尼古丁诱导人脐带间充质干细胞凋亡的机制

目的:探讨尼古丁作用人脐带间充质干细胞(MSCs)前后,一氧化氮(NO)、细胞内钙离子(Ca2+)的变化及α7nAchR的表达情况。方法:采用硝酸还原酶法检测不同质量浓度尼古丁作用于MSCs后24、36、48 h,MSCs内NO的释放情况;尼古丁作用MSCs 24 hf,luo-3/AM染色,流式细胞仪检测MSCs内Ca2+变化;用RT-qPCR检测尼古丁作用后α7nAchR的表达情况。结果:尼古丁作用MSCs 24、36 h后,各实验组NO水平显著高于对照组(P<0.05),呈时间、质量浓度依赖性,但在48 h,质量浓度0.8与1.0 mg/mL组,NO水平低于对照组。尼古丁作用后,各实验组质量浓度(0.6、0.8、1.0 mg/mL)的Ca2+荧光强度分别为(141.26±16.01)(、164.90±18.39)、(198.76±17.63),均高于对照组(119.30±14.14),其中质量浓度0.8、1.0 mg/mL组与对照组相比有显著差异(P<0.05)。MSCs可表达α7nAchR,且尼古丁作用后表达水平增高,呈时间浓度依赖性。结论:尼古丁可上调人脐带MSCs的α7nAchR表达,并通过刺激MSCs释放NO、升高细胞内Ca2+从而致MSCs凋亡。

端粒、端粒酶与间充质干细胞衰老的研究进展

间充质干细胞（MSCs）是来源于发育早期中、外胚层的多能干细胞,存在于骨髓、胎盘、脐带血、外周血等组织中,出生后在所有组织中定居[1-2],具有向成骨细胞、成脂细胞、肝脏细胞、心肌细胞和神经细胞等多系列细胞分化潜能,且支持造血、调节免疫、对损伤的组织和器官具有良好的修复效果。

尼古丁对人脐带间充质干细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨尼古丁对人脐带间充质干细胞(MSCs)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、活性氧(ROS)、线粒体膜电位及细胞因子生成的影响。方法:尼古丁作用MSCs后,硝酸还原酶法测NO的释放情况;分光光度计法测NOS和iNOS活性;流式细胞技术测ROS及线粒体膜电位的变化;ELISA法测培养上清液中细胞间黏附分子1(ICAM-1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子I(IGF-I)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平的变化。结果:在24 h和36 h,NO水平随尼古丁浓度上升而增加(P<0.05),但在48 h,0.8 g/L与1.0 g/L组,NO水平低于对照组;NOS和iNOS活性随尼古丁浓度上升而逐渐增加;尼古丁可增加MSCs的ROS水平,并降低线粒体膜电位;在尼古丁作用下,MSCs分泌SDF-1、TGF-β1、IGF-I及bFGF水平下降,ICAM-1、MMP-9及TIMP-1表达均上升。结论:尼古丁通过增加NO、NOS、iNOS和ROS水平,降低线粒体膜电位,使SDF-1、TGF-β1、IGF-I及bFGF分泌下降,ICAM-1、MMP-9及TIMP-1表达上升,可能影响MSCs的增殖、黏附、迁移等特性。

特发性血小板减少性紫癜与抗核抗体和抗心磷脂抗体的关系探讨

目的探讨抗核抗体(ANA)、抗心磷脂抗体(ACA)与特发性血小板减少性紫癜(ITP)及系统性红斑狼疮(SLE)的关系。方法采用ELISA法对58例ITP患者,50例SLE患者及50例健康体检者的血清进行ANA、ACA检测,用全自动血细胞分析仪对ANA、ACA阳性和阴性患者治疗前后的血小板计数进行对比分析。结果 ITP及SLE患者ANA和ACA阳性率均明显高于健康对照组,2组比较均有显著差异(P<0.01)。ANA阳性和阴性的ITP患者治疗前后血小板计数无显著差异(P>0.05)。ACA阳性和阴性的ITP患者治疗前后血小板计数无显著差异(P>0.05)。ANA阳性和阴性的SLE伴血小板减少患者治疗前后血小板计数无显著差异(P>0.05),ACA阳性和阴性的SLE伴血小板减少患者治疗前后血小板计数无显著差异(P>0.05)。结论 ITP疾患中,ANA阳性可能是自身免疫反应的一种标志,或者可能是ITP的自身抗体,但不能作为辅助诊断标准;ACA阳性可能是引起血小板减少的一个重要因素,可间接反映ITP患者血小板的受损情况。ANA、ACA阳性与ITP的治疗效果及预后无明显关系。对ANA、ACA阳性的ITP患者应进行随诊,警惕是否会发展成为SLE或其他自身免疫性疾病。

环孢素A联合十一酸睾丸酮治疗慢性再生障碍性贫血的效果及不良反应探讨

目的探讨环孢素A联合十一酸睾丸酮治疗慢性再生障碍性贫血的效果及不良反应。方法选择2010年5月至2015年5月接受治疗疗的120例慢性再生障碍性贫血患者为研究对象,按照数字表法随机分为观察组和对照组。对照组采用十一酸睾丸酮治疗,观察组采用环孢素A联合十一酸睾丸酮治疗。治疗6个月后,观察临床治疗效果,外周血白细胞、血红蛋白、血小板以及血清内皮生长因子(VEGF)的水平和不良反应。结果治疗6个月后,观察组的总有效率81.67%明显高于对照组的总有效率58.33%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。治疗前两组患者的外周血白细胞、血红蛋白、血小板以及血清VEGF的水平无显著差异,治疗后两组患者的外周血白细胞、血红蛋白、血小板以及血清VEGF的水平上升,且观察组以上指标明显高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05);两组患者均无严重不良反应发生。结论环孢素A联合十一酸睾丸酮治疗慢性再生障碍性贫血临床疗效确切,安全性高,可升高外周血白细胞、血红蛋白、血小板以及血清VEGF的水平,值得临床推广应用。

尼古丁对人脐带间充质干细胞氧化应激的影响

目的:研究尼古丁对人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)超微结构及氧化应激的影响,探讨尼古丁诱导HUCMSCs凋亡的作用机制。方法:不同浓度尼古丁作用HUCMSCs后,透射电镜(TEM)观察HUCMSCs超微结构变化。分光光度计法检测HUCMSCs胞内过氧化氢酶(CAT)活性,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,化学比色法检测还原型谷胱甘肽(GSH)活性,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量。分光光度计法检测一氧化氮合酶(NOS)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)活性。结果:尼古丁作用HUCMSCs后,细胞内出现大量空泡状结构,粗面内质网扩张成池,线粒体嵴扩张。细胞内CAT、SOD、GSH活性均显著降低,脂质过氧化产物MDA含量显著增加,呈浓度依赖性。NOS、iNOS活性随尼古丁浓度上升而逐渐增加。结论:尼古丁可增加HUCMSCs的NOS、iNOS活性,使细胞发生凋亡结构改变,呈氧化应激状态,发生氧化-抗氧化系统失衡。

异基因外周血干细胞移植后影响生存的危险因素65例分析

目的探讨异基因外周血干细胞移植（allo-PBSCT）后与长期生存相关的危险因素。方法对2000年6月至2008年12月65例行allo-PBSCT患者进行回顾性分析,选择年龄、性别、移植时疾病状态、供者类型、HLA相合情况、供受者血型、急性移植物抗宿主病（aGVHD）、慢性移植物抗宿主病（cGVHD）、出血性膀胱炎（HC）、巨细胞病毒（CMV）感染10个临床参数进行Cox单因素分析。将在单因素分析中P〈0.05作为有统计学意义的因素进行Cox多因素回归分析。生存率采用Kaplan-Meier曲线。结果除1例患者外,余64例均达稳定植活,0~Ⅰ度aGVHD为29例（45.3%）,Ⅱ~Ⅳ度aGVHD 35例（54.7%）。发生cGVHD共29例（45.3%）,其中局限型cGVHD 9例（31.0%）,广泛型cGVHD 20例（69.0%）。1年总生存率（OS）为64.6%,5年OS为20.5%。随访至2009年12月,33例（50.8%）存活,生存期12~104个月,中位生存期51个月,死亡32例（49.2%）,生存期1~96个月,中位生存期9个月。Cox回归分析移植时疾病状态和重度aGVHD的相对危险度分别是3.440和2.213。结论移植时疾病状态和重度aGVHD是影响造血干细胞移植长期生存的主要危险因素;在合适的疾病状态进行移植、积极防治aGVHD对移植成功非常重要。

骨髓涂片联合骨髓活检在骨髓增生异常综合征诊断中的临床意义

目的探讨骨髓涂片联合骨髓活检在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中的临床意义。方法采用骨髓抽吸、染色对58例MDS进行骨髓穿刺涂片及骨髓活检切片检查。结果骨髓活检中的细胞增生程度显著高于骨髓涂片的核细胞增生程度,骨髓涂片中原始细胞的发现比例显著优于骨髓活检,P<0.05;粒系病态造血骨髓涂片与骨髓活检切片的发现比例分别为(46.6%与67.2%),红系病态造血发现比例分别为(79.3%与53.4%),巨核系病态造血发现比例分别为(39.7%与69.0%),两两比较,均P<0.05;58例MDS患者骨髓活检的结果幼稚前体细胞异常定位(ALIP)39例,占比67.2%,单圆核病态造血28例,占比48.3%,多圆核病态造血32例,占比55.2%,网状纤维染色阳性患者26例,占比44.8%,骨髓呈现纤维化15例,占比25.9%,铁染色呈现阳性患者34例,占比58.6%。结论骨髓涂片与骨髓活检在诊断MDS中各有优缺点,通过两者的联合诊断可有效发现巨核系列的病态造血,对于提升诊断的准确性有重要的作用。

亚砷酸联合沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征疗效分析

目的探讨分析亚砷酸联合沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征的临床疗效;方法选取56例初诊骨髓增生异常综合征(MDS)住院患者,随机分为实验组和对照组,给予不同的治疗方式,比较两组患者临床疗效和不良反应发生率。结果实验组患者临床疗效有效率为69.21%显著高于对照组患者42.31%,但不良反应发生率(30.77%)较对照组(65.38%)显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论亚砷酸联合沙利度胺较单一治疗沙利度胺骨髓增生异常综合征具有临床疗效高,不良反应发生率低的特点,是理想的治疗方法。

幽门螺旋杆菌与缺铁性贫血的相关性研究及治疗

目的分析幽门螺旋杆菌与缺铁性贫血的相关性,并探讨抗Hp对治疗缺铁性贫血的影响。方法 (1)随机选取2016年4月至2017年5月在我院体检中心进行健康体检人群90例,并选取同一时间段在我院血液科住院及门诊确诊的缺铁性贫血病人90例,分别统计、对比其Hp感染率;(2)从上述选取的缺铁性贫血病人90例中选取缺铁性贫血合并Hp感染患者34例作为研究对象,随机分为观察组和对照组,观察组患者给予铁剂+维生素C+三联疗法抗Hp治疗,对照组患者给予铁剂+维生素C治疗,另选取无合并Hp感染的缺铁性贫血17例作为阴性对照组,予铁剂+维生素C治疗。分析幽门螺旋杆菌与缺铁性贫血的相关性,比较不同方法治疗前后的血液学指标变化。结果 (1)健康体检人群90例,Hp感染率为16.67%;缺铁性贫血患者90例,Hp感染率为37.78%,提示缺铁性贫血患者的Hp感染率较高;(2)3组治疗前血液学指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗12 w后两组患者血流学指标均显著改善,治疗后观察组患者Hb、MCV、Ret、SF提高程度均显著高于对照组患者,差异均具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者幽门螺旋杆菌合并缺铁性贫血患者Hp根治成功率位88.24%较对照组患者显著提高,差异均具有统计学意义(P<0.05);阴性对照组治疗效果与观察组相当。结论Hp感染与缺铁性贫血密切相关,缺铁性贫血在进行铁剂和维生素C治疗的基础上给予抗Hp治疗,以利于提高治疗效果,值得在临床上推广。

难治性免疫性血小板减少性紫癜患者应用小剂量利妥昔单抗联合IL-11治疗的临床效果探讨

目的探讨应用小剂量利妥昔单抗联合IL-11治疗难治性免疫性血小板减少性紫癜患者的临床效果。方法将2013年1月～2018年1月我院36例难治性免疫性血小板减少性紫癜患者,采用随机数字表法将其分为两组,其中对照组患者应用常规方法进行治疗,实验组在常规用药基础上,应用小剂量利妥昔单抗联合IL-11治疗,观察并比较两组患者术后临床疗效。结果经过不同药物治疗后,实验组难治性免疫性血小板减少性紫癜患者治疗总有效率(94.44%)明显高于对照组总有效率(61.11%),差异有统计学意义(P <0.05);实验组患者乏力、心房颤动、皮疹、感染不良反应发生率(11.11%)明显低于对照组不良反应发生率(50.00%),差异有统计学意义(P <0.05);随访一年,实验组患者该疾病复发率(5.56%)明显低于对照组该疾病复发率(38.89%),差异有统计学意义(P <0.05)。结论对难治性免疫性血小板减少性紫癜患者,应用小剂量利妥昔单抗,联合IL-11治疗,可有效提升血小板计数,缓解患者出现倾向,避免耐药性的产生,有助于患者疾病的恢复,提高患者生活质量。

血液透析患者急性左心衰与脂代谢水平的临床研究

目的:研究血液透析患者急性左心衰与脂质代谢水平。方法:选取2017年4月到2018年2月我院收治的血液透析患者为研究组(n=90例),根据是否发生急性左心衰将患者分为阳性组和阴性组,另外选取我院健康体检者为对照组(n=90例),观察研究组发生急性左心衰和救治情况,并比较研究组与对照组和阳性组和阴性组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(Apo B)的水平。结果:研究组发生急性左心衰者24例,发生率为26.67%,经过紧急血液透析、超滤脱水以及综合防治抢救成功23例,死亡1例。研究组TC、TG、LDLC和Apo B显著高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P=0.034,0.019,0.029,0.035),研究组HDL显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P=0.027);阴性组TC、TG、LDL-C和Apo B与阳性组比较差异具有统计学意义(P=0.035,0.021,0.031,0.038),阴性组HDL显著高于阳性组,两组比较差异具有统计学意义(P=0.031)。结论:血液透析患者会出现急性左心衰和脂质代谢紊乱,脂质代谢紊乱和急性左心衰有一定关系,紧急血液透析、超滤脱水以及综合防治是重要的抢救手段。

美洛昔康片联合甲氨蝶呤片治疗类风湿关节炎的效果

目的:探讨美洛昔康片联合甲氨蝶呤片治疗类风湿关节炎的效果。方法:根据随机数表法将2016年1月～2018年2月60例类风湿关节炎患者分成两组。对照组给予甲氨蝶呤片联合来氟米特治疗,观察组给予甲氨蝶呤片联合美洛昔康片治疗。比较两组治疗总有效率;类风湿关节炎控制的时间;治疗前后晨僵持续时间、关节疼痛指数、抗环瓜氨酸肽抗体水平;用药安全性。结果:观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);观察组类风湿关节炎控制的时间优于对照组(P<0.05);治疗前两组晨僵持续时间、关节疼痛指数、抗环瓜氨酸肽抗体水平并无明显差异(P>0.05);治疗后观察组晨僵持续时间、关节疼痛指数、抗环瓜氨酸肽抗体水平优于对照组(P<0.05)。观察组用药安全性和对照组无明显差异(P>0.05)。结论:甲氨蝶呤片联合美洛昔康片治疗类风湿关节炎的疗效确切,可缩短晨僵持续时间、改善关节疼痛指数、降低抗环瓜氨酸肽抗体水平,用药安全,值得推广。

“三农”气象服务助力乡村振兴发展对策

气象工作是为农服务重要组成部分,如何在乡村振兴战略中形成本地特色服务品牌,切实履职发挥建设性作用值得分析。本文以河池市宜州区气象为“三农”服务实践为例,研究气象服务助力乡村振兴工作现状和特点,把握“三农”生产需求,完善气象服务内容及方式,为助力乡村振兴提供可靠技术保障。

氯化钴作用人脐带间充质干细胞的差异蛋白质组学分析

目的用蛋白质二维凝胶电泳图谱，结合质谱技术鉴定、分析化学低氧模拟剂氯化钴（CoCl2）作用人脐带间充质干细胞（MSC）前后蛋白质组的差异表达。方法CoCl2作用人脐带MSC，应用双向凝胶电泳技术（2-DE）分离细胞总蛋白。ImageMaster 2D Platinum软件分析差异蛋白质点，用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱对差异表达蛋白做质谱鉴定，对差异蛋白进行功能分类。结果建立了CoCl2作用人脐带MSC的蛋白质组图谱，鉴定出26个差异表达蛋白，其中11个表达上调，15个表达下调。其生物学功能涉及糖代谢、蛋白质代谢和修饰、脂类代谢、辅酶与辅基、细胞周期、免疫和防御、细胞结构和运动、信号转导、蛋白靶向和定位、神经细胞的活动、肌肉收缩等。其中过氧化物还原酶-1（Prdx1）表达下调，α-烯醇化酶（ENO1）、单胺囊泡转运蛋白1（VAT1）表达上调。结论低氧对人脐带MSC的影响涉及多蛋白及多个功能通路。

尼古丁对脐带间充质干细胞微观形貌及增殖活性的影响

目的探讨尼古丁对脐带间充质干细胞(MSCs)形态学、细胞周期、细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度尼古丁作用于MSCs,以相差显微镜及原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)观察形态学变化;MTT法分别于24h、48h、72h检测细胞增殖;流式细胞仪法于24 h检测细胞周期与细胞凋亡。结果尼古丁作用于MSCs后,细胞固缩,细胞膜表面形成空洞及凹陷,微绒毛样突起多见;细胞周期改变,G0/G1期的细胞比例明显增加(P<0.05),G2期及S期细胞比例则逐渐减少(P<0.01),周期阻滞随着尼古丁浓度递增而增加;细胞增殖受抑,呈时间剂量依赖性,凋亡率增高,0.5、1、1.5mg/m L的尼古丁作用MSCs 24h后,细胞凋亡率均高于对照组。0.5mg/m L组凋亡率(4.867±0.404)%与对照组(3.300±0.400)%比较,差异无统计学意义(P>0.05);1mg/m L组凋亡率(10.333±0.961)%、1.5mg/m L组凋亡率(44.367±3.612)%与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论尼古丁使MSCs形态及超微结构发生早期凋亡改变,阻滞细胞周期,抑制细胞增殖且促进其凋亡。