姜黄素诱导胃癌BGC细胞凋亡的作用及机制研究

目的:探讨姜黄素促人胃癌BGC-823细胞凋亡的生物学作用及其调控机制。方法:常规体外培养对数生长期胃癌BGC-823细胞,细胞分为对照组,低、中、高姜黄素处理组四组,姜黄素浓度分别为0 mg/L,5 mg/L,10 mg/L,20mg/L。姜黄素处理24 h后,采用甲基噻唑(MTT)比色法及流式细胞仪测定细胞增殖水平及细胞凋亡率;采用免疫组化法测定细胞内Bax、Bcl-2蛋白表达;采用PCR检测Caspase-3的mRNA表达水平。结果:MTT检测显示姜黄素能抑制人胃癌BGC-823细胞増殖,呈现浓度依赖性;流式细胞仪显示姜黄素能有效诱导细胞的凋亡,呈现浓度依赖性,其中20 mg/L姜黄素处理24 h后细胞凋亡率为48.3%;免疫组化试验表明姜黄素处理使人胃癌BGC-823细胞中Bax表达水平上调,同时Bcl-2蛋白表达水平下调;且细胞中Caspase-3的mRNA表达水平受姜黄素诱导而增高。结论:姜黄素对人胃癌BGC-823细胞的增殖具有明显抑制作用,呈浓度依赖性促进细胞凋亡,这种生物学效应可能与激活Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达而活化Caspase-3的信号通路有关。该研究为深入探讨姜黄素诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的机制提供了重要依据。

阿尔茨海默病大鼠海马胆固醇水平升高对tau蛋白磷酸化程度增加的影响

目的观察海马胆固醇含量升高后tau蛋白磷酸化程度的变化,探讨其在阿尔茨海默病(AD)中可能的作用。方法水迷宫训练大鼠7 d筛选合格大鼠后,海马直接注射不同剂量胆固醇,72 h后水迷宫检测行为学变化,并以免疫印迹和免疫组织化学方法检测大鼠海马tau蛋白磷酸化水平。结果注射胆固醇后72 h,中高剂量组大鼠水迷宫潜伏期明显延长(P<0.01),tau蛋白PHF-1位点磷酸化水平明显增高(P<0.01),tau-1明显降低(P<0.01),总tau蛋白(R134d)无明显变化。结论海马胆固醇水平升高可导致tau蛋白磷酸化程度增加,可能参与AD的形成。

姜黄素抑制人胃癌BGC-823细胞生长并诱导其凋亡的机制研究

目的:探讨姜黄素抑制人胃癌BGC-823细胞生长并促人胃癌BGC-823细胞凋亡的生物学作用及其调控机制。方法:常规体外培养对数生长期胃癌BGC-823细胞,细胞分为对照组,低、中、高姜黄素处理组四组,姜黄素浓度分别为0mg/L5,mg/L1,0mg/L,20mg/L。姜黄素处理24h后,采用甲基噻唑(MTT)比色法及流式细胞仪测定细胞增殖水平及细胞凋亡率;采用免疫组化法测定细胞内Bax、Bcl-2蛋白表达;采用PCR检测Caspase-3的mRNA表达水平。结果:MTT检测显示姜黄素能抑制人胃癌BGC-823细胞増殖,呈现浓度依赖性;流式细胞仪显示姜黄素能有效诱导细胞的凋亡,呈现浓度依赖性,其中20mg/L姜黄素处理24h后细胞凋亡率为48.3%;免疫组化试验表明姜黄素处理使人胃癌BGC-823细胞中Bax表达水平上调,同时Bcl-2蛋白表达水平下调;且细胞中Caspase-3的mRNA表达水平受姜黄素诱导而增高。结论:姜黄素对人胃癌BGC-823细胞的增殖具有明显抑制作用,呈浓度依赖性促进细胞凋亡,这种生物学效应可能与激活Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达而活化Caspase-3的信号通路有关。该研究为深入探讨姜黄素诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的机制提供了重要依据。

大黄素对人胃癌BGC-823细胞体外增殖和迁移的影响

目的探讨大黄素对人胃癌BGC-823细胞增殖和迁移的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度大黄素对体外培养人胃癌BGC-823细胞增殖的影响;采用流式细胞术测定大黄素对人胃癌BGC-823细胞的细胞周期影响;采用划痕损伤实验测定大黄素对人胃癌BGC-823细胞迁移的影响。结果 MTT法显示,大黄素能抑制人胃癌BGC-823细胞増殖,呈现浓度依赖性;流式细胞术显示,人胃癌BGC-823细胞的细胞周期主要停滞在G0/G1期;划痕损伤实验表明,人胃癌BGC-823细胞迁移受到明显的抑制。结论大黄素对人胃癌BGC-823细胞的增殖和迁移具有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性,并可使人胃癌BGC-823细胞增殖周期停滞于G0/G1期。

shRNA抑制SGK1基因表达对人乳腺癌细胞系生物学特性的影响

目的建立稳定抑制血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)表达的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,观察SGK1基因沉默对人乳腺癌细胞生物学特性的影响。方法构建针对SGK1的shRNA干扰质粒pGen-3-siSGK1和阴性对照质粒pGen-3-control。转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经G418筛选得到稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;实时定量PCR、免疫荧光以及Western blotting检测shRNA干扰组、阴性对照组及未转染组细胞中SGK1的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞体外生长能力;体外浸润实验、细胞迁移实验检测各组癌细胞的侵袭和转移。结果成功构建针对SGK1基因的shRNA干扰质粒,建立了稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;与阴性对照组和未转染组相比,肿瘤细胞中SGK1的表达水平显著降低(P<0.01);SGK1基因沉默后,人乳腺癌细胞的生长能力、浸润和迁移能力均明显降低(P<0.05)。实验中还发现抑制SGK1基因表达之后,β-catenin的含量也出现明显下降。结论抑制SGK1基因的表达可以显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长,并降低其侵袭转移的能力,其中β-catenin参与了SGK1基因的抑制功能。

亚硒酸钠对Bcap-37人乳腺癌细胞体外增殖及3种酶细胞化学的影响

目的 观察体外培养中亚硒酸钠的浓度变化和培养时间的延长对Bcap 37人乳腺癌细胞增殖及酶活性的影响。 方法 在体外培养Bcap 37人乳腺癌细胞中加入不同浓度的亚硒酸钠 ,常规染色显示其形态和增殖情况及各组Bcap 37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和非特异性酯酶活性。 结果 2 μmol L的亚硒酸钠对肿瘤细胞的生长具有一定的抑制作用 ,而 10 μmol L、5 0 μmol L的亚硒酸钠具有一定的细胞毒性。Bcap 37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、非特异性酯酶活性随着硒浓度的加大 ,培养时间的延长呈下降趋势 ,并且10 μmol L、5 0 μmol L亚硒酸钠培养 2d后 ,3种酶的活性完全消失。 结论 硒对肿瘤细胞的生长和酶的活性都具有抑制作用 ,并且两者之间存在着一致性。

银杏叶提取物提高老年大鼠免疫功能及抗衰老的实验研究

目的:研究银杏叶提取物(GBE)对老年大鼠免疫功能及抗衰老的作用。方法:GBE连续胃饲老年大鼠7天后(0.4mg日/),检测T淋巴细胞增殖水平,NK细胞活性,抗体形成细胞分泌抗体的能力及血清IL-6水平;30天后取血液、肝脏、脑,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)含量及单胺氧化酶(MAO)活力。结果:与对照组比较,T淋巴细胞增殖水平,NK细胞活性,抗体形成细胞分泌抗体的能力及血清IL-6水平显著增加;同时显著增高血液和肝脏中SOD、GSH-Px活力,显著降低MDA含量。MAO活力未见显著差异;显著降低脑中MDA含量,显著降低脑中MAO活力。结论:GBE具有增强老年大鼠的免疫调节功能和抗衰老的作用。

银杏叶提取物对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

湖北民族学院医学院(恩施445000)目的:探讨银杏叶提取物(GBE)对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将30只家兔随机分为3组:即非缺血对照组(Ⅰ组)、缺血再灌注组(Ⅱ组)及缺血再灌注GBE治疗组(Ⅲ组),每组10只。观察缺血30 min和再灌注60 min丙二醛MDA、超氧化物歧化酶SOD、肌酸磷酸肌酶CPK、肌酸磷酸肌酶同工酶CK-MB的影响。结果:Ⅲ组家兔血清CPK、CK-MB、MDA值明显低于Ⅱ组,有极显著性差异P<0.01,心肌组织的SOD活性明显高于Ⅱ组,有极显著性差异P<0.01。结论:GBE能抑制脂质过氧化反应,保护抗氧化酶活力,减少心肌酶的释放,保护心肌细胞膜,减轻心肌缺血再灌注损伤。

葛根异黄酮对AD模型大鼠抗衰老作用研究

目的研究葛根异黄酮对D-半乳糖致衰老大鼠的抗衰老作用。方法 wistar大鼠68只,随机分为对照组、模型组、药物组低、高剂量组,每组17只。造模成功后,第二天开始灌胃给药,药物低、高剂量组每天分别给予40 mg/kg、160 mg/kg葛根异黄酮灌胃,模型组、对照组每天给予80 mg/kg生理盐水灌胃,连续8周后取血液,并将大鼠断头处死后取肝脏及脑组织,制作海马10%组织匀浆,分别检测丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、单胺氧化酶(MAO)水平的变化情况。结果模型组大鼠血液、肝脏、海马中SOD、GSH-Px的活性明显降低,MDA的含量明显增加,与对照组相比有明显差异(P<0.01);与模型组相比,药物低、高剂量组大鼠,除MAO外各项指标明显好转(P<0.05),且高剂量组比低剂量组的作用更明显(P<0.01);血液、肝脏组织中MAO的活力用药后,低、高剂量组均未见显著性改变,而在海马组织中有显著性降低(P<0.05)。结论葛根异黄酮能增加血液和肝脏中SOD、GSH-Px活力,降低血液、肝脏和脑组织中MDA的含量,具有一定的抗衰老作用。

银杏叶提取物提高老年大鼠淋巴细胞免疫功能的初步观察

国内外学者对银杏叶提取物(GinkgobilobaextractGBE)的研究证明,具有捕获游离基、抑制血小板活性因子(PAF)的活性、促进血液循环及脑代谢功能,并在临床上将GBE用来治疗大脑机能不全、动脉粥样硬化等心血管疾病[1].本文研究GBE对老年大鼠免疫功能的调节作用及其机制,为GBE用于临床上作为抗衰老药物提供实验依据.

银杏叶提取物对大鼠免疫功能的影响

目的 :探讨银杏叶提取物 (GBE)对大鼠免疫功能的作用。方法 :应用单克隆抗体和放射性渗入法检测胸腺 T细胞和 Con A诱导的脾细胞增殖反应等技术 ,GBE对大鼠免疫功能影响指标。结果 :GBE增加胸腺 Thy- 1+细胞百分率 ,明显增强 Con A诱导的脾细胞增殖 ,增加腹腔巨噬细胞的吞噬功能 ,提高外周血 T淋巴细胞酯酶染色率 ,使血清 Ig G含量增加 ,明显增加胸腺、脾脏的重量。结论 :GBE具有提高大鼠免疫功能的作用 ,可作为免疫增强剂。

小鼠骨骼肌细胞分离培养的研究

目的 完善骨骼肌细胞的分离培养方法 ,为有关实验提供足量的细胞。方法 通过改进骨骼肌细胞的取材、分离、消化、培养等技术 ,从细胞形态学及细胞计数观察细胞培养情况。结果 用改良的方法分离、培养的小鼠骨骼肌细胞 ,使原代培养的细胞成功率在 85 %以上 ,传代细胞的成功率在 95 %以上。结论 这种分离培养具有方法简便、成功率高、稳定性强。

银杏叶提取物对老年大鼠的抗衰老研究

目的研究银杏叶提取物(GBE)对老年大鼠抗衰老的作用。方法GBE连续胃饲老年大鼠30 d后取血液、肝脏、脑组织,测定其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)含量及单胺氧化酶(MAO)活力。结果与老年对照组比较,老年实验组血液和肝脏中SOD、GSH-Px活力显著增高,MDA含量显著降低,其中GBE低剂量组与老年对照组比较P<0.05,高剂量组与老年对照组比较P<0.01,MAO活力未见显著差异;老年实验组脑组织中MDA含量和MAO活力显著降低,其中GBE低剂量组与老年对照组比较P<0.05,GBE高剂量组与老年对照组比较P<0.01。结论GBE可显著增高老年大鼠血液、肝脏和脑组织中SOD、GSH-Px活力,使血液、肝脏和脑组织中MDA含量显著降低,具有一定的抗衰老作用。

CKLF-1对小鼠淋巴细胞、骨髓细胞及巨噬细胞趋化作用的研究

目的 研究趋化因子CKLF - 1对正常小鼠淋巴细胞、巨噬细胞、骨髓细胞的趋化活性、生物学效应。方法通过质粒的构建 ,BALB/C小鼠骨髓细胞、淋巴细胞、巨噬细胞的分离 ,将CKLF - 1和pcDI转染上清倍比稀释分别作用于小鼠上述细胞 ,测出趋化指数并用MTT法观察骨髓细胞增殖情况。结果 发现CKLF - 1转染上清呈剂量依赖性对小鼠淋巴细胞、巨噬细胞、骨髓细胞有趋化作用 ,对小鼠骨髓细胞也有明显的促增殖作用。结论 CKLF - 1对正常小鼠淋巴细胞、巨噬细胞、骨髓细胞有明显的趋化作用 ,提示了CKLF - 1对造血障碍性疾病。

火棘粉对大鼠抗衰老及其抗疲劳效果的实验研究

目的研究火棘粉对大鼠抗衰老及其抗疲劳效果。方法采用昆明大鼠为实验对象,通过饲喂不同比例的火棘粉饲料4周以后,在抗疲劳实验中,以血清乳酸脱氢酶（LDH）活力、血乳酸（BLA）、肌糖原（MG）、肝糖原（LG）等4个生理参数为指标观察火棘粉的抗疲劳效应,检测大鼠脑组织的MDA和GSH含量。结果饲喂4周火棘粉剂的大鼠,其LDH、LG含量均显著高于对照组;其抗疲劳时间亦显著增长,且抗疲劳实验30min和60min后的血乳酸水平均低于对照组。在检测大鼠脑组织的MDA和GSH含量时发现4%～6%剂量火棘粉能降低MDA含量,提高GSH含量。结论火棘粉有一定的抗衰老及抗疲劳作用。

火棘对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的实验研究

目的研究火棘对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化的作用。方法将小鼠随机分为生理盐水对照组(简称生理盐水组),AD模型组(简称模型组),药物(低、高剂量)组,每组10只,共40只。连续胃饲小鼠8周后取血液、肝脏,并将小鼠断头处死,制作海马10%组织匀浆,分别取血液、肝脏、脑,测定超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力、丙二醛含量及单胺氧化酶活力。结果与对照组比较,药物显著增加血液和肝脏中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力,显著降低丙二醛含量;显著降低脑中丙二醛含量,显著降低脑中单胺氧化酶活力;单胺氧化酶活力未见显著差异。结论火棘能增加血液和肝脏中超氧化物歧化酶活力,能降低血液、肝脏和脑组织中丙二醛活性,具有一定的抗氧化作用。

恩施州火棘营养成分鉴定及其对小鼠抗疲劳作用的研究

目的研究火棘(Pyracantha fortuneana)的主要营养成分及其抗疲劳效果。方法把饲喂不同比例的火棘饲料后的昆明小鼠,在抗疲劳实验中,以血清乳酸脱氢酶(LDH)、血乳酸(BLA)、肌糖原(MG)、肝糖原(LG)等4个生理参数为指标观察火棘的抗疲劳效应。结果恩施州火棘均含有丰富的糖类、蛋白质、脂类,特别是8种必需氨基酸和多种不饱和脂肪酸,多种维生素等;饲喂4周火棘剂的小鼠,其LDH、LG含量均显著高于对照组;其抗疲劳时间亦显著增长,且抗疲劳实验30min和60min后的血乳酸(BLA)水平均低于对照组。结论恩施州火棘营养成分高,有较好的抗疲劳作用。