长链非编码RNA AK005183干扰载体构建及慢病毒包装

为研究长链非编码RNA AK005183在精子发生中的功能,设计、合成了干扰AK005183表达的shRNA序列,并构建其干扰表达重组慢病毒载体CD513B-U6-AK005183,将干扰表达质粒及对照质粒分别转染NIH3T3细胞系,实时定量PCR检测CD513B-U6-AK005183质粒对AK005183的表达具有较好的干扰效果。利用第三代慢病毒包装系统,将CD513B-U6-AK005183、pGag-Pol、pRsv-rev、pVSV-G质粒共转染293T细胞系,包装得到滴度为5×106 TU/mL的干扰表达重组慢病毒。用CD513B-U6-AK005183慢病毒转导GC-1spg细胞系,检测到AK005183的表达下调64%。表明本研究成功构建并包装得到高效干扰长链非编码RNA AK005183表达的重组慢病毒,将为深入研究长链非编码RNA在精子发生过程中的功能奠定了基础。

小鼠miR-125a超表达载体的构建

为了探明miR-125a在精子发生中的功能,以小鼠基因组DNA为模板扩增miR-125a的前体片段(pre-miR-125a),经过双酶切后连接入质粒pcDNA3.1(+),构建miR-125a超表达载体(pcDNA3.1(+)-miR-125a);将pcDNA3.1(+)-miR-125a转染至GC-1spg细胞系,通过qRT-PCR和Western Blot验证其超表达效果。结果表明:PCR扩增得到约290bp的miR-125a前体片段,成功构建了pcDNA3.1(+)-miR-125a过表达载体,在GC-1spg生殖细胞系中约有3.5倍的超表达效果,为深入研究miRNAs在精子发生过程的功能及其机制奠定基础。

初诊不孕不育夫妇中男性的性压力状况调查研究

目的研究初诊不孕不育夫妇中男性的性压力状况。方法随机选取我院2016年4月～2018年3月收治的不育患者638例,检查患者精液质量,按照病情分成精液正常组279例和精液异常组359例,精液异常组又分为少弱精组261例和无精组98例,对三组患者分别进行调查研究,并对比其压力分数。结果所有患者压力评分分值较高,精液异常组患者的压力评分分值显著高于精液正常组,精液异常组中无精组的压力高于少精弱精组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论初诊不孕不育夫妇中男性的性压力较大,并且性压力与男性精液质量呈现相关性。

行为干预对睡眠障碍IVF-ET患者妊娠结局的影响

目的探讨行为干预对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期内睡眠障碍女性患者妊娠结局的影响。方法选择94例进入IVF-ET周期女性睡眠障碍者作为研究对象,随机分为两组,试验组采用综合行为干预,对照组为常规护理;分析在不同时间点应激水平、睡眠质量、匹兹堡睡眠指数、皮质醇激素变化,产后统计并分析妊娠结局和助孕满意度。结果经认知行为干预后,促性腺激素使用天数和用量、子宫内膜厚度及取卵数量均无统计学差异(P>0.05);但是试验组的匹兹堡睡眠指数和血浆皮质醇浓度显著下降(P <0.05),临床妊娠率从53.19%提高到63.83%(P>0.05),活产率和患者满意度均显著提高(P <0.05)。结论进入IVF-ET周期女性患者经过行为干预可以显著提高睡眠质量,降低应激激素水平;同时通过行为干预可以有效提高妊娠率和活产率的满意度。