热休克蛋白70结合蛋白1诱导星形胶质细胞内源性突变亨廷顿蛋白积聚引起神经元死亡

目的 探讨热休克蛋白70结合蛋白1(HspBP1)在亨廷顿病(HD)发病机制中的作用。方法 构建星形胶质细胞特异性表达的GFAP-HspBP1质粒,分别转染C6、GFAP-HD星形胶质细胞和HD140Q基因敲入(HDKI)小鼠的星形胶质细胞中过表达HspBP1,通过免疫染色法检测亨廷顿蛋白(HTT)和神经元相关蛋白。采用CRISPR/Cas9技术敲除HDKI小鼠纹状体神经元内源性HspBp1基因,采用免疫荧光和Western Blotting法检测HTT表达水平。结果 星形胶质细胞中HspBP1过表达不影响星形胶质细胞的活性,但是却显著增加了突变型HTT(mHTT)在星形胶质细胞中的积聚。HDKI小鼠星形胶质细胞中过表达HspBP1还能够诱导纹状体中神经元广泛死亡。与之相对的,基因敲除HspBp1表达可显著减少神经元内mHTT积聚。结论 HspBP1可诱导星形胶质细胞中mHTT的积聚从而引起神经元死亡。

热休克蛋白70结合蛋白1诱导星形胶质细胞内源性突变亨廷顿蛋白积聚

目的:探讨热休克蛋白70结合蛋白1(heat shock protein 70 binding protein 1,HspBP1)能否促进内源性突变亨廷顿蛋白(mutant Huntingtin,mHTT)在星形胶质细胞中积聚,并确定其是否能够介导病理性损伤。方法:在GFAP-HD转基因小鼠的星形胶质细胞中过表达HspBP1,通过免疫染色和蛋白印迹法检测mHTT和神经病理相关蛋白表达水平,并通过行为学实验观察小鼠的运动功能水平。结果:GFAP-HD转基因小鼠短期内即出现星形胶质细胞中的mHTT积聚以及运动功能障碍,但并未出现星形胶质细胞活化和神经元损伤。结论:HspBP1能够通过促进星形胶质细胞内源性mHTT积聚介导病理性损伤,但mHTT在神经元和星形胶质细胞中共同表达可能是神经元显著变性的必需条件。