桑叶降糖有效部位提取工艺及作用机制研究进展

桑叶为桑属(桑科)植物桑Morus alba的干燥叶,被广泛应用于临床,其功效包括疏散风热、清肺润燥、平肝明目、凉血止血等;桑叶自古就具有调节血糖的作用,现代研究发现桑叶降糖有效部位主要包括黄酮、生物碱、多糖、酚类等。降糖有效部位提取工艺主要包括传统的溶剂提取法如水提法与醇提法,以及超声辅助、微波辅助等,除此之外,一些新型提取方法正在兴起,例如CO_(2)超临界流体萃取法、酶解法、浊点萃取法等。桑叶降糖机制涉及多成分、多通路、多靶点,主要通过改善糖脂代谢、保护胰腺β细胞、减轻胰岛素抵抗等减轻高血糖对机体带来的损害并调整机体恢复正常生理功能。目前国内外已针对糖尿病展开大量研究,但其发病原因及根治方法并未得出,糖尿病仍是危害人类健康的重大疾病,亟待解决。通过检索中国知网、Web of Science及PubMed等数据库,对国内外桑叶降糖活性成分提取工艺及作用机制相关文献进行整理和归纳,从桑叶降糖有效部位的角度出发,分析桑叶黄酮、多糖、生物碱等各类降糖成分适用的提取方法,对比传统与新兴提取工艺优缺点,结合该课题组多年来对桑叶有效部位的提取工艺、降糖药效及其机制研究成果做进一步总结和分析,以期对桑叶降糖有效部位提取工艺的优化、降糖化学成分及其作用机制研究、新药开发和临床应用提供有效的理论支撑。

桑叶水提物对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用及其机制

目的:观察桑叶水提物(MLE)对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用,并探讨其机制。方法:24只雄性C57BLKS/JGpt-Leprdb/Leprdb(db/db)小鼠按空腹血糖(FBG)值随机分为模型组、二甲双胍组、桑叶水提物低剂量(MLE-L)组和桑叶水提物高剂量(MLE-H)组,每组6只;另设6只C57BLKS/JGpt同窝野生型(m/m)小鼠作为正常组。各给药组小鼠灌胃相应药物,正常组和模型组小鼠均给予等体积去离子水,每日灌胃1次,连续给药8周。测定小鼠体质量、双侧肾脏绝对重量、FBG,并进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT),苏木素-伊红染色、过碘酸雪夫染色观察肾脏组织病理变化,检测血清肌酐(SCr)、血清尿素氮(BUN)含量,酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和尿微量白蛋白(U-mAlb)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量、肾脏绝对重量、FBG、OGTT曲线下面积(AUC)显著升高(P<0.01),SCr、BUN、U-mAlb含量显著升高(P<0.01),血清TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.01),肾组织出现肾小球基底膜增厚,炎性细胞浸润明显,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠体质量差异无统计学意义;MLE-H组、二甲双胍组小鼠肾脏绝对重量明显降低(P<0.05,P<0.01);第4~8周二甲双胍组、MLE-L组、MLE-H组FBG明显降低(P<0.05,P<0.01);MLE-H组、二甲双胍组小鼠AUC显著降低(P<0.01),MLE-L组小鼠AUC呈下降趋势,差异无统计学意义;MLE-H组、二甲双胍组小鼠SCr、BUN、U-mAlb含量显著降低(P<0.01),MLE-L组小鼠SCr、U-mAlb含量显著降低(P<0.01);MLE-H组、二甲双胍组小鼠血清TNF-α、IL-6含量显著降低(P<0.01);各给药组小鼠肾组织病变均得到不同程度改善;MLE-H组小鼠肾组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:桑叶水提物可改善db/db糖尿病小鼠肾组织结构和功能,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

桑叶水提物对2型糖尿病小鼠皮下脂肪组织氧化应激的影响及机制

目的:观察桑叶水提物(MLE)对2型糖尿病(T2DM)小鼠脂肪组织氧化应激的影响,并探讨其作用机制。方法:24只雄性db/db小鼠按血糖、体质量随机分为模型组、二甲双胍组、桑叶水提物低剂量(MLE-L)组和桑叶水提物高剂量(MLE-H)组,每组6只;另设6只C57BLKS/JGpt同窝野生型(m/m)小鼠为正常组。二甲双胍组给予200 mg·kg^(-1)二甲双胍溶液,MLE-L组、MLE-H组分别给予2、4 g·kg^(-1)MLE,正常组和模型组均给予等体积去离子水,每日灌胃1次,连续给药8周。测定小鼠体质量、皮下脂肪指数、空腹血糖(FBG)及口服糖耐量水平,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠皮下脂肪组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)、NADPH氧化酶4(NOX4)蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,T2DM小鼠经桑叶水提物给药后,空腹血糖水平、口服糖耐量水平(OGTT)、脂肪组织指数均明显下降(P<0.05,P<0.01);血清抗氧化物酶SOD、GSH含量明显上升,氧化应激损伤标志物MDA水平明显下降(P<0.05,P<0.01);脂肪组织中SIRT1蛋白表达显著上升、NOX4蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论:桑叶水提物可通过缓解T2DM小鼠脂肪组织氧化应激状态,从而降低血糖,改善糖尿病的作用。