全身麻醉对婴幼儿大脑发育影响的临床研究

目的探讨全身麻醉对婴幼儿术后大脑发育的影响。方法对2012—2015年期间年龄为0~3岁时在广西医科大学第一附属医院接受全身麻醉下的手术治疗儿童(研究组)共429例在其3~6岁时进行回顾性分析。按照研究组儿童生活的城市地区、年龄、性别、民族等特征采取1∶1配对设计,选取0~3岁期间未接受过全身麻醉的3~6岁儿童共429例作为对照。查阅和记录研究组儿童的麻醉记录单及基本信息,将研究组儿童按麻醉时长分为三组:<1 h组(A1组)、1~2 h组(A2组)、>2 h组(A3组),按手术麻醉次数分为两组:单次组(B1组)、2次组(B2组),按苏醒时间分为三组:<30 min组(C1组)、30~60 min组(C2组)、>60 min组(C3组)。采用韦氏幼儿智力量表第四版(WPPSI-IV)综合评估上述儿童的总体认知能力及智力活动水平,Achenbach儿童行为量表(CBCL)总得分评估儿童行为、情绪和社会能力,盖塞尔发展量表(Gesell)评价儿童的中枢神经系统功能及发育水平。结果适用2岁6个月~4岁前韦氏智力量表的儿童中:与对照组比较,研究组儿童的工作记忆指数得分降低;适用4岁~6岁11个月韦氏智力量表的儿童中:与对照组比较,研究组儿童的言语理解指数、流体推理指数、加工速度指数、工作记忆指数得分和盖塞尔量表的发育商数降低(P<0.05)。与麻醉时长A1组、A2组比较,A3组的总智商、工作记忆指数得分降低(P<0.05);与手术麻醉次数B1组比较,B2组的总智商、工作记忆指数、发育商数得分降低(P<0.05);各组间苏醒时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论婴幼儿在大脑发育期接受全身麻醉可能对其神经系统发育产生影响,接受2次或时长大于2 h全身麻醉的婴幼儿在智力发育的过程中的短时记忆和存储、加工以及输出信息的能力更易受影响。

p90RSK/Bcl-2信号通路在异丙酚逆转谷氨酸诱发的大鼠星型胶质细胞毒性中的作用

目的:探讨p90RSK/Bcl-2信号通路在异丙酚逆转谷氨酸诱发的大鼠星型胶质细胞毒性中的作用及机制。方法:体外培养原代星形胶质细胞至第7天,按随机数字表法分为对照组(C组)、异丙酚组(P组)、谷氨酸组(G组)、抑制剂组(I组)、异丙酚+谷氨酸组(PG组)和异丙酚组+谷氨酸+抑制剂组(PGI组),每组12例。C组不做任何处理,P组、G组和I组分别用100μmol/L异丙酚孵育6 h、3.5 mmol/L谷氨酸孵育6 h和10μmol/L p90RSK抑制剂LJH685孵育30 min,PG组先用100μmol/L异丙酚孵育6 h后用3.5 mmol/L谷氨酸孵育6 h,PGI组先用10μmol/L LJH685孵育30 min,后同PG组。采用CCK-8法检测各组星形胶质细胞的活力,Western blot法检测活化caspase-3、Bcl-2、Bax和p90RSK的蛋白表达水平,AnnexinⅤ-PI凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡情况,qPCR法检测各组Bcl-2mRNA的表达水平。结果:与C组比较,G组和I组星形胶质细胞的活力下降、凋亡率明显升高,活化caspase-3和Bax表达上调,Bcl-2和p90RSK表达下调(P<0.05);与PG组比较,G组和PGI组星形胶质细胞的活力下降、凋亡率明显升高,活化caspase-3和Bax表达上调,Bcl-2和p90RSK表达下调(P<0.05)。结论:异丙酚逆转谷氨酸诱发的大鼠星型胶质细胞毒性中的机制可能与激活p90RSK/Bcl-2信号通路有关。

麻醉药对发育期大脑神经毒性的研究进展

近年来,随外科学技术的迅速进步,手术治疗适应证也在相应扩大,而麻醉是手术开展前的一个重要步骤。麻醉药给发育期大脑带来的神经毒性作用日益受到临床关注。目前缺乏有效证据证实动物实验结果与临床存在相关性,但已有学者观察到暴露在某些麻醉药后可出现神经功能短暂性受损,从而不利于脑部发育。本文就发育期大脑解剖与生理特性、麻醉药神经毒性机制、动物实验、临床研究、目前研究中存在争议的问题等方面阐述,给临床提供一定指导作用。建议避免于脑部发育期开展手术,同时儿科麻醉中应尽可能避免采取多类麻醉药。

超声引导下神经阻滞技术在基层进修医师培训中的教学体会

在临床医学中,神经阻滞麻醉较为常见也备受关注.而神经阻滞麻醉教学也基于超声技术实现了理论讲解与实操演练的融合,基于超声影像技术进行神经阻滞技术的培训教学是麻醉专业医师培训的新思路和新举措.本文主要就超声技术引导下的神经阻滞麻醉教学进行探讨,明确其理论教学和模拟实操教学的现实优势,明确超声引导下神经阻滞技术循序渐进的教学实施原则,以期更好地推动麻醉教学与培训,也做好神经阻滞麻醉教学中超声技术应用的推广宣传.

CD38和p90RSK/CREB/Bcl-2信号通路在丙泊酚预处理星形胶质细胞减轻谷氨酸神经毒性中的作用

目的:探讨CD38和p90RSK/CREB/Bcl-2信号通路在丙泊酚预处理星形胶质细胞减轻谷氨酸神经毒性中的作用。方法:将PC12细胞随机分为4组:对照组(C组)PC12细胞不做任何处理;谷氨酸组(G组)用3.5 mmol/L谷氨酸孵育PC12细胞6 h;丙泊酚预处理组(PG组)先用100μmol/L丙泊酚预处理星型胶质细胞6 h,收集培养液,并将其加入到3.5 mmol/L谷氨酸处理的PC12细胞中孵育6 h;CD38基因沉默组(CPG组)先将CD38 siRNA转染入星形胶质细胞,再用100μmol/L丙泊酚预处理星型胶质细胞6 h,收集培养液,并将其加入到3.5 mmol/L谷氨酸处理的PC12细胞中孵育6 h。应用ROS和ATP检测试剂盒测定各组PC12细胞ROS和ATP的含量变化,采用蛋白质免疫印迹实验(Western blotting)检测PC12细胞p90RSK、pCREB、Bcl-2蛋白的表达,流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡情况。结果:与C组比较,G组ROS含量升高,ATP含量降低,p90RSK、pCREB和Bcl-2蛋白表达下调,PC12细胞凋亡增多(均P<0.05);与G组比较,PG组ROS含量降低,ATP含量升高,p90RSK、pCREB和Bcl-2蛋白表达上调,PC12细胞凋亡减少(均P<0.05);与PG组比较,CPG组ROS含量升高,ATP含量降低,p90RSK、pCREB和Bcl-2蛋白表达下调且凋亡增加(均P<0.05)。结论:丙泊酚预处理星形胶质细胞可以减轻谷氨酸的神经毒性,其机制可能与激活星形胶质细胞膜上的CD38蛋白,从而上调PC12细胞的p90RSK/CREB/Bcl-2信号通路有关。

全身麻醉下进行手术治疗的婴幼儿的大脑发育影响因素分析

目的:回顾性分析全身麻醉下接受手术治疗的婴幼儿的大脑发育影响因素。方法:选取0~3岁期间在广西医科大学第一附属医院接受过全身麻醉进行手术治疗的3~6岁儿童为实验组(n=447),并根据实验组儿童的年龄、性别、种族等按照1∶1匹配原则选取0~3岁期间未接受全身麻醉及手术的3~6岁儿童作为相应对照组(n=459)。根据麻醉记录单将患儿按手术部位分为四肢手术组(A_(1)组)、下腹部手术组(A_(2)组)、上腹部手术组(A_(3)组)、头面部手术组(A_(4)组)、会阴部手术组(A_(5)组);按手术时体重分为<5 kg组(B_(1)组)、5~10 kg组(B_(2)组)、>10~15 kg组(B_(3)组)、>15 kg组(B_(4)组);按手术时年龄分为0~5月组(C_(1)组)、6~12月组(C_(2)组)、>1~2岁组(C_(3)组)、>2~3岁组(C_(4)组);按住院天数分为1~5天组(D_(1)组)、>5~10天组(D_(2)组)、>10天组(D_(3)组);按手术时长分为<1 h组(E_(1)组)、1~2 h组(E_(2)组)、>2 h组(E_(3)组);按民族分为汉族组(F_(1)组)、壮族组(F_(2)组)、其它民族组(F_(3)组);按性别分为女孩组(G_(1)组)、男孩组(G_(2)组)。应用韦氏幼儿智力量表第四版(WPPSI-IV)、学龄前儿童行为学评分量表(CBCL)和盖塞尔发展量表(Gesell)对上述婴幼儿的神经认知发育进行评估。结果:实验组韦氏量表的工作记忆指数(WMI)得分(97.51±8.35)分明显低于对照组WMI得分(102.03±11.52)分(P<0.05)。与B_(1)组比较,B_(2)组、B_(3)组、B_(4)组的总智商(FSIQ)、WMI、发育商数(DQ)值得分升高(均P<0.05);与B_(2)组比较,B_(3)组、B_(4)组的FSIQ、WMI得分升高,B_(4)组的CBCL得分降低(均P<0.05);与B_(3)组比较,B_(4)组的FSIQ得分升高(P<0.05)。与C_(1)组比较,C_(2)组的DQ值得分升高,C_(3)组、C_(4)组的FSIQ得分升高,C_(4)组的WMI得分升高(均P<0.05);与C_(2)组比较,C_(3)组、C_(4)组的FSIQ得分升高,C_(4)组的WMI得分升高(P<0.05)。与D_(3)组比较,D_(1)组、D_(2)组的FSIQ、WMI、DQ值得分均升高(均P<0.05)。与E_(3)组比较,E_(1)组、E_(2)组的FSIQ,WMI,DQ值得分均升高(均P<0.05)。结论:手术时年龄越小、体重越低、手术时间越长,则出现神经发育不良事件的风险越大。

异丙酚对胎鼠离体海马神经元脑源性神经营养因子表达的影响

目的:评价异丙酚对胎鼠离体海马神经元脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法:将SD大鼠腹中14 d胎鼠处死,分离海马组织,剪碎研磨,消化,吹打及离心。神经元体外培养至第8天,按随机数字表法分为3组:空白对照组(C组);20%脂肪乳剂对照组(I组)和100μmol/L异丙酚组(P组)。C组不做任何处理,I组加入20%脂肪乳剂,P组加入异丙酚孵育3 h至其终浓度为100μmol/L。采用免疫细胞化学法鉴定神经元并计算其纯度,CCK-8法检测神经元活性并绘制生长曲线,RTqPCR检测BDNF的mRNA表达量,Western blotting法检测BDNF蛋白的表达量。结果:与C组比较,P组神经元活性明显降低,BDNF的mRNA及蛋白表达量降低(P<0.05);I组神经元活力未见明显差异。结论:异丙酚通过下调BDNF对胎鼠海马神经元产生神经毒性作用。

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/基质金属蛋白酶-9信号通路在芬太尼抑制人胃癌细胞侵袭和迁移中的作用

目的观察磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/基质金属蛋白酶(MMP)-9信号通路在芬太尼抑制人胃癌MGC-803细胞侵袭和迁移中的作用。方法将人胃癌MGC-803细胞随机分为空白对照组(C组)、芬太尼组(F组),LY294002组(LY组),SB-3CT组(SB组),LY294002+芬太尼组(FLY组)和SB-3CT+芬太尼组(FSB组)。Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力,实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测MMP-9和Akt的mRNA和蛋白质的表达,使用方差分析和独立样本t检验分析组间差异。结果F组胃癌细胞侵袭数低于C组(35.91±3.36比48.46±4.86,t=3.679,P<0.05)、迁移数低于C组(74.75±3.76比96.00±5.20,t=5.739,P<0.05)细胞迁移率(%)低于C组(14.29±4.29比22.43±3.37,t=3.591,P<0.05),Akt mRNA表达低于C组(0.77±0.02比1.00,t=8.110,P<0.05)、MMP-9 mRNA表达低于C组(0.87±0.08比1.00,t=2.967,P<0.05)、Akt-1蛋白表达低于C组(0.76±0.04比0.90±0.05,t=3.940,P<0.05)和MMP-9蛋白表达低于C组(0.76±0.05比0.94±0.04,t=4.774,P<0.05),差异均有统计学意义。FLY组胃癌细胞侵袭数低于LY组(18.45±4.86比33.62±4.13,t=4.999,P<0.05)、细胞迁移数低于LY组(42.79±3.56比71.79±7.60,t=5.986,P<0.05)和细胞迁移率(%)低于LY组(7.52±1.30比11.02±1.73,t=2.811,P<0.05),FLY组Akt mRNA表达低于LY组(0.60±0.05比0.76±0.17,t=3.468,P<0.05)、MMP-9 mRNA表达低于LY组(0.75±0.06比0.88±0.03,t=3.288,P<0.05)、Akt-1蛋白表达低于LY组(0.60±0.02比0.75±0.05,t=4.783,P<0.05)和MMP-9蛋白表达低于LY组(0.48±0.03比0.74±0.06,t=7.266,P<0.05),差异均有统计学意义。FSB组胃癌细胞侵袭数低于SB组(18.67±2.15比32.33±6.20,t=3.607,P<0.05)、细胞迁移数低于SB组(45.67±4.63比75.04±4.47,t=7.898,P<0.05)和细胞迁移率(%)低于SB组(7.09±1.69比14.39±2.06,t=4.745,P<0.05),FSB组Akt mRNA表达低于SB组(0.53±0.11比0.76±0.07,t=2.950,P<0.05)、MMP-9 mRNA低于SB组表达(0.63±0.07比0.84±0.01,t=3.687,P<0.05)、Akt-1蛋白表达低于SB组(0.61±0.03比0.75±0.04,t=4.573,P<0.05)和MMP-9蛋白表达低于SB组(0.53±0.07比0.72±0.05,t=3.730,P<0.05),差异均有统计学意义。芬太尼可降低细胞侵袭和迁移能力,MMP-9和p-Akt表达减少,且芬太尼联合LY294002或SB-3CT较单独用药时进一步加强了抑制效果。结论芬太尼抑制人胃癌MGC-803细胞侵袭和迁移的机制与抑制PI3K/Akt/MMP-9信号通路有关。

ERK1/2/CREB/BDNF信号通路在右美托咪定抑制丙泊酚致胎鼠离体海马神经元凋亡中的作用

目的评价细胞外信号调节激酶(ERK1/2)/环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路在右美托咪定抑制丙泊酚致胎鼠离体海马神经元凋亡中的作用。方法将孕16 d SD大鼠处死,取胎鼠海马神经元,体外培养原代海马神经元至第7天,采用随机数字表法分为9组(n=12):对照组(C组)、脂肪乳剂组(I组)、二甲基亚砜组(DMSO组)、右美托咪定组(D组)、丙泊酚组(P组)、丙泊酚+右美托咪定组(PD组)、PD98059+丙泊酚+右美托咪定组(PDP组)、MH89+丙泊酚+右美托咪定组(HDP组)和KG501+丙泊酚+右美托咪定组(KDP组)。C组不做任何处理;I组加入20%脂肪乳剂,孵育30 min;DMSO组加入0.25%DMSO,孵育30 min;D组加入右美托咪定,终浓度10μmol/L,孵育30 min;P组加入丙泊酚,终浓度100μmol/L,孵育3 h;PD组加入右美托咪定,终浓度10μmol/L,孵育30 min,再加入丙泊酚,终浓度100μmol/L,继续孵育3 h;PDP组、HDP组和KDP组分别加入25μmol PD98059(p-ERK1/2抑制剂)、10μmol H89(p-CREB抑制剂)、25μmol KG501(CREB抑制剂)孵育30 min,再加入右美托咪定,终浓度10μmol/L,孵育30 min,最后加入丙泊酚,终浓度100μmol/L,继续孵育3 h。透射电镜下观察细胞超微结构,采用流式细胞术检测神经元凋亡情况,qRT-PCR法检测ERK1/2、CREB和BDNF mRNA的表达,Western blot法检测p-ERK1/2、CREB、p-CREB、BDNF及cleaved-caspase-3的表达。结果与C组比较,P组、PD组、PDP组、HDP组和KDP组神经元凋亡率升高,p-ERK 1/2和p-CREB表达下调,cleaved-caspase-3表达上调,P组、PDP组、HDP组和KDP组BDNF表达下调(P<0.05);与P组比较,PD组神经元凋亡率降低,p-ERK1/2、p-CREB和BDNF表达上调,cleaved-caspase-3表达下调(P<0.05);与PD组比较,PDP组、HDP组和KDP组神经元凋亡率升高,p-ERK1/2、p-CREB和BDNF表达下调,cleaved-caspase-3表达上调(P<0.05)。结论ERK1/2/CREB/BDNF信号通路参与了右美托咪定抑制丙泊酚致胎鼠离体海马神经元凋亡的过程。