良性胰岛素瘤安全、有效。与外科手术法相比,具有微创、经济、并发症少和术后恢复快等优势。

培养细胞的石蜡切片用于DcR3免疫化学染色的探讨

[目的]建立一种培养细胞进行石蜡切片用于免疫细胞化学染色的方法。[方法]分别采用细胞爬片和石蜡切片方法处理细胞,比较HE及免疫化学染色效果。[结果]石蜡切片细胞分布均匀,阳性反应明显,定位明确,背景清晰。[结论]细胞石蜡切片的染色效果明显优于细胞爬片,值得推广。

肿瘤坏死因子α基因转导的人肝癌细胞疫苗对小鼠肝癌移植瘤的影响

目的 用肿瘤坏死因子α (TNF α)基因转导的人肝癌细胞作为疫苗接种小鼠 ,研究其对小鼠肝癌移植瘤的免疫排斥作用。方法 取昆明种小鼠 40只 ,分为 5组 ,每组 8只。分别采用经60 Co照射的TNF α基因转导的人肝癌细胞 (BEL 740 4 TNF Co组 )、未经60 Co照射的TNF α基因转导的人肝癌细胞 (BEL 740 4 TNF组 )、经60 Co照射的人肝癌细胞 (BEL 740 4 Co组 )以及未经60 Co照射的人肝癌细胞 (BEL 740 4组 )接种小鼠 ,生理盐水对照组仅注射生理盐水。然后将小鼠肝癌细胞株H2 2移植于上述 5组小鼠 ,观察肝癌移植瘤生长情况 ,并应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)法观察肿瘤细胞凋亡指数。结果 BEL 740 4 TNF Co组小鼠接种经60 Co照射的TNF α基因转导的人肝癌细胞疫苗后 ,肝癌移植瘤成瘤率下降 ,瘤体生长受抑制 ,细胞凋亡指数增高 ,与BEL 740 4 Co组、BEL 740 4组及生理盐水对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,但与BEL 740 4 TNF组相比 ,差异则无统计学意义 (P>0 .0 5 )。结论 TNF α基因转导的人肝癌细胞疫苗对小鼠肝癌移植瘤有较强的免疫排斥作用。

胃癌根治术中采用腹腔化疗对加速康复影响的临床研究

目的研究胃癌术中进行腹腔化疗是否影响术后加速康复效果。方法选择远端胃癌患者120例,行规范D2胃癌根治术。开放手术+氟尿嘧啶缓释植入剂进行腹腔化疗30例为A组,单纯行开放手术30例为B组,腹腔镜下手术+氟尿嘧啶缓释植入剂进行腹腔化疗30例为C组,单纯行腹腔镜下手术30例为D组。比较开放手术两组(A组和B组)、腹腔镜手术两组(C组和D组)术后肛门排气时间、术后下床时间、术后进食时间、留置腹腔引流管时间、术后出院时间。结果开放手术两组(A组和B组)、腹腔镜手术两组(C组和D组)在肛门排气时间、术后下床时间、术后进食时间、留置腹腔引流管时间和术后出院时间方面比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论无论采用开放手术或腹腔镜手术腹腔放置氟尿嘧啶缓释植入剂,均不影响加速康复效果。

不同手术方法对甲状腺良性肿瘤患者治疗效果的比较

目的比较不同手术方法对甲状腺良性肿瘤患者治疗效果的差异。方法选取2015年1月至2017年12月于广西医科大学第一附属医院就诊且需手术治疗的120例甲状腺良性肿瘤患者为研究对象,将采用腋窝入路常规腔镜甲状腺切除术的40例患者纳入A组,将采用无充气腋窝入路单孔腔镜甲状腺切除术的40例患者纳入B组,将采用常规甲状腺切除术的40例患者纳入C组。观察并比较三组患者的手术相关指标(术中出血量、手术时间、切口引流量)、术后相关指标[视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评分、患者满意度评分、住院费用、术后住院天数]和术后并发症发生情况。结果A组和B组患者术中出血量均显著少于C组(均P<0.05),VAS评分均显著低于C组(均P<0.05),患者满意度评分均显著高于C组(均P<0.05),术后住院天数均显著短于C组(均P<0.05),但A组和B组患者术中出血量、VAS评分、患者满意度评分和术后住院天数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。三组患者手术时间、切口引流量、住院费用和术后并发症发生率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论对于甲状腺良性肿瘤患者,无充气腋窝入路单孔腔镜甲状腺切除术和腋窝入路常规腔镜甲状腺切除术的治疗效果均优于常规甲状腺切除术,患者术后康复快,满意度高,亦可根据患者具体情况选择最佳术式。