土壤磷酸酯酶基因的筛选、克隆及酶学性质分析

利用宏基因组学的方法构建红树林土壤宏基因组文库,然后采用以三丁酸甘油酯为底物的功能筛选法对文库进行磷酸酯酶基因的筛选,并对磷酸酯酶基因进行克隆及酶学性质分析。经筛选获得1个具有酯水解活性的阳性克隆子,该克隆子含有1个1 545bp的ORF,可编码514个氨基酸,命名为phop1545。该基因表达的蛋白属于新的酯水解酶类亚家族,其分子质量约为57kD。该磷酸酯酶的最适pH值为5.5,温度为56℃,表明该酶为酸性磷酸酯酶且耐高温。